2型糖尿病的中醫證型與激酶核因子-KB相關性研究*

何君婷 龔文波

寧波市中醫院 浙江 寧波315000

2型糖尿病是一種慢性炎癥性疾病[1]。激酶核因子-KB（NF-KB）的激活是糖尿病炎癥反應的重要途徑和核心指標。在2型糖尿病中醫證型與炎癥因子相關性研究方面，目前多個研究都認為炎癥因子可作為2型糖尿病進行中醫分型的重要客觀指標。本研究擬從NF-KB炎癥通路激活水平來研究2 型糖尿病氣虛、陰虛、氣陰兩虛證三個基本中醫證型之間炎癥反應的異同，以期為進一步探討中醫益氣養陰法改善2 型糖尿病炎癥反應的機制提供依據，同時對指導臨床中醫辨證治療糖尿病有較大意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料：選取2016年至2017年寧波市中醫院內分泌科門診就診2型糖尿病患者作為研究對象，根據樣本量公式估算，收集大約275 例病例納入本次研究。通過規范化的四診采集、判定，選取氣虛證、陰虛證、氣陰兩虛證共202 例作為3 個試驗組，并選取本院體檢中心健康人群73例為對照研究。其中對照組男性37例，女性36 例；年齡52.1±8.1 歲；體重指數（BMI）為22.12±2.86。氣虛組共68 例，男性35 例，女性33 例；年齡54.3±8.8 歲；病程5.21±2.18 年；體重指數（BMI）為23.32±3.06。陰虛組共62例，男性30例，女性32例；年齡55.3±8.6 歲；病程6.81±2.73 年；體重指數（BMI）為22.72±2.87。氣陰兩虛組共72 例，男性38 例，女性34 例；年齡52.3±7.9 歲；病程5.76±3.35 年；體重指數（BMI）為22.09±2.48。經比較，4 組患者的一般資料差異無統計學意義（P＞0.05）。

1.2 診斷與排除標準：分述如下。

1.2.1 2 型糖尿病診斷標準：參照1999 年WHO 推薦的診斷標準：空腹血糖(FPG)7.0mmol/L；或糖耐量試驗(OGTT)11.1mmol/L；或隨機血糖11.1mmol/L。

1.2.2 排除標準：①糖尿病急性并發癥，如糖尿病酮癥、糖尿病高滲性昏迷；②糖尿病各種應激狀態：如感染、創傷、大出血等；③糖尿病其他兼癥（如腫瘤、免疫系統或血液系統疾病者）；④患者因嚴重心腦腎并發癥者；⑤妊娠或哺乳期婦女。

1.2.3 中醫證候判定標準：參照《中藥新藥臨床研究指導原則》《中西醫結合糖尿病診療標準》《消渴病（糖尿病）中醫分期辨證與療效評定標準》的標準擬定：①氣虛證主癥：神疲乏力，少氣懶言，汗出氣短，脈細無力；次癥：自汗，怔忡健忘，舌淡或淡胖。符合2項主癥及1項次癥即可診斷。②陰虛證主癥：咽干口渴，怕熱汗多或有盜汗，手足心或五心煩熱，舌紅、苔薄黃或薄白；次癥：消谷善饑，形體消瘦，大便秘結，細數。符合2項主癥及1項次癥即可診斷。③氣陰兩虛證主癥：神疲乏力，汗出氣短，五心煩熱，咽干口渴，舌紅少津，苔薄或白膩；次癥：怔忡健忘，多食易饑，心悸失眠，脈細或濡細。符合2 項主癥及1項次癥即可診斷。

1.3 實驗室指標測定：采集所有研究對象清晨空腹靜脈血5ml，運用免疫印跡實驗(western blotting)測定NF-KB 蛋白表達水平，具體操作嚴格按試劑盒說明書進行，NF KappaB p65 ELISA 試 劑 盒 購 自abcom 公 司（ab176648），并同時測定血清糖化血紅蛋白（HbA1C），C反應蛋白（CRP）等相關指標。

1.4 統計學方法：計數資料以例數表示，用χ2檢驗比較各組炎性因子的水平差異，計量資料符合正態分布的數據以±s表示，非正態分布的數據行對數轉換后表示為±s再進行統計分析。兩組間比較采用t檢驗，多組間比較采用方差分析，均以P＜0.05 為有顯著性差異。

2 結果

2.1 4 組FPG、HbA1C 及hs-CRP 水平比較：氣陰兩虛組、氣虛組、陰虛組hs-CRP、FPG、HbA1c 均顯著高于對照組(P＜0.05)；氣陰兩虛組、氣虛組、陰虛組間hs-CRP、FPG、HbA1c無顯著差異(P＞0.05）,見表1。

表1 4組FPG、HbA1C及hs-CRP水平比較（±s）

表1 4組FPG、HbA1C及hs-CRP水平比較（±s）

注：與對照組比較，*P＜0.05。

組別陰虛組氣虛組氣陰兩虛組對照組例數62 68 72 73 FPG（mmol/L）8.15±2.87*7.67±2.54*7.86±2.45*4.65±0.47 HbA1C（%）7.73±1.53*7.23±1.24*6.95±1.05*4.65±0.98 hs-CRP（mg/L）9.07±4.12*8.67±3.78*9.67±4.89*5.67±2.54

2.2 4 組患者的NF-KB 水平比較：氣陰兩虛組NF-KB 1710.03±287.23ng/ml，明顯高于對照組的1448.96±287.23ng/ml 及氣虛組的1543.82±342.38ng/ml（P＜0.01），高于 陰 虛組的1543.82±342.38ng/ml(P＜0.05)。氣虛組患者NF-KB 水平與對照組比較差異無統計學意義(P＞0.05)；陰虛組患者NF-KB 水平與對照組比較差異亦無統計學意義(P＞0.05）。

3 討論

動物實驗表明,過度表達誘導炎癥的因子可同時引起數個代謝性危險因素,導致肥胖、脂肪肝及糖耐量受損[2],予抗炎治療后,這些危險因素可部分得到改善[2-3]。抗炎治療糖尿病已取得可喜的進展，白細胞介素1受體抗體改善胰島功能[4]；黃連素治療伴脂代謝紊亂的2 型糖尿病有效[5]；因此值得關注和研究抗炎治療糖尿病。

NF-KB 是1986 年由Sen 和Baltimore 在B 細胞內發現的調節基因轉錄的關鍵因子之一,是一系列異二聚體家族的總稱，是一種特異性的轉錄因子[6]。在大多數細胞中，NF-KB 構成同源或異源二聚體以未激活狀態與IkBs 結合存在于細胞質中[7]。當受到刺激因子如病毒、放射線、氧自由基、細菌脂多糖(LPS)、TNF-α 等刺激時，NFKB-IKBs 復合物被激活，NF-KB 解離出來并轉移至細胞核，與相應位點特異性結合促進相應基因的轉錄，從而啟動和調節免疫反應，介導細胞黏附、分化、增殖、凋亡和炎癥反應，并在各種免疫炎癥性疾病和腫瘤的發生發展中發揮重要作用[8-9]。現有研究表明，NF-KB 在血中的表達水平可提示炎癥反應，在本研究中，氣陰兩虛患者的NF-KB水平顯著高于其它組。

氣虛或氣機不利是糖尿病的基本病機，在疾病發生發展過程中，會演變為陰虛、氣陰兩虛證[10]，臨床實踐中，應用益氣、養陰、益氣養陰法治療2 型糖尿病，均能收到較好療效，而氣陰兩虛證出現的較氣虛證和陰虛證在病程上相對較晚。明代醫家樓英所著的《醫學綱目》中指出“蓋肺藏氣，肺無病則氣能管攝津液之精微，津液之精微者收養筋骨之血脈，余者溲，肺病則津液無氣管攝，津微亦隨之溲下”，結果是氣陰俱損，形成氣陰兩虛之體質。國內相關研究也表明，應用益氣養陰法能夠抑制機體炎癥因子[11-12]。結合本研究結果，可以推論在2 型糖尿病的發生發展過程中，氣陰兩虛證可能是2型糖尿病患者機體產生明顯炎癥反應的一個階段，其炎癥因子的表達較單純的氣虛和陰虛階段均更明確，臨床中醫治療2 型糖尿病應當辨證論治，分清氣虛、陰虛、氣陰兩虛的不同，辨證處方，才能取得良好療效。NF-KB 的表達水平能否作為氣陰兩虛型2型糖尿病的辨證客觀依據，尚需多中心、大樣本的研究予以證實。