羅 影,吳啟康,陳周秀
(1.西北民族大學化工學院,甘肅蘭州 730124;2.牡丹江師范學院生命科學與技術學院,黑龍江牡丹江 157012)
全葉千里光 (Senecio cannabifolius var.integrifolius(Koidz.)Kitam.)是菊科千里光屬植物,多年生根狀莖草本,產自東北(吉林),生于草甸、濕草甸、林下,主要生長于俄羅斯遠東地區和日本。全葉千里光又稱返魂草、紫菀,是東北地區野外常見的中藥植物,對肺部相關疾病有著很好的療效,是中成藥肺寧顆粒的主要成分。現代藥理研究表明,全葉千里光揮發油具有抗氧化、抗微生物、抗感染、抗病毒、抗突變及抗腫瘤、抗過敏、酶抑制,以及驅蟲、殺蟲等多種生理活性[1-3]。因此,全葉千里光的活性物質的提取與鑒定分析,以及藥理作用機制等需要進一步研究。試驗采用加熱回流法提取全葉千里光活性物質,分別研究不同料液比下其提取含量,為今后的研究與開發奠定基礎。
全葉千里光,購于黑龍江省哈爾濱地區農家。全葉千里光收購后取葉花,除桿莖,花葉采用55℃烘箱干燥至恒質量,再采用中藥粉碎機粉碎成粉末,過40目篩,放入密封袋中備用。
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稱取3.000 g全葉千里光花葉粉末,包成脂肪包,放入100 mL圓底燒瓶中,按照不同料液比(1∶8,1∶12,1∶16,1∶20,1∶24) 加入石油醚浸泡6 h,水浴鍋加熱回流2 h,更換石油醚,重復回流第2次2 h,合并2次回流液。采用紫外分光光度計進行全譜波長掃描,確定提取液最佳的吸光度波長,于最佳吸光度波長下檢測提取液的濃度。
由于按照不同料液比加入石油醚,提取液的體積不同,需按照公式進行換算為統一標準方可比較。數據采用SPSS進行分析,Origin繪圖。

式中:試驗倍數分別為8,12,16,20,24。
采用紫外分光光度計在190~1 100 nm處檢測全葉千里光活性物質的吸光度,結果表明,于波長416 nm處,全葉千里光活性物質的吸光度最高,有著最好的折光性。因此,在后續試驗研究中,采用波長416 nm檢測全葉千里光活性物質的吸光度。
全葉千里光波長190~1 100 nm的吸光度見圖1。

圖1 全葉千里光波長190~1 100 nm的吸光度
按照1.3試驗方法進行試驗,分別檢測1∶8,1∶12,1∶16,1∶20,1∶24,這 5個不同料液比下全葉千里光活性物質的吸光度,然后根據公式換算為10倍比例吸光度。
全葉千里光活性物質吸光度換算見表1。

表1 全葉千里光活性物質吸光度換算
根據換算之后的吸光度,吸光度越大表明全葉千里光活性物質含量越高,繪制柱形圖。
不同料液比提取全葉千里光活性物質的換算吸光度見圖2。

圖2 不同料液比提取全葉千里光活性物質的換算吸光度
結果表明,隨著料液比的增加,全葉千里光活性物質提取的含量逐漸增加,主要原因是石油醚的添加比例增加,使得全葉千里光活性物質得到很好的溶解,在回流操作過程中,根據同極性物質相互溶解原理,活性物質得到有效的提取。當料液比達到1∶16時,吸光度最高,活性物質的提取達到飽和,隨后料液比增加,吸光度降低,由于大量的石油醚浸泡,破壞一些不穩定、容易分解的物質,造成活性物質的含量逐漸下降。因此可以確定當1∶16的料液比添加石油醚,可以有效提取到一些全葉千里光中的活性物質。
試驗確定在加熱回流法石油醚為提取有機溶劑時,全葉千里光活性物質的最佳吸收波長為416 nm,分別研究 1∶8,1∶12,1∶16,1∶20,1∶24 料液比下全葉千里光活性物質含量并進行對比,確定最佳的料液比為1∶16,為后續全葉千里光的研究與開發奠定基礎。