胡志濤
(北大醫療魯中醫院,山東 淄博 255400)
臨床實踐經驗表明,如何提高ABO血型鑒定準確性,考驗相關人員責任心與技術。在基層醫院,很多輸血科尚未普及基因檢測技術,以血清檢驗方法為主,在應對疑難血型鑒定時,主要采用吸收放散試驗方法,雖然效果顯著,但是低效價血清抗體檢測操作效率比較,為進一步提高鑒定準確性,采用吸收放散試驗及抗體增強方法,取得滿意效果。現對173例ABO疑難血型鑒定結果進行回顧性分析,探討鑒定方法及效果。
調取所在醫院173例需要輸血治療的患者的臨床資料,所選患者均滿足本研究病例收集標準[1],本組患者中,男性患者90例,女性患者83例,年齡范圍20~70歲,平均年齡(52.33±3.48)歲。本組患者血標本均為ABO血型鑒定正反定型不符情況,其中血型抗原減弱89例,ABO亞型30例,高效價冷凝集素29例,抗體效價降低25例。排除標準:(1)未成年人;(2)合并明顯診療風險者;(3)對診療情況不知情者。
血清試劑、抗體篩選紅細胞、ABO反定型紅細胞等均購自國內某醫藥公司,抗A、抗B血清有所在醫院輸血科室自主完成制備,效價確定為1:32。全自動血型分析儀及配套試劑由國內某公司提供,同時準備37℃恒溫水浴箱、血清學離心機,均有國內公司提供。
(1)吸收放散試驗:將微柱凝膠法檢驗后正反定型不相符的血液標本單獨列出,利用吸收放射試驗,對血清抗A、抗B抗體、紅細胞ABO抗原進行檢測。在被檢測血清中,添加試劑紅細胞(A型或B型),將其置放在4℃環境中,時間控制在2~4 h,期間每隔一刻鐘對血清進行振搖。與此同時,采用生理鹽水,對紅細胞進行洗滌,次數為5~6次。按照1:1比例標準,在壓積紅細胞中添加生理鹽水,將其置放在56℃水浴放散,時間為10 min,然后開展離心處理,取上清液。在上清液中添加1滴紅細胞懸液,再次行離心處理,然后利用顯微鏡進行觀察,做好詳細記錄和分析。
(2)抗體增強方法:對于離心處理不發生凝集反應的血清(低效價),適當增加離心處理的次數,并在此基礎上對反應時間進行延長,或者采用增加血清檢測量的方法,在4℃環境中靜置15 min。通過上述方法,使檢驗試劑中的紅細胞所含的抗體數量得到明顯增加,從而強化凝集的效率與強度,為血型鑒定操作提供更多便利條件。
對本組173份正反定型不相符血標本的吸收放散試驗及抗體增強方法檢測結果進行分析,做好詳細統計。
本組173例患者直接抗人球蛋白試驗呈陰性,被紅細胞吸收后,抗A、抗B血清效價明顯降低,所有患者均產生預期血型抗原抗體反應,最終ABO血型正反定型相符。
ABO血型鑒定是臨床重要檢驗項目,是判斷輸血相容性的重要依據,對保證輸血安全具有重要意義。ABO血型鑒定主要利用定型試劑,對血清紅細胞抗原及血清抗體進行測定,只有正反定型方相符,才能準確鑒定血型。一般而言,紅細胞抗原凝聚強度要達到3+或4+,鑒定準確性能夠得到保證。若<2+,則可將其認定為多種因素導致的亞型情況[2]。基于上述分析認為,一旦出現正反定型不相符現象,不僅對血型結果判斷帶來影響,同時也會使得輸血及時性和有效性受到制約。吸收放散試驗,主要是利用物理方法洗脫紅細胞冷凝集素,保證輸血相容性檢測準確性[3]。通過本研究證實,吸收放散試驗配合抗體增強,可增強輸血相容性,將其置放在4℃環境中,可促使弱小凝集效應消失,在ABO血型鑒定中發揮重要作用,使血型正反定型相符,為血型判斷提供幫助。