酶轉換法檢測血清同型半胱氨酸在常規生化檢驗中的應用評價

趙 鵬，王 新

（淄博市第四人民醫院檢驗科，山東 淄博 255000）

本文闡述了將酶轉換法用于2018年2月～2019年2月期間收入的80例健康體檢人員中開展常規生化檢驗血清HCY的臨床價值。

1 資料與方法

1.1 基礎資料

將2018年2月～2019年2月期間收入的80例健康體檢人員作為數據計算分析對象，男性與女性之比是41：39，最大年齡76歲，最小年齡45歲，中位年齡（58.32±3.33）歲。

1.2 方法

抽血前提醒患者進行8至12小時禁食，對血樣實施EDTA抗凝，并且于20分鐘之內對血漿進行分離；采集靜脈血凝固后立即進行血清分離處理，保存于-20°C環境下等待檢測。

酶轉換法檢查方式與條件。采取終點法進行檢測，主波長669 nm、副波長700 nm，控制37℃的溫度，吸光度范圍設置為0～2 A，比色杯光徑設置為1.0 cm，樣品量設置為200 μL，反應方向選擇為升反應，控制2000 μL的Tris 緩沖液用量，進行5分鐘孵育，控制300 μL的Fe Cl3用量，進行5分鐘反應，采取兩點定標方式進行校準。

高效液相色譜法：選擇美國雅培 Abbott 公司研發且提供的AXSYM 型全自動分析儀及其試劑盒對HCY濃度進行測定，實驗依據為游離 HCY 與單克隆抗體結合 HCY后的不同熒光偏振強度，將抗體、標準液及其樣品結合，遵守競爭結合原理，繪制熒光偏振強度及其HCY 濃度倒數的標準曲線，進而計算HCY濃度。

熒光偏振免疫分析：選擇還原劑將血樣中各種形式的 HCY轉化為還原形式，之后讓其衍生出HCY－熒光物質復合物，色譜分析衍生后的樣品；對不同物質，色譜法固定相具有不同吸附力，因此，洗脫流動相的次序差異比較大，最后依據熒光檢測器檢測HCY －熒光物質復合物熒光度獲取HCY水平[1]。

1.3 觀察指標

觀察分析比較熒光偏振免疫分析、高效液相色譜法檢測血清同型半胱氨酸的情況。

1.4 統計學方法

本次80例健康體檢人員涉及的所有數據均應用SPSS19.0 for Windows 統計學軟件實施處理，計數資料用率（%）的形式表示，行卡方檢驗，計量資料用（均數±標準差）形式表示，行t檢驗，P＜0.05，統計學具有數據指標分析意義。

2 結 果

2.1 分析酶轉換法測定血清同型半胱氨酸的情況

精密度：日間變異系數：4.4%和3.8%；批內日間變異系數：2.8%和2.5%；總日間變異系：5.5%和5.1%。線性回歸方程即為Y=0.98X＋0.60，R2即為0.98，如果血清同型半胱氨酸處于2至40μmol/L時的線性關系比較良好。

2.2 比較分析熒光偏振免疫分析、高效液相色譜法檢測血清同型半胱氨酸的情況。

相比較高效液相色譜法，酶轉換法，X為12.99 μmol/L，Y為13.2μmol/L，Y=0.91X+1.87，R2為0.97，t值為1.96，R=0.98，表示具有良好相關性。

相比較熒光偏振免疫分析，酶轉換法X為13.89 μmol/L，Y為13.2 μmol/L，Y=0.97X-0.21，R2為0.94，t值為2.01，R=0.97，表示具有良好相關性

2.3 血清與血漿樣本測定血清同型半胱氨酸的情況

血清測定血清同型半胱氨酸（18.68±,3.33）μmol/L，血漿測定血清同型半胱氨酸（18.11±4.54）μmol/L，t=0.30，P＞0.05，差異不顯著，具有良好相關性。

3 討 論

本文計算顯示，精密度：日間變異系數：4.4%和3.8%；批內日間變異系數：2.8%和2.5%；總日間變異系：5.5%和5.1%。相比較高效液相色譜法與較熒光偏振免疫分析，具有良好相關性；血清與血漿樣本測定血清同型半胱氨酸具有良好相關性。

綜合以上結論，酶轉換法用于常規生化檢驗血清HCY過程中存在很多優勢[2-3]，如操作簡單、高靈敏性、高精密度、較寬線性范圍等。