溶血、脂血標本對血站血篩核酸檢測結果的影響分析

郭兆誠

【摘 要】目的：研究溶血、脂肪血對血站血篩HBVDNA、HCVRNA、HIVRNA核酸檢測（NAT）結果的影響。方法：應用蘇州華益美核酸檢測系統及配套專用試劑，分別于5倍本核酸檢測系統檢測下限（LOD）濃度的HBVDNA21.0IU/ml、HCVRNA62.5IU/ml、HIVRNA211.5IU/ml樣本，采用坼分單檢模式進行NAT;對含終濃度為5倍LOD的HBVDNA、HCVRNA、HIVRNA樣本的4組溶血樣本的檢測結果。結果：溶血樣本[血紅蛋白Hb濃度分別為0mg/dl（對照）、0mg/dl、250mg/dl、500mg/dl、/1000mg/dl]，脂肪血樣本[甘油三酯TG濃度分別為0.76mmol/L（對照）、17mmol/L、28mmol/L、34mmol/L]的HBVDNA、HCVRNA、HIVRNA檢測循環閾值（Ct值）差異均無統計學意義（P>0.05）;Hb≤1000mg/dl以及TG≤34mmol/L時，對血站血篩NATHBVDNA、HCVRNA、HIVRNA沒有顯著性影響。

【關鍵詞】溶血;脂血;核酸檢測

【中圖分類號】R450【文獻標識碼】A【文章編號】1005-0019（2020）04--01

核酸檢測技術能縮短病毒感染標志物檢測的“窗口期”以及檢出因病毒變異、隱匿性感染等而漏檢的污染血液，降低了經輸血傳播疾病的風險[1]，但在實際核酸檢測工作中，標本的溶血、脂肪血等樣本質量因素可能會直接影響核酸檢測結果的準確性[2-3]。鑒于此本文旨在探討分析溶血、脂血標本對于血液核酸檢測的影響。

1 材料和方法

制備溶血血漿樣本4份，2ml/份 （血紅蛋白Hb濃度分別為0mg/dl（對照）、250mg/dl、500mg/dl、/1000mg/dl）;脂血樣本4份，2ml/份（甘油三酯TG濃度分別為0.76mmol/L（對照）、17mmol/L、25mmol/L、34mmol/L），然后加入 HBV DNA、HCV RNA、HIV RNA標準品，使得檢測的終濃度分別為檢測下限的5倍。HBVDNA、HCV RNA、HIV RNA 分別準備16份（每種Hb濃度單陽3份，混三陽1份，共4種濃度）+16份（每種TG濃度單陽3份，混三陽1份，共4種濃度）樣本。

2 儀器和試劑：

蘇州華益美核酸檢測系統，PCR-熒光法;ABI PCR7500;蘇州華益美乙型肝炎病毒丙型肝炎病毒人類免疫缺陷病毒（1+2型）核酸檢測試劑盒（有效期內使用）;

3 核酸檢測：

每份樣本上機雙孔平行坼分單檢模式檢測。

4 統計學分析：

采用SPSS17.0軟件進行t檢驗，計量資料以均數±標準差標識，P<0.05認為差異有統計學意義。

5 結果

5.1 溶血標本與對照組溶血組與對照組重負檢測的Ct值比較，差異無統計學意義（P>0.05）。見表1-表3。

5.2 脂血組與對照組重負檢測的Ct值比較，差異無統計學意義（P>0.05），見表2。

6 討論

本研究結果顯示，使用蘇州華益美核酸血篩系統檢測 HBV DNA，HCV RNA，HIV RNA，溶血組與對照組、脂血組與對照組比較的差異無統計意義，提示血液標本中血紅蛋白Hb濃度≤正常參考值范圍上限的250倍，甘油三酯TG的濃度≤正常參考值范圍上限的20 倍時，不會因為溶血、脂血因素導致核酸結果出現假陽性或者假陰性。盡管華益美核酸血篩系統試劑使用說明書注明溶血樣本血紅蛋白Hb濃度≤500mg/dl，脂肪血樣本甘油三酯TG濃度≤28mmol/L對檢測結果無影響，但是實際檢測工作中，當脂血漿表面時，我們都會將乳糜層去除后再進行檢測，盡量減少脂肪顆粒對檢測造成影響。

雖本研究提升溶血、脂血標本對于蘇州華益美核酸血篩系統的檢測結果無明顯影響，但還示需要按照相關標準規范采集記一系列相關處理。

參考文獻

張妍，朱海峰，孫波，等.核酸檢測技術在血液篩查中的應用及分析[J].中國輸血雜志，2012（12）：1298-1300.

陳曉華，趙田.影響 FQ-PCR 檢測 HCV RNA 結果的標本因素[J].中國誤診學雜志，2010 （4）：345-346.

何成濤，馬貴明，趙靜.血站核酸檢測工作的質量控制[J].臨床血液學雜志，2015，1074-1076.