吸煙對支氣管哮喘患者血清TLR4表達的影響

陳麗萍 陳列

【摘 要】目的：探討吸煙對支氣管哮喘患者血清Toll樣受體4表達的影響。方法：收集健康非吸煙者30例，吸煙患哮喘患者30例、非吸煙患哮喘患者30例，分別作為對照組及實驗組。應用雙抗體夾心ELISA法測定健康非吸煙者與吸煙哮喘患者、非吸煙哮喘患者血清中TLR4水平，比較吸煙對哮喘患者免疫應答的影響。結果：吸煙哮喘組血清TLR4表達較非吸煙哮喘組升高（P<0.05），吸煙哮喘組血清TLR4表達較健康非吸煙組升高（P<0.05），非吸煙哮喘組血清TLR4表達較健康非吸煙者升高（P<0.05）。結論：吸煙可通過改善免疫調節機制促進氣道炎癥表達，在哮喘的發生、發展中氣道一定作用。

【關鍵詞】支氣管哮喘;Toll樣受體4;免疫調節

【中圖分類號】R563.3【文獻標識碼】A【文章編號】1005-0019（2020）04--01

支氣管哮喘（簡稱哮喘）是一種由多種細胞及細胞組成參與的慢性氣道炎癥性疾病[1]。吸煙可促進炎癥形成而致多系統疾病，特別是肺炎、哮喘、肺間質病、慢性阻塞性肺病、肺癌等肺部疾病。Toll樣受體是膜識別受體家族的一個亞組，其在識別自身和異體抗原以及無害和有害的抗原中起重要作用。TLRs可通過誘導DCs成熟、誘導TH1/TH2分化、誘導Tr活化、調節肥大細胞反應來參與哮喘的適應免疫。目前尚無關于吸煙患支氣管哮喘者血清TLR4表達相關文章，因此我們以此為研究對象，測定吸煙哮喘患者血清TLR4表達，探討吸煙與支氣管哮喘發生、發展之間的關系，從免疫應答角度分析吸煙對支氣管哮喘的影響。

1 研究對象及方法

1.1 研究對象 沈陽醫學院附屬第二醫院2016年1月至2017年12月呼吸科住院患者中被診斷為支氣管哮喘患者60例，其中吸煙者30例，非吸煙者30例。同期于我院體檢的健康非吸煙者30例。哮喘患者均符合中國支氣管哮喘防治指南[2]，同時滿足條件：（1）年齡18～70歲，性別不限，且無吸煙史。（2）有較好的依從性，能配合肺功能檢查。（3）近半年未使用全身糖皮質激素。（4）行肺功能檢查前4h內未飲酒者。（5）行肺功能檢查前6h內未吸入短效β2受體激動劑及12h內未吸入長效β2受體激動劑。（6）自愿簽署知情同意書。并排除其他疾病引發的喘息、胸悶及咳嗽。

1.2 方法

1.2.1 標本采集 所有研究對象采血前空腹8-12小時，晨起取肘靜脈血5ml，靜脈血靜置 1 h 后，3000 r /min離心10 min，分離血清，-80 ℃ 冰箱保存。

1.2.2 試驗方法 采用酶聯免疫吸附法分別檢測血清中ELISA 法測定血清中TLR4表達。過程嚴格按照說明書進行操作。

1.2.3 統計學處理 采用SPSS 17.0統計軟件進行分析，進行兩獨立樣本t檢驗，結果以S表示，以P<0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

各組TLR4檢測結果比較（表1） 吸煙哮喘組TLR4表達水平高于非吸煙哮喘組，差異有統計學意義（P<0.05）;吸煙哮喘組TLR4表達水平高于健康對照組，差異有統計學意義（P<0.05）;非吸煙哮喘組TLR4表達水平高于健康對照組，差異有統計學意義（p<0.05）

3 討論

吸煙可促進炎癥形成而致多系統疾病，特別是肺部疾病，如肺炎、哮喘、肺間質病、慢性阻塞性肺病、肺癌等。Halldin等人發現哮喘的發生與低教育、吸煙、低體重及肥胖等相關[3]。哮喘患者中吸煙情況十分常見，包括主動吸煙及被動吸煙，他們可以都使哮喘的患病率增加。急診就診的哮喘患者中有35%是吸煙者。在煙霧的環境中，Th2細胞的反應被加強，造成哮喘的急性發作和病情惡化，而吸煙是誘發哮喘發作的惡化的因子，會導致哮喘難以控制[4][5]。

Toll樣受體（T0ll-like receptors，TLRs）是天然免疫系統的重要分子，屬于膜識別受體家族，于1998年hashimoto在果蠅中發現，目前發現哺乳動物中至少13種，人體中已經明確11個不同的TLRs基因型。它們可通過識別病原相關的分子模式，引發信號轉導，導致炎性介質釋放，最終激活獲得性免疫系統。不同的TLRs識別不同的細菌、病毒、真菌或原生物[6][7]。韋等人以大鼠作為研究對象，探討哮喘時氣道平滑肌細胞IL-4、IL-5表達，其結果認為TLR4通過刺激氣道平滑肌細胞分泌IL-4、IL-5而加重氣道炎癥反應[8]。蘇等人認為地塞米松通過上調肺組織TLR4 mRNA的表達而調節哮喘Th1/Th2平衡，可能是引起非變應性哮喘對激素抵抗的原因之一[9]。

本文通過測定健康患者血清TLR4表達，比較哮喘患者TLR表達變化，結果認為哮喘患者血清TLR4表達較健康對照組增加，這與既往相關研究相符。同時本文又以吸煙哮喘、非吸煙哮喘患者作為研究對象，通過檢測血清TLR4表達，得出結論吸煙可使哮喘患者血清TLR4表達增加，這可能是吸煙誘導哮喘發生、發展的原因之一。此項結果可能為臨床治療提供理論依據。

參考文獻

中華醫學會呼吸病學分會哮喘學組.支氣管哮喘防治指南（支氣管哮喘定義、診斷、治療及管理方案）[J/CD].中華哮喘雜志：電子，2008，2（1） ：3-13.

中華醫學會呼吸病學分會哮喘學組，中華醫學會全科醫學分會.中國支氣管哮喘防治指南（ 基層版）[J].中華結核和呼吸雜志，2013，36（ 5） ： 331.

Halldin CN， Doney BC， Hnizdo E.Changes in prevalence of chronic obstructive pulmonary disease and asthma in the US population and associated risk factors[J].Chron Respir Dis. 2015 Feb;12（1）：47-60.