干燥綜合征合并原發性膽汁性肝硬化患者的外周血Th17/Treg細胞百分比及臨床特征

郇穩 史麗璞

干燥綜合征(SS)屬于自身免疫性疾病的一種，其發病機制尚不清楚[1-3]。SS患者靶器官唇腺中主要浸潤CD4+T淋巴細胞，研究表明Th17、Treg影響SS的臨床表達[4]。原發性膽汁性肝硬化(PBC)早期，患者門靜脈區域伴有大量的T細胞浸潤。盡管PBC患者的抗心肌抗體呈陰性，但外周血單核細胞中存在一定量的、具備抗原特異性的CD4+T淋巴細胞，可產生干擾素-γ，影響PBC疾病過程[5-9]。研究顯示，PBC患者靜脈血中單核細胞Th17細胞比例增加，同時受損膽管周圍聚集有Th17細胞[10]。本研究分析SS合并PBC患者的臨床特征，探明Th17、Treg細胞對SS合并PBC患者的影響。

資料和方法

一、研究對象

選擇2012年3月至2018年2月鄭州人民醫院收治的SS合并PBC患者22例，男性7例，女性15例，平均年齡(54.1±9.6)歲。SS患者48例，男性10例，女性38例，平均年齡(56.7±10.2)歲。選取健康志愿者68名，排除標準包括已知原因引起的外部結節病、淋巴瘤、艾滋病、角膜干燥癥或腮腺炎等。本研究經醫院倫理委員會批準。

二、研究方法

采集患者靜脈血，分離獲取單個核細胞(Ficoll密度梯度離心法)，采用酶聯免疫吸附法收集血漿。應用流式細胞儀檢測外周血Th17和Treg細胞百分比；采用美國Beckman Coulter公司生產的AU5800型自動生化分析儀檢驗ALT、AST、ALP、γ-GT和TBil等肝功能指標。同時統計并記錄患者臨床表現。

三、統計方法

結 果

一、臨床表現

SS合并PBC患者出現黃疸、皮膚瘙癢、腹水、消化道出血、口干、食管靜脈曲張、發熱及眼部干澀等主要臨床表現為20例(90.9%)，SS患者出現上述癥狀者為37例(77.1%)，兩組比較差異有統計學意義(P<0.05)。而體質量減輕的患者SS組(46例，95.8%)明顯多于SS合并PBC組(17例，77.3%)，差異有統計學意義(P=0.018)。

二、 肝功能指標

3組患者ALT、AST、ALP、γ-GT和TBil比較差異有統計學意義(P<0.05)。見表1。

三、 Th17、Treg和Th17/Treg細胞百分比結果

SS合并PBC患者Th17細胞[16.6(10.1，22.5)%]高于SS組[9.4(7.0，13.0)%]及健康組[4.9(4.3，9.8)%]；SS合并PBC組Th17/Treg細胞比值[0.52(0.42，0.62)]高于SS組[0.25(0.14，0.37)]及健康組[0.22(0.13，0.26)，均P<0.05]。

表1 3組患者肝功能指標比較(±s)

討 論

臨床中，SS合并PBC的情況并不少見。本研究結果發現，SS組患者黃疸、皮膚瘙癢、腹水等主要臨床癥狀發生率明顯低于SS合并PBC組，兩組患者肝功能指標也存在著顯著差異。在穩態或非炎癥狀態下，人體的Th17和Treg細胞保持平衡[11]。由于大多數SS合并PBC患者的膽管和腺體都伴有CD4+T淋巴細胞浸潤，使得肝臟和其他外分泌腺具有共同的抗原性。在本研究中，SS合并PBC組外周血Th17/Treg明顯高于SS組及健康組，這些結果表明了促炎細胞的相對增加與SS、PBC的病理基礎有關。

Th17細胞可在免疫表達過程中分泌促炎因子白介素-17，誘導基質金屬蛋白酶，并調節破骨細胞，進一步損傷肝功能[12]。同時，Treg可通過釋放抑制性細胞因子白介素-10和TGF-β發揮免疫調節作用，抑制炎癥引起的免疫反應[13]。受到TGF-β的影響，初始T淋巴細胞可以誘導形成Treg，在TGT-β和IL-6共同影響下，促使初始T淋巴細胞誘導形成Th17細胞[14]。而在特定細胞因子環境下Th17和Treg細胞能夠相互轉化[15]。盡管SS與PBC的發病機制尚不清楚，本研究結果顯示SS合并PBC患者Th17細胞比例的增加，而Treg細胞相較于SS患者及健康人群并無明顯差異，這些結果說明了SS合并PBC患者中Th17細胞功能狀態占主導地位，由其引起Th17/Treg比例的失衡，Th17細胞分泌的白介素-17將進一步加速炎癥反應，導致肝功能指標升高，使這些患者的臨床癥狀表現得更加突出。

本研究發現，外周血Th17細胞比例升高可作為SS合并PBC診斷和疾病嚴重程度的指標，甚至作為潛在的治療靶點。SS合并PBC患者外周血Th17/Treg細胞水平及其比值明顯失衡，提示Th17細胞在很大程度上參與了致病過程。此外，Th17/Treg比值與某些肝功能指標有一定的相關性，在今后的研究中可根據病情的嚴重程度進一步分層分析。