探討無創DNA檢測和羊水細胞染色體檢查的意義

龍冠現

【關鍵字】孕婦；無創DNA檢測；羊水細胞；染色體；診斷；胎兒

近年來，我國出生缺陷率具有升高的趨勢，發病率可達6%，出生缺陷不僅會對嬰幼兒的生命以及生活質量造成嚴重影響，還會為家庭以及社會帶來嚴重的經濟負擔，因此進行產前診斷工作意義重大。當前，羊水細胞培養是孕婦產前診斷的主要方法，因具有較高的準確率，也被稱為是產前診斷的金標準，但該診斷方式的不足之處在于需要對孕婦穿刺取樣，存在著較大的風險，且所用時間較長，容易為孕婦帶來較大的心理壓力，因此采用非侵入性的診斷方式進行產前診斷意義重大[1-2]。無創產前基因檢測是分析胎兒染色體非整倍體異常的一項技術，近年來得到較好的應用，該方式對于檢測染色體異常具有較高的準確性[3]。本次研究以100例孕婦作為研究對象，分析無創DNA檢測和羊水細胞染色體檢查對孕婦的應用價值，詳細情況如下。

1 對象和方法

1.1 對象

將 2018年1月—2019年1月期間我院收治的100例孕婦作為研究對象，年齡范圍為35～46歲，平均年齡為（38.4±9.7）歲，平均孕周為（20.7±3.2）周，孕婦均具有高齡，具有出生缺陷生育史和產前篩查高風險等特點，所有孕婦均知情并同意本次研究，我院倫理委員會已批準。

1.2 方法

無創DNA檢測；在取得孕婦同意之后，抽取5 mL靜脈血于抗凝管之中，放置在4℃的溫度下保存，采血后的4 h內，進行離心處理，離心后將血漿放置-80℃保存，提取血漿中游離的DNA，PCR擴增，獲得對應樣本DNA文庫，采用生物信息學對測序的結果進行分析。

羊水細胞染色體檢查；在超聲引導下，經腹壁穿刺抽取羊水30 mL并將其放置于無菌BD管中保存，實驗室中細胞培養，制片對染色體核型進行分析。

1.3 觀察指標

對比兩種檢查方式的檢出率。

1.4 統計學分析

將數據納入SPSS 18.0軟件中分析，使用χ2和百分比表示計數資料，P＜0.05表示有統計學意義。

2 結果

100例患者中共計10例患者染色體異常，羊水細胞染色體檢查檢出率為100%（10/10），無創DNA檢測檢出率為90%（9/10），兩種檢測方式無統計學意義（P＞0.05），詳見表1。

3 討論

因我國人口基數大，出生缺陷發病率也較高，曾有相關數據表明，我國每年先天性致殘和致缺陷人數約為出生總人口數的6%，且近年來，該比例具有不斷增加的趨勢，在各種缺陷性疾病之中，染色體病變的發生率最高[4]。胎兒染色體異常是最為嚴重的一種先天性疾病，常見的遺傳疾病有13-三體、18-三體、21-三體以及TURNER綜合征等，對孕婦進行產前診斷對于降低染色體異常發生率意義重大，盡早發現胎兒嚴重結構異常和染色體異常不僅可以降低患者家庭負擔和社會壓力，還可避免孕婦受到嚴重的身心傷害。當前，多數地區產前診斷主要是采用血清學方法來篩查胎兒染色體機構異常，若存在異常情況，則利用超聲或者羊水穿刺對患者進行進一步診斷，從而使缺陷兒的出生率得到降低，但該種方式對孕婦的影響較大，不利于孕婦身心健康[5-6]。傳統對于高危孕婦的篩查方式主要有羊膜腔穿刺取樣，絨毛穿刺取樣等，但上述診斷方式均屬于侵入性的操作，對于孕婦和胎兒均具有不同程度的影響，以往，對于高風險孕婦主要采用羊水穿刺進行診斷，但其具有較高的風險性，可能導致孕婦出現流產的可能，為孕婦帶來嚴重的心理負擔和精神壓力。

當前產前診斷有創技術已經發展的較為成熟，但對患者進行有創檢查時可能存在著較大的風險性，在采取標本的過程中可能會導致胎兒出現心動過緩，流產以及早產等情況發生，此外，羊水穿刺檢查會在一定程度增加孕婦的心理負擔和精神壓力，導致其依從性不高，對胎兒染色體異常征象的篩查具有一定的缺陷[7]。無創基因檢測屬于一種新型的產前診斷方式，具有無創，便捷等優勢，檢測時，僅需采集患者5 mL靜脈血即可，在一定程度上減少了羊水穿刺的步驟，降低了患者流產的風險，緩解了孕婦的心理壓力，該診斷方式的目的主要是提高產前診斷準確率，減少孕婦的診斷風險。該診斷方式主要是利用大規模的平行測序技術對母體外周血中游離的DNA進行深度測序，從而取得胎兒染色體的關鍵信息[8-10]。研究報道，孕婦在第4周便可以檢測到胎兒游離的DNA，在妊娠7周之后，檢測結果的準確率更高，可盡早的得出有關胎兒DNA水平的狀態，且具有含量高，半衰周期短，提取方便等顯著優勢，因此屬于有效、無創、簡單的一種診斷方式。通常在對患者進行詳細的介紹后，家屬和孕婦均會配合檢測，基本無拒絕和不理解的情況，由此也證明，無創DNA基因檢測技術與侵入性檢查相比較，更容易被患者及家屬認可和接受。但就目前而言，該診斷依舊具有一定的不足，如該方式不適用于孕婦自身具有染色體異常的情況，不可用于多胎孕婦；無法準確檢測出重復，倒位以及移位等染色體異常疾病；孕婦外周血中cffDNA濃度是影響該檢查結果的重要指標，若濃度過低可能會影響診斷結果的準確性[11-13]。

在本次研究中，無創DNA檢測與羊水細胞染色體檢查的準確率具有較高的一致性，數據對比無統計學意義。表明無創DNA檢測可作為產前檢查的重要手段，具有安全性高，無創以及準確率高等顯著優勢，更容易被孕婦所接受，在降低出生缺陷率等方面發揮著重要作用。但在臨床中，無創DNA檢測并不能完全取代羊水穿刺檢查，臨床應將其作為一種輔助手段，對于檢測結果提示異常的患者，應建議孕婦進行羊水穿刺診斷，保證診斷準確率，避免誤診和漏診情況的發生。

表1 兩種檢查方式的檢出率對比

綜上所述，對孕婦采用無創DNA檢測具有較高的準確率，使用價值高，值得在臨床進一步推廣使用。