免疫組織化學檢測在NSCLC鑒別診斷中的應用

程化朋

據相關統計數據，近幾年肺癌的發病率在全球范圍內表現為上升的趨勢，并且擁有極高的致死率，在惡性腫瘤致死的患者中，肺癌在男性患者和女性患者中分別占到第一位和第三位。雖然現階段人們明確認知到煙草所具備的危害性，但我國煙民總數仍處于較高水平，對于年齡超過40歲的男性而言，肺癌仍為重要致死因素[1]。作為惡性腫瘤疾病之一，肺癌的診斷往往具有一定的滯后性，多數患者都是肺癌晚期才得以確診，而且以活檢小標本為主要獲取源，其中約有50%左右無法準確分型非小細胞癌組織學[2]，分子靶向治療時代的來臨，組織學分型面臨著巨大的挑戰，對此，WHO提出，免疫組化在肺癌組織分型中具有積極意義[3-4]。所以本次以我院于2018年1月—2019年8月期間經病理檢查確診為非小細胞肺癌的120例患者為研究對象，通過免疫組化Envi-sion二步法展開如下研究。

1 資料與方法

1.1 一般資料

以我院于2018年1月—2019年8月期間經病理檢查確診為非小細胞肺癌的120例患者為研究對象，納入標準：患者或其家屬了解并授權本次研究；排除標準：（1）檢查前存在放化療史；（2）存在靶向治療史；本研究通過醫學倫理委員會審核；120例患者中包括男性93例，女性27例，年齡區間為33歲～77歲，均值（61.34±10.20）歲；其中鱗癌組59例，腺癌組61例。

1.2 方法

以4%中性甲醛對所有標本固定，常規石蠟包埋切片，HE染色對其組織形態進行觀察，通過免疫組化Envi-sion二步法檢測，以PBS代替一抗充當陰性對照，而陽性對照則為已知陽性片，EDTA抗原熱修復切片，然后滴加TTF-1、NapsinA、P63以及CK5/6一抗，常規孵育、洗滌，然后取DAKO提供的辣根過氧化物酶滴加，充當二抗，常規孵育，DAB顯色之后，對細胞核進行復染，然后脫水、封片、鏡檢。

1.3 觀察指標

分析腺癌、鱗癌患者的蛋白表達情況，包括TTF-1、NapsinA、P63以及CK5/6。判定標準如下：無色或是陽性細胞分＜10%，記作0分；淺黃色、黃色，或是陽性細胞分區間為10%-50%，記作1分；棕黃色，或是陽性細胞分＞50%，記作2分；若兩項結果超過2分，屬于陽性，反之為陰性[5]。

1.4 統計學方法

本次研究所采用的統計學工具為SPSS 19.0，研究數據記錄形式以計數資料為參考，即例數/百分比（n/%），經χ2檢驗，若結果顯示P＜0.05，則判定差異有統計學意義存在。

2 結果

腺癌組患者在TTF-1、NapsinA方面的陽性表達率更高，而鱗癌組患者在P63、CK5/6方面的陽性表達率更高，二者對比，組間差異存在明顯的統計學意義（P＜0.05）。如表1。

3 討論

作為世界范圍內發生率較高的一種惡性腫瘤類疾病，肺癌對人們生命安全具有較高的威脅性，據有關資料統計[6]，現階段，肺癌在我國的發生率以及致死率均居于癌癥首位。而肺癌患者中，約有80%左右為非小細胞肺癌，常見的包括大細胞癌、鱗癌以及腺癌，近些年，有關腺癌、鱗癌的臨床鑒別逐漸受到關注，分析原因，主要包括兩個方面：其一，近十年，隨著醫療技術的發展，肺癌分子靶向治療面臨著更高的要求，例如腺癌普遍存在基因活化情況，而晚期鱗癌普遍存在PD-1單抗Nivolumab[7-8]；其二，只有非鱗非小細胞肺癌才能接受培美曲塞、貝伐單抗等藥物的治療，若患者為鱗癌，誤用上述藥物，會出現重度不良反應，嚴重的甚至會致死[9]。對此，WHO提出，免疫組化在肺癌組織分型中具有積極意義，認為患者的TTF-1、P63均呈現陰性結果，有很高的特異性可以認定為腺癌[10]；若TTF-1呈現陰性，P63呈現陽性，則屬于鱗癌；若TTF-1、P63均呈現陽性，需要檢測患者的CK5/6，若為陰性結果，且TTF-1、P63比值較低，認為鱗癌可能性較大[11]；而NapsinA也具有較高的特異性，若腺癌患者TTF-1呈現陰性低分，NapsinA常見于陽性[12]。基于上述研究理論，本次以我院于2018年1月—2019年8月期間經病理檢查確診為非小細胞肺癌的120例患者為研究對象，通過免疫組化Envision二步法展開研究，結果顯示，腺癌組患者在TTF-1、NapsinA方面的陽性表達率更高，而鱗癌組患者在P63、CK5/6方面的陽性表達率更高，二者對比，組間差異存在明顯的統計學意義（P＜0.05）。可見通過對肺癌活檢標本進行免疫組化檢測，可以有效鑒別非小細胞肺癌分型。

表1 腺癌、鱗癌患者蛋白表達陽性率對比[例（%）]

綜上所述，以免疫組織化學檢測方法檢測肺癌活檢標本，觀察非小細胞肺癌中蛋白的具體表達，可以有效鑒別鱗癌、腺癌，提供確診率，有利于患者的后期治療。