不同Hp分型消化性潰瘍患者血清IL-32、IL-33水平變化及意義 ???

涂宏飛 李莉 費素娟

【摘要】目的 探討不同Hp分型消化性潰瘍（PU）患者血清IL-32、IL-33水平的變化及意義。方法 選取PU患者52例作為觀察組，慢性淺表性胃炎的患者54例作為對照組，蛋白免疫印跡法檢測2組Hp感染情況，ELISA定量檢測其血清IL-32、IL-33水平。比較各組Hp感染率及血清IL-32、IL-33水平。結果 PU組Hp陽性率（80.8%）高于對照組（63.0%），P < 0.05;PU組Ⅰ型Hp比例（61.9%）稍高于對照組（55.9%），但差異無統計學意義（P > 0.05）。PU組血清IL-32水平為（95.29±17.79） pg/ml、IL-33水平為（72.42±16.19）pg/ml，均高于對照組的（84.10±15.17）pg/ml、（66.24±13.97）pg/ml，差異均有統計學意義（P均< 0.05）。不同Hp分型PU患者血清IL-32、IL-33水平比較差異均有統計學意義（P均< 0.001），其中Ⅰ型Hp感染組血清IL-32、IL-33水平均高于Ⅱ型Hp組及Hp陰性組，Ⅱ型Hp組血清IL-33水平高于Hp陰性組，差異均有統計學意義（P均< 0.05）。不同類型PU患者血清IL-32、IL-33水平比較差異均無統計學意義（P均> 0.05）。結論 PU患者血清IL-32、IL-33水平升高，其中Ⅰ型Hp感染PU患者升高更為明顯。

【關鍵詞】幽門螺桿菌;消化性潰瘍;毒力因子;白介素-32;白介素-33

【Abstract】Objective To investigate the changes and significance of serum IL-32 and IL-33 levels in peptic ulcer （PU） patients with different types of Helicobacter pylori （Hp）.? Methods Fifty-two patients with PU were selected in the observation group and 54 patients with chronic superficial gastritis in the control group. The Hp infection was detected by Western blot. The serum levels of IL-32 and IL-33 were quantitatively measured by ELISA. The infection rate of Hp and the serum levels of IL-32 and IL-33 were statistically compared between two groups. Results The positive rate of Hp in the observation group was 80.8%， significantly higher than 63.0% in the control group （P < 0.05）. The infection rate of typeⅠ Hp in the observation group was 61.9%， slightly higher than 55.9% in the control group （P > 0.05）. The serum levels of IL-32 and IL-33 in the observation group were （95.29±17.79）pg/ml and （72.42±16.19）pg/ml significantly higher compared with （84.10±15.17）pg/ml and （66.24±13.97）pg/ml in the control group （both P < 0.05）. The serum levels of IL-32 and IL-33 significantly differed in PU patients with different types of Hp （both P < 0.001. The serum levels of IL-32 and IL-33 in type Ⅰ Hp infection group were significantly higher than those in type Ⅱ Hp infection group and negative Hp group （all P < 0.05）. The serum levels of IL-32 and IL-33 did not significantly differ among patients with different types of PU （both P > 0.05）.? Conclusion The serum levels of IL-32 and IL-33 are increased in PU patients increased， especially in PU patients with type Ⅰ Hp infection.

【Key words】Helicobacter pylori;Peptic ulcer;Virulence factor;Interleukin-32;Interleukin-33

幽門螺桿菌（Hp）是人類感染率最高的細菌之一，大多數Hp感染者沒有任何臨床癥狀，但是長期感染Hp可能會引起胃腸道病變，包括慢性胃炎、消化性潰瘍（PU）、胃黏膜相關淋巴組織淋巴瘤（MALT）和胃癌等[1-3]。Hp產生的毒力因子在其致病過程中起著至關重要的作用，其中細胞毒素相關蛋白A（CagA）和空泡細胞毒素（VacA）已被證明是胃黏膜萎縮、腸上皮化生及炎癥反應的“元兇”[4-5]。IL-32和IL-33是新近發現的炎癥因子，在多種免疫性疾病和慢性炎癥性疾病中發揮著重要的生物學作用[6-7]。然而，Hp相關PU與IL-32、IL-33之間的關系目前尚無報道，因此本研究就不同Hp分型PU患者血清IL-32、IL-33水平變化及意義展開研究。

對象與方法

一、研究對象

選取2018年10月至2019年7月于徐州醫科大學附屬醫院住院治療的PU患者52例作為觀察組，其中男33例、女19例，年齡（52.92 ±14.85）歲;同時收集同期行胃腸鏡檢查診斷為慢性淺表性胃炎的患者54例作為對照組，其中男26例、女28例，年齡（54.61±11.71）歲。排除標準：①合并有免疫系統疾病以及其他惡性腫瘤等疾病的患者;②嚴重的心、肝、腎功能不全的患者;③處于炎癥狀態或合并其他感染性疾病的患者;④既往曾行Hp根除治療的患者。本研究經徐州醫科大學附屬醫院倫理委員會審查通過，所有研究對象對本研究知情同意。2組性別、年齡比較差異均無統計學意義（P均> 0.05），具有可比性。

二、研究方法

1.電子胃鏡及病理學檢查

采用Olympus公司電子胃鏡檢查，并經病理學檢查確診為PU、慢性淺表性胃炎。

2.標本采集與儲存

使用5 ml K2 EDTA抗凝采血管采集各組患者空腹靜脈血4 ml，使用離心機以3000 r/min離心血液15 min，分離血清，將血清置于-80℃冰箱保存備用。

3. Hp及其分型檢測

將血清標本取出，置于恒溫箱內復溫至37℃，采用蛋白免疫印跡法對患者血清Hp抗體（UreA、UreB、CagA、VacA）進行定性檢測。根據血清Hp抗體可將Hp分為Ⅰ型和Ⅱ型，Ⅰ型Hp是產細胞毒素的菌株，即CagA（+）和（或）VacA（+），Ure（+）;Ⅱ型Hp僅產生Ure而不產生毒素;CagA、VacA及Ure均陰性即為Hp陰性。Hp抗體分型檢測試劑盒來自深圳伯勞特生物制品有限公司，檢測由經驗豐富的實驗人員嚴格按照說明書進行操作。

4.血清IL-32、IL-33濃度檢測

將血清標本取出，置于恒溫箱內復溫至37℃，ELISA定量檢測各組患者血清IL-32、IL-33水平。人IL ELISA試劑盒由上海將來實業股份有限公司提供。所有操作均嚴格按照試劑盒的說明書進行。

三、統計學處理

應用SPSS 22.0進行統計分析，正態分布的計量資料以表示，2組間比較采用獨立樣本t檢驗;多組間比較采用方差分析，兩兩比較采用LSD-t檢驗;計數資料以率或構成比表示，組間比較采用χ2檢驗。P < 0.05為差異有統計學意義。

結果

一、PU組和對照組Hp陽性率比較

PU組Hp陽性率高于對照組，差異有統計學意義（P < 0.05）;PU組Ⅰ型Hp比例稍高于對照組，但差異無統計學意義，見表1。

二、PU組和對照組IL-32、IL-33水平比較

PU組血清IL-32、IL-33水平均高于對照組，差異均有統計學意義（P均< 0.05），見表2。

三、不同Hp分型PU患者血清IL-32、IL-33水平比較

不同Hp分型PU患者血清IL-32、IL-33水平比較差異均有統計學意義（P均< 0.001），其中Ⅰ型HP感染組血清IL-32、IL-33水平均高于Ⅱ型Hp組及Hp陰性組，差異均有統計學意義（P均< 0.05），Ⅱ型Hp組血清IL-32與Hp陰性組比較差異無統計學意義（P > 0.05），Ⅱ型Hp組血清IL-33水平高于Hp陰性組（P < 0.05），見表3。

四、不同類型PU患者血清IL-32、IL-33水平

不同類型PU患者血清IL-32、IL-33水平比較差異均無統計學意義（P均> 0.05），見表4。

討論? ?PU在世界范圍內具有較高發病率，Hp是導致其發病的主要因素之一[8]。Hp的定植、黏附以及毒力因子可損傷胃腸黏膜，促進胃泌素及生長抑素的分泌，導致PU的發生[9]。我國Hp總體感染率高達50% ～ 80%，臨床研究證實CagA陽性Hp菌株的感染與更高級別的胃黏膜炎癥以及嚴重的萎縮性胃炎有關，并被認為在胃癌的發生中起重要作用[10]。因此，Ⅰ型Hp可導致胃黏膜組織炎癥反應，更容易誘導PU的發生發展。本研究中，PU組Hp感染率顯著高于對照組，差異有統計學意義，與既往研究結論一致;而PU組Ⅰ型Hp比例雖稍高于對照組，但差異無統計學意義。

大量的研究表明，炎癥免疫反應是Hp感染黏膜損傷的重要病理生理機制，Hp感染可誘導宿主細胞及體液免疫應答的激活，導致局部及全身的炎癥反應。IL-32是最近發現的新型促炎因子，主要由自然殺傷（NK）細胞、單核細胞、上皮細胞和T淋巴細胞分泌，與慢性鼻竇炎、HCV、HBV等多種感染性疾病相關，而IL-32與PU的關系尚無報道[11-12]。本研究中，PU組血清IL-32水平較對照組高，提示IL-32可能在PU的發病過程中起到一定的促進作用。國內外研究證實，CagA可激活NF-κB和MAPK信號傳導途徑，從而促進IL-32的合成和分泌，血清IL-32水平升高又可正反饋性誘導TNF-α、IL-6、IL-8、IL-1β等炎癥因子釋放，從而加重局部炎癥反應[13]。本研究中，Ⅰ型Hp感染PU患者血清IL-32水平明顯高于Ⅱ型Hp組及Hp陰性組，進一步證實CagA是引起IL-32濃度升高的原因之一。

IL-33是IL-1超家族中的成員，主要來源于上皮細胞，可通過誘導Th2細胞來調節免疫應答[14]。研究證實，在白塞氏病、格雷夫斯病、多發性硬化、巨細胞病毒感染、慢性乙型肝炎等自身免疫性及慢性感染性疾病患者血清中IL-33水平顯著升高。IL-33還能促進非小細胞性肺癌、乳腺癌、腎細胞癌和結直腸癌等惡性腫瘤的發展[15]。然而，目前尚未在Hp感染PU患者中評估血清IL-33水平。本研究顯示PU患者血清IL-33水平明顯高于對照組，且Ⅰ型Hp感染PU患者血清IL-33水平升高更為顯著，提示血清IL-33水平升高可能是PU的一個致病因素。

PU是臨床常見病，按病變部位可分為胃潰瘍、十二指腸潰瘍和復合性潰瘍。在本研究中，各型PU之間血清IL-32、IL-33水平無明顯差異。綜上所述，PU患者血清IL-32、IL-33水平升高，其中以Ⅰ型Hp比例升高為著。然而，本研究中PU組Ⅰ型Hp比例與對照組無明顯差異，但PU組的血清IL-32、IL-33的水平卻顯著高于對照組，考慮PU患者本身局部炎癥反應較重，且Hp可能存在著CagA、VacA以外的其他途徑造成IL-32、IL-33等炎癥因子的活化，這需要后續進一步研究證實。由此可見，檢測血清IL-32、IL-33水平有望對PU及Hp感染狀況的診斷提供參考，并為難治性、復發性PU的免疫治療提供新思路，但本研究納入的研究對象較少，有待更大規模的臨床研究加以驗證。

參 考 文 獻

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（收稿日期：2019-11-12）

（本文編輯：楊江瑜）