棉花大麗輪枝菌培養性狀對比與致病力分化研究

張夢恬

摘要：棉花大麗輪枝菌在PDA平板中能夠培養出菌絲型、菌核型、中間型3種性狀。其中，菌核型是棉花大麗輪枝菌的主要培養性狀。用PDA平板培養北疆棉區不同致病類型的棉花大麗輪枝菌，發現落葉型大麗輪枝菌中VH-2型較多，非落葉型大麗輪枝菌中VH-1型較多。用不同碳氮比的查氏培養基培養2種致病棉花大麗輪枝菌，發現落葉型棉花大麗輪枝菌V592的菌核隨碳氮比增加而減少，低碳氮比的查氏培養基有利于產生更多孢子、菌絲。此外，棉花大麗輪枝菌的致病力與培養性狀、來源地無關，與致病類型、碳氮比有關。

關鍵詞：棉花;大麗輪枝菌;培養性狀;致病力

中圖分類號：S-3? 文獻標識碼：ADOI：10.19754/j.nyyjs.20200229019

前言

大麗輪枝菌能夠導致棉花患上黃萎病，破壞我國棉花的生產，造成嚴重經濟損失。因此，對比研究棉花大麗輪枝菌的培養性狀，以及研究棉花大麗輪枝菌的致病力分化，對防治棉花的黃萎病，提高我國棉花產量，具有現實意義。

1對比研究棉花大麗輪枝菌培養性狀

1.1PDA平板培養出的棉花大麗輪枝菌性狀對比

1.1.1菌絲型棉花大麗輪枝菌的培養性狀

在PDA平板上為期2周的培養中，有一類棉花大麗輪枝菌的氣生菌絲發達，菌落呈黃色或者白色，在培養期間（2周內）始終都不產生黑色微菌核。這一類棉花大麗輪枝菌，就是菌絲型的棉花大麗輪枝菌，也可以叫做VS型棉花大麗輪枝菌[1]。有的菌絲型菌落表面呈膜狀，有輻射狀條紋。

1.1.2菌核型棉花大麗輪枝菌的培養性狀

在PDA平板為期2周的培養中，有一類棉花大麗輪枝菌的菌絲不明顯，而產生大量微菌核，布滿菌落基質，以至于菌落的正反面中至少有一面完全呈黑色。這一類棉花大麗輪枝菌，就是菌核型的棉花大麗輪枝菌，也可以叫做VH型棉花大麗輪枝菌。菌核型的棉花大麗輪枝菌在PDA平板培養中，又可根據其培養性狀來分為3種。其中，黑色菌落外被一圈較寬的白色菌絲圍繞的、呈同心圓狀的菌落，叫做VH-1型棉花大麗輪枝菌菌落，這種菌落的表面有少量的絨毛狀氣生菌絲;黑色菌落外只被一圈很細的白色菌絲圍繞，也呈同心圓狀的菌落，叫做VH-2型棉花大麗輪枝菌菌落，這種菌落的表面有稀疏的氣生菌絲，氣生菌絲的分布呈同心輪紋狀或者均勻狀;黑色菌落表面有明顯氣生菌絲，并且氣生菌絲按照同心輪紋狀排列的菌落，叫做VH-3型棉花大麗輪枝菌菌落。

生長速度方面，在同樣時間的PDA平板培養中，VH-1型棉花大麗輪枝菌中的KND-2菌株的菌落生長最快，長出了直徑最大的菌落;VH-3型棉花大麗輪枝菌菌落中的SND-6菌株的菌落生長最慢，長出了直徑最小的菌落。菌落培養性狀相同的菌株，其菌落生長速度亦可存在較大的差異。由此可見，北疆棉花中的大麗輪枝菌的培養性狀分化明顯[2]。

無論在北疆棉區還是江蘇省，棉花的黃萎病病菌中，菌核型棉花大麗輪枝菌是主要的培養性狀。

1.1.3中間型棉花大麗輪枝菌的培養性狀

在PDA平板上為期2周的培養中，有一類棉花大麗輪枝菌的菌絲發達，菌落呈白色，但也會在菌落中間產生少量的微菌核。這一類棉花大麗輪枝菌，就是菌絲型的棉花大麗輪枝菌，也可以叫做VM型棉花大麗輪枝菌。

1.1.4PDA平板中落葉型棉花大麗輪枝菌的培養性狀

落葉型棉花大麗輪枝菌是棉花大麗輪枝菌中一種致病性較強的類型。經PDA平板為期2周的培養可以發現，來自北疆棉區的13種落葉型棉花大麗輪枝菌菌株的菌落中，有2個屬于菌絲型棉花大麗輪枝菌菌落，2個屬于中間型棉花大麗輪枝菌菌落，6個屬于VH-2型棉花大麗輪枝菌菌落，1個屬于VH-3型棉花大麗輪枝菌菌落。由此可見，來自北疆棉區的落葉型棉花大麗輪枝菌能夠形成5種培養性狀的菌落;其中，形成VH-2型棉花大麗輪枝菌菌落的落葉型棉花大麗輪枝菌最多。

1.1.5PDA平板中非落葉型棉花大麗輪枝菌的培養性狀

非落葉型棉花大麗輪枝菌是棉花大麗輪枝菌中一種致病性較弱的類型。經PDA平板為期2周的培養可以發現，來自北疆棉區的5種非落葉型棉花大麗輪枝菌菌株的菌落中，有4個屬于VH-1型棉花大麗輪枝菌菌落，1個屬于VH-3型棉花大麗輪枝菌菌落。由此可見，來自北疆棉區的非落葉型棉花大麗輪枝菌在PDA平板培養中更多形成VH-1型棉花大麗輪枝菌菌落。

1.2不同碳、氮比的查氏培養基中的棉花大麗輪枝菌的培養性狀對比俞燕等[3]用查氏培養基培養了落葉型（V592）、非落葉型（I6）2種致病的棉花大麗輪枝菌，發現這2種致病棉花大麗輪枝菌的菌株形成了培養性狀相似的菌落，菌落中的氣生菌絲均勻地分布在棉花大麗輪枝菌菌落表面，并在菌落中央形成了黑色的微菌核，而且各個棉花大麗輪枝菌菌落的生長速度相近。

但是，比較不同碳、氮比的查氏培養基中的棉花大麗輪枝菌，會發現這2種致病的棉花大麗輪枝菌對查氏培養基中的碳、氮比的反應不同。其中，落葉型棉花大麗輪枝菌菌落中的微菌核會隨著碳氮比的增加而減少;也就是說，較低的碳氮比（25∶1～30∶1）有利于落葉型棉花大麗輪枝菌（V592）菌落形成微菌核，較高的碳氮比（45∶1～50∶1）不利于落葉型棉花大麗輪枝菌（V592）菌落形成微菌核。而非落葉型致病棉花大麗輪枝菌（I6），在碳氮比不同的查氏培養基中，產生的微菌核數量沒有差異。

孢子方面，上述2種致病棉花大麗輪枝菌都在低碳氮比（25∶1）的查氏培養基中產生了最多的孢子、最多的菌絲，而孢子的萌發率在碳氮比為40∶1的查氏培養基中最高。

2研究棉花大麗輪枝菌培養的致病力分化

2.1棉花大麗輪枝菌致病力與培養性狀的關系

蔡夢杭等學者的實驗發現，棉花大麗輪枝菌的致病力與其培養性狀有一些關系，如產生中間型菌落的2種菌株致病力最弱，產生菌絲型菌落的2種菌株致病力居中。但是，同一培養性狀的棉花大麗輪枝菌（也就是產生菌核型菌落的棉花大麗輪枝菌菌株）的致病力也產生了分化，而且與其具體培養性狀（即VH-1、VH-2和VH-3）無關。另外，不同學者的實驗發現也不同，所以棉花大麗輪枝菌的致病力與培養性狀無關。

2.2棉花大麗輪枝菌致病力與致病類型的關系

蔡夢杭等學者的實驗發現，棉花大麗輪枝菌的致病力與其致病類型有一些關系，并且同一致病類型的棉花大麗輪枝菌的致病力產生了分化。其中，5個非落葉型棉花大麗輪枝菌菌株中，BND-1菌株的致病力最強，其余4種都比其弱;13個落葉型棉花大麗輪枝菌菌株中，只有WD-3和SD-7這2種致病力弱。所以，總體來看，落葉型棉花大麗輪枝菌的致病力更強，但同一致病類型的大麗輪枝菌的致病力也存在一定的分化。

2.3棉花大麗輪枝菌致病力與來源地的關系

蔡夢杭等學者的實驗發現，即便來自同一地區，只要棉花大麗輪枝菌的具體菌株不同，致病力就會產生明顯的分化。因此，不能采取在同一地區推廣同一耐病棉花品種的方法來防治棉花黃萎病。

2.4棉花大麗輪枝菌致病力與查氏培養基碳氮比的關系俞燕等學者發現，用前述2種棉花大麗輪枝菌感染軍綿1號（一種感病棉花品種）時，不同碳氮比的查氏培養基培養后的棉花大麗輪枝菌均用了10d使軍綿1號出現發病癥狀，直到接種15d后，不同碳氮比的查氏培養基培養后的棉花大麗輪枝菌感染的軍綿1號棉花才產生了明顯的差異。實驗中，25∶1的低碳氮比查氏培養基培養出的2種棉花大麗輪枝菌更能導致軍綿1號患病，而碳氮比高于35∶1的查氏培養基培養出棉花大麗輪枝菌的致病能力大大減弱。這可能是因為低碳氮比有利于大麗輪枝菌產生更多的微菌核、氣生菌絲、孢子。

用軍綿2號（一種抗病棉花品種）做同樣的實驗，發現軍綿2號雖然也在第10天時表現出了發病癥狀，但是發病癥狀較軍綿1號輕;并且發現碳氮比適中的（35∶1）查氏培養基能夠培養出對其致病能力最強的棉花大麗輪枝菌。

3結語

棉花大麗輪枝菌的生理型、病理型都很多，致病能力亦有強弱之別，而且棉花大麗輪枝菌的培養性狀、致病能力都會受到培養環境的影響。研究人員應繼續收集棉花大麗輪枝菌，尋找對抗棉花大麗輪枝菌的辦法，從而提升我國棉花的產量。

參考文獻

[1] 喻秀秀，王卿，張昕，鄧晟，林玲.江蘇省大麗輪枝菌的培養、遺傳及致病特性分析[J].植物病理學報，2018，48（03）：378-388.

[2] 蔡夢杭，徐燦，劉啟，俞燕，黃家風.北疆棉區棉花黃萎病菌培養性狀及致病力分化[J].新疆農業科學，2019，56（01）：93-103.

[3] 俞燕，蔡夢杭，徐燦，黃家風.不同碳氮比對棉花黃萎病菌主要生物學性狀及致病力的影響[J].新疆農業科學，2019，56（01）：84-92.