血清HE4檢測在乳腺浸潤性導管癌中的臨床應用

熊戌霞，蔡偉鵬，房綺梅，王英

(中山大學孫逸仙紀念醫院檢驗科，廣東 廣州）

0 引言

乳腺癌是目前威脅全世界女性健康的惡性腫瘤之一，近年來乳腺癌在中國的發病率逐年上升并有年輕化趨勢，嚴重危害女性健康，已成為當今社會重大公共衛生問題[1]。腫瘤標志物也廣泛用于評價治療療效，早期診斷復發和評價預后中。在乳腺癌中，最常用腫瘤標志物CA153，但它的敏感性和特異性也相對較低，多種腫瘤標志物也被研究，但是沒有在臨床實踐中應用[2,3]。

人附睪上皮分泌蛋白4（HE4）是近年來研究比較熱門的一種新型腫瘤標志物，研究發現人附睪蛋白4（HE4）在乳腺癌組織中也表達[4]，但其在血清中的表達水平，以及其在乳腺浸潤性導管癌中的臨床應用價值研究甚少，本研究擴大了血清樣本量，進一步探討HE4在乳腺浸潤性導管癌中的表達，并分析其臨床應用價值。

1 材料和方法

1.1 一般資料

收集2016年12月至2017年8月在中山大學孫逸仙紀念醫院初次診斷為乳腺腫物的住院女性患者的血清，所有患者全部經空心針穿刺或組織病理確診，其中乳腺良性疾病患者77例（包括乳腺囊性增生癥、乳腺纖維腺瘤、導管瘤、乳腺炎性病變等），平均（39.6±11.6）歲；乳腺浸潤性導管癌患者200例，平均（50.2±10.9）歲，腫瘤分期均按NCCN2007年修訂的標準進行TNM分期；另選取91例健康女性為健康對照組，平均（41.3±11.8）歲，均為隨機選取健康女性。

通過病例系統以及病理系統查詢診斷為乳腺浸潤性導管癌患者的臨床病理資料，包括患者年齡、絕經狀態、腫瘤大小、TNM分期以及ER、PR、HER2狀態。剔除標準：手術前進行過化療放療患者，合并其他癌癥的患者以及資料不全者。

1.2 方法

所有研究對象均抽取清晨空腹靜脈血3mL，待血凝固后分離血清（-20℃保存），采用電化學發光免疫檢測法檢測血清HE4水平。使用儀器為Cobas e602型全自動電化學發光免疫分析系統。以上所有操作步驟嚴格按照說明書進行。

1.3 統計學處理

采用SPSS 22.0統計學軟件分析，呈偏態分布數據用中位數表示，3組數據間比較用非參數Kruskal-Wallis（H檢驗），兩兩之間的比較用Mann-Whitney （U檢驗），采用受試者工作特征（ROC）曲線確定臨界值。P＜0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 乳腺浸潤性導管癌組與乳腺良性疾病組及正常對照組血清HE4水平

乳腺浸潤性導管癌組、乳腺良性疾病組和正常對照組間HE4水平（見表1），三組間HE4水平差異有統計學意義（H=39.213，P＜0.01），乳腺浸潤性導管癌組HE4中位數明顯高于正常對照組和乳腺良性疾病組，差異有統計學意義（P＜0.05）。經過兩兩比較，正常對照組與乳腺良性疾病組之間HE4水平，差異無統計學意義（P＞0.05）；正常對照組與乳腺浸潤性導管癌之間HE4水平差異有統計學意義，乳腺浸潤性導管癌組HE4含量明顯高于正常對照組（P＜0.05）；乳腺良性疾病組與乳腺浸潤性導管癌組之間HE4水平差異有統計學意義，乳腺浸潤性導管癌組HE4含量明顯高于乳腺良性疾病組（P＜0.05）。

表1 3組間HE4水平[中位數(四分位數)]

2.2 血清HE4水平與乳腺浸潤性導管癌臨床病理特征之間的關系

HE4的水平與患者年齡、月經狀態、腫瘤大小、淋巴結狀態、臨床分期以及ER和PR狀態有明顯相關（P＜0.05）。HE4水平與HER2狀態無關（P＞0.05）。

表2 乳腺浸潤性導管癌臨床病理特征與患者血清HE4水平的關系

2.3 確定Cut-off(臨界值)

根據200例乳腺浸潤性導管癌患者和168例非乳腺浸潤性導管癌對照者血清HE4的檢測結果，用ROC曲線計算約登指數最大時對應的值，即為Cut-off值。測得HE4的ROC曲線下方的區域為 0.672，臨界值為 55.15pmol/L（P＜0.05），見圖 1。

圖1 乳腺浸潤性導管癌癌患者HE4的ROC曲線

3 討論

血清腫瘤標志物在惡性腫瘤的應用，除了可以協助診斷之外，對于惡性疾病的早期篩選，療效評價，復發轉移監測及預后評估等方面發揮著重要作用，對提高患者的生存率和生存質量上有極為重要的意義[5]。乳腺浸潤性導管癌在乳腺癌發病中所占比例最高，它的復發和預后主要受臨床病理分期和臨床病理特征所影響，本文主要通過研究血清HE4水平在乳腺浸潤性導管癌臨床病理中表達，并探討其在臨床應用。

人附睪分泌蛋白4（HE4）屬于乳清酸性4-二硫化中心（WFDC）蛋白家族，是新近提出的腫瘤標志物，首先由Kirchhoff等[6,7]學者在附睪組織中發現，是具有免疫保護作用的蛋白酶抑制劑家族，正常人中僅在附睪、呼吸道上皮細胞、唾液腺及生殖道表達。HE4也在眾多腫瘤中高表達，對卵巢漿液性癌、子宮內膜癌、肺癌和乳腺癌等疾病早期診斷和檢測復發具有重要作用[8,9]，多項研究表明[10,11]HE4是乳腺癌新的腫瘤標志物及預后監測指標。HE4的表達與乳腺癌淋巴結浸潤有關，并且可能是乳腺癌復發的一個預測因素[12]。本研究發現乳腺浸潤性導管癌患者HE4水平與患者年齡、月經狀態相關（P＜0.05）且HE4高表達時，預示著乳腺浸潤性導管癌患者腫瘤較大、淋巴結轉移可能性高，臨床分期較高（P＜0.05）,對患者進行HE4的監測，利于術后早期復發的檢測，提高患者生存質量。

乳腺是ER、PR的靶器官，ER、PR是調節性器官細胞生長發育的雌激素和孕激素受體，在正常乳腺上皮細胞及乳腺癌細胞內均含有雌二醇受體和孕激素受體。ER、PR是乳腺癌重要預測激素。乳腺癌ER、PR陽性表達說明其分化程度高，惡性度低，淋巴結轉移慢，預后好，對各種治療尤其是內分泌治療敏感性高[13]。本研究發現乳腺浸潤性導管癌ER、PR陽性狀態時HE4表達水平更低（P＜0.05），有利于乳腺癌的療效及預后判斷。

本研究用ROC曲線，以良性組及正常組為參照，發現HE4在55.15pmol/L時診斷指數最大，靈敏度和特異性分別為53.5%和74.4%，AUCROC為0.672。本研究結果與蔡徐山等[14,15]研究結果（以62.5pmol/L為界限值）相似，差異可能與研究對象和樣本量有關。

綜上所述，血清HE4檢測在乳腺浸潤性導管癌治療及預后判斷，術后早期復發以及高危人群隨訪等有重要的臨床意義。