支氣管肺炎患兒淋巴細胞亞群、免疫球蛋白及補體的相關(guān)性分析

王希部，羅燕萍，劉麗亞，莫紅梅

（廣東省深圳市羅湖區(qū)人民醫(yī)院醫(yī)學檢驗科，廣東 深圳）

0 引言

支氣管肺炎是兒童常見病、多發(fā)病，它是由多種病原微生物（如細菌、病毒、支原體等）引起的，可導致體內(nèi)多個器官炎性病理損傷，甚至危及兒童生命[1]。兩歲以下兒童多發(fā)。支氣管肺炎又稱小葉性肺炎，通常繼發(fā)于上呼吸道感染，由擴散引起下呼吸道炎癥。當機體抵抗力降低，呼吸防御能力減弱時，病毒或細菌可能侵入呼吸系統(tǒng)，引起支氣管肺炎。世界衛(wèi)生組織的調(diào)查報告指出，肺炎是全球兒童死亡的首要原因[2]。近年來有研究指出，支氣管肺炎與兒童免疫系統(tǒng)發(fā)育有直接關(guān)系[3]。因此，開展支氣管肺炎患兒外周血淋巴細胞亞群、血清免疫球蛋白及血清補體水平的檢測，觀察支氣管肺炎患兒與健康兒童的免疫功能變化，探討其臨床意義。現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇我院2018年診斷的78例支氣管肺炎患兒作為患者組，診斷依據(jù)《實用兒科學》支氣管肺炎診斷標準[4]，其中男性48例，女性30例，年齡分布在0.1-12歲，平均（2.1±2.2）歲。另外選擇我院兒童保健科同期體檢健康兒童30例作為對健康組，其中男性20例，女性10例。年齡分布在0.3-13歲，平均（2.6±2.7）歲。兩組性別、年齡一般資料比較，差別無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。

1.2 標本采集

患者組（均為住院未治療前）和健康組早上空腹抽取2mL EDTA-K2抗凝靜脈血、3mL內(nèi)置分離膠靜脈血。分離膠靜脈血3000r/min離心10min分離血清。

1.3 儀器和方法

淋巴細胞亞群的檢測 采用邁瑞四色流式細胞儀（BriCyte E6）進行淋巴細胞亞群的檢測，所用試劑均為邁瑞原裝配套試劑。試劑抗體為四色復合抗體。檢測前儀器校準在有效周期內(nèi)，并使用原裝配套質(zhì)控粒子進行質(zhì)控的檢測，所有通道質(zhì)控粒子均在目標范圍內(nèi)。樣本檢測為50ulEDTA-K2抗凝血+10ul四色復合抗體，混勻，室溫避光孵育15min，加450ul配套溶血劑，混勻，室溫避光孵育10min，上機檢測。

免疫球蛋白及補體的檢測 采用美國貝克曼全自動生化流水線進行檢測，試劑均為原裝配套試劑，方法學為免疫比濁法。質(zhì)控為伯樂質(zhì)控。項目檢測儀器的衛(wèi)生部和廣東省室間質(zhì)量評價均合格，室內(nèi)質(zhì)控良好，校準、保養(yǎng)均在有效周期內(nèi)。檢測當天室內(nèi)質(zhì)控在控。標本3000r/min離心10min上機檢測。

1.4 統(tǒng)計學分析

采用軟件SPSS 24.0對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析，計量資料以均數(shù)±標準差（）表示，兩組間比較采用t檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 淋巴細胞亞群的檢測結(jié)果

與健康組比較，患者組 CD3+、CD3+CD4+、CD3-CD16+CD56+淋 巴 細 胞 及 CD3+CD4+/CD3+CD8+比 值 明 顯 降 低（P＜0.05）；CD3+CD8+、CD3-CD19+淋巴細胞則明顯升高（P＜0.05），兩者具有統(tǒng)計學意義，見表1。

表1 兩組淋巴細胞亞群結(jié)果比較，%）

表1 兩組淋巴細胞亞群結(jié)果比較，%）

注：健康組與患者組相比，P＜0.05。

組別 例數(shù) CD3+ CD4+ CD8+ CD4+/CD8+ CD19+ CD16+CD56+患者組 78 65.96±7.60 35.01±7.34 29.45±7.09 1.44±0.45 22.98±8.96 10.67±5.71健康組 30 71.98±6.83 38.62±5.01 25.87±5.89 1.85±0.45 11.45±3.94 16.60±6.48

2.2 免疫球蛋白及補體（C3、C4）的檢測結(jié)果

與健康組相比，患者組IgG、IgA、IgM及補體C3水平均明顯降低（P＜0.05），兩者具有統(tǒng)計學意義；而兩組補體C4水平比較（P＞0.05），兩者無統(tǒng)計學意義，見表2。

表2 兩組免疫球蛋白及補體（C3、C4）結(jié)果比較（，g/L）

表2 兩組免疫球蛋白及補體（C3、C4）結(jié)果比較（，g/L）

注：健康組與患者組相比，P＜0.05，P＞0.05。

組別 例數(shù) IgG IgA IgM C3 C4患者組 78 8.18±3.35 0.70±0.60 1.02±0.47 1.10±0.20 0.30±0.11健康組 30 11.89±3.22 2.31±0.82 1.29±0.41 1.31±0.21 0.30±0.12

3 討論

小兒支氣管肺炎的發(fā)生，除與細菌、病毒和支原體的病原體直接侵入有關(guān)，有更直接關(guān)聯(lián)的是體內(nèi)免疫功能，病原體或合并感染能引起免疫球蛋白水平和補體的激活改變[5]。本研究顯示，與兒童健康組相比，支氣管肺炎患兒體內(nèi)存在著明顯的免疫功能絮亂，主要表現(xiàn)為CD3+、CD3+CD4+、CD3-CD16+CD56+淋巴細胞及CD3+CD4+/CD3+CD8+比值，IgG、IgA、IgM及補體C3水平明顯偏低，而CD3+CD8+、CD3-CD19+淋巴細胞水平則較高。

T淋巴細胞包括輔助/誘導T淋巴細胞（CD3+CD4+）和抑制/細胞毒T淋巴細胞（CD3+CD8+）。輔助/誘導T淋巴細胞，可促進細胞免疫和通過釋放各種因子激活B淋巴細胞和效應(yīng)T細胞來提高機體免疫功能。抑制/細胞毒T淋巴細胞具有抑制和細胞毒作用，能抑制機體多種免疫功能。CD3+CD4+/CD3+CD8+淋巴細胞比值變化與機體免疫功能變化有關(guān)，對免疫系統(tǒng)內(nèi)環(huán)境的改變具有重要診斷意義。本研究顯示，與健康兒童組相比，支氣管肺炎患兒CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD4+/CD3+CD8+比值均明顯降低（P＜0.05），CD3+CD8+則升高（P＜0.05），這反應(yīng)輔助 /誘導 T 淋巴細胞對細胞免疫和體液免疫作用減弱，而抑制/細胞毒T淋巴細胞抑制免疫功能增強。兩者的共同作用導致支氣管肺炎患兒細胞

作者簡介：第一作者：王希部，男，主管技師，主要研究方向為臨床檢驗；通訊作者＊：莫紅梅。免疫功能下降，導致內(nèi)環(huán)境失衡。

B細胞（CD3-CD19+）是體液免疫的主要效應(yīng)細胞，活化的B細胞產(chǎn)生抗感染抗體IgG、IgA、IgM，對機體抗感染產(chǎn)生重要作用。[6]本研究顯示，與兒童健康組相比，支氣管肺炎患兒B淋巴細胞明顯升高，而IgG、IgA、IgM水平降低。這表明B細胞在抗原的刺激下，大量產(chǎn)生。但IgG、IgA、IgM水平降低，表明B細胞的活化受到影響或者抗感染過程中免疫球蛋白消耗過多導致[7]。這些結(jié)果都揭示支氣管肺炎患兒體內(nèi)體液免疫功能非常絮亂。

NK細胞是天然免疫系統(tǒng)中的重要細胞，主要的功能是控制病毒和細菌的感染，穩(wěn)定內(nèi)環(huán)境，產(chǎn)生細胞因子，殺傷腫瘤細胞，并在先天免疫和獲得免疫之間建立聯(lián)系[8]。NK細胞可參與機體的固有免疫和直接殺傷病原菌或被感染的細胞，同時也可通過分泌干擾素-C（IFN-C）來調(diào)節(jié)機體細胞免疫功能，功能性NK細胞的減少可以使IFN-C生成減少，從而導致Th1/Th2失衡[3]。本研究顯示，與兒童健康組相比，支氣管肺炎患兒NK細胞明顯降低，提示NK細胞生成被抑制或者消耗過多，導致NK細胞免疫功能作用減低，不利于病情的恢復。

補體與相關(guān)因子和膜蛋白共同參與體內(nèi)抗感染免疫和免疫調(diào)節(jié)等生理活動。補體系統(tǒng)中C3含量最高，在補體的激活中起著核心和關(guān)鍵作用，參與機體免疫應(yīng)答。在免疫防御、免疫調(diào)控和免疫病理等方面發(fā)揮著重要作用[9]。由于C3在補體途徑中處于關(guān)鍵位置，因而定量的檢測對免疫功能絮亂的診斷具有重要意義。本研究顯示，與兒童健康組相比，肺炎支氣管患兒血清補體C3明顯降低，而補體C4未出現(xiàn)明顯變化。這可能是機體的免疫防御過程中，由于C3被大量的消耗所致。

綜上所述，支氣管肺炎患兒的體內(nèi)免疫功能明顯絮亂，檢測免疫功能相關(guān)指標對臨床診斷和指導后續(xù)治療具有重要意義。