血清Cla-1、MK和Gal-1水平診斷橋本甲狀腺炎合并乳頭狀甲狀腺癌的臨床價值

唐志金,沈 華,于海文

(上海市嘉定區南翔醫院 普外科，上海 201802)

橋本甲狀腺炎(HT)發生癌變是一個臨床研究熱點問題，是否進行手術治療存在爭議。有學者主張行甲狀腺全切除術，術后出現永久性甲狀旁腺功能低下和喉返神經損傷等后遺癥，嚴重影響患者的生活質量。臨床上一般認為HT合并癌變時，需要手術行單側甲狀腺葉切除術，但目前仍無明確指標能夠判斷TH伴發癌變，而傳統的B超檢查也具有一定的臨床局限性，往往靈敏度并不高[1]。因此，尋找HT伴發癌變的預警信號對臨床治療具有重要臨床意義[2]。緊密連接蛋白1(Cla-1)在上皮極性和細胞黏附的過程中具有重要作用，在腫瘤組織和正常組織中存在較大的差異[3]；中期因子(MK)是一種分泌型肝素生長因子，為低分子量蛋白質，在乳頭狀甲狀腺癌的發生發展具有一定的作用[4]；半乳糖血凝素1(Gal-1)為缺氧誘導因子，在腫瘤的形成過程中具有重要作用[5]。本研究通過聯合檢測血清Cla-1、MK和Gal-1水平，觀察其在診斷HT發生癌變中的臨床價值，現報告如下。

1 資料與方法

1.1病例選擇 選擇2018年1月至2019年12月在我院診治的HT合并甲狀腺癌(PTC)患者107例，為HT合并PTC組。其中男42例，女65例，平均年齡(45.85±9.64)歲，按照HT的病理分期：早期17例，中期25例和晚期65例；按照PTC的TNM分期：Ⅰ期26例，Ⅱ期12例，Ⅲ期56例和Ⅳ期13例。選擇同期在我院就診HT患者65例，為HT組，其中男27例，女38例，平均年齡(46.15±8.27)歲。選擇同期在我院行健康體檢者30例，為健康對照組，其中男9例，女21例，平均年齡(45.28±10.26)歲。納入標準：HT合并PTC組和HT組均經病理確診；均簽署知情同意書；經醫院倫理委員會審核通過。排除標準：其他類型腫瘤；免疫性疾病和血液性疾病；內分泌性疾病；高血壓、糖尿病和冠心病等慢性疾病；肝炎、結核、肺炎等急慢性感染；智力低下或者精神性疾病；孕婦和哺乳期婦女。3組年齡、性別等基線資料差異無統計學意義，具有可比性。

1.2方法

1.2.1HT病理分期 根據病理將HT分為早期(17例)，中期(25例)和晚期(65例)。病變組織中等硬度，與正常腺體界限清楚，切面呈粉白色或者粉紅色，正常腺體變少，病理以甲狀腺組織中散在的淋巴細胞浸潤，濾泡上皮為嗜酸變，病程為1年左右為早期；術中甲狀腺質地硬，與正常組織界限清楚，切面呈白色或者灰色，病理顯示腺泡萎縮。壞死、纖維化和小葉結構消失，病程超過3年為晚期；病變介于早期和晚期之間的病變，病程為1～3年為中期。

1.2.2觀察指標 患者術前，術后5天抽取肘靜脈血10 ml。血液標本采用離心機將血液離心，離心半徑15 cm，離心速度3 000 r/min，離心15 min，抽取上清液放置在除酶管內，放置在-70 ℃冰箱中保存。Cla-1、MK和Gal-1水平采用酶聯免疫法進行檢測，試劑盒采用上海森玨公司，根據試劑盒說明操作。

2 結 果

2.13組血清Cla-1、MK和Gal-1水平比較 HT合并PTC組血清Cla-1、MK和Gal-1水平明顯高于HT組和健康對照組(P<0.01)，HT組血清Gal-1水平明顯高于健康對照組(P<0.01)，而血清Cla-1和MK水平在HT組和健康對照組之間差異無統計學意義(P>0.05)。見表1。

表1 3組血清Cla-1、MK和Gal-1水平比較

注：與健康對照組比較，*P<0.01；與HT組比較，#P<0.01

2.2不同HT分期HT合并PTC患者血清Cla-1、MK和Gal-1水平比較 HT合并PTC患者血清Cla-1、MK和Gal-1水平素隨著HT分期的升高而出現明顯的升高(P<0.01)。見表2。

2.3不同TNM分期HT合并PTC患者血清Cla-1、MK和Gal-1水平比較 HT合并PTC患者血清Cla-1、MK和Gal-1水平隨著TNM分期而出現明顯升高(P<0.01)。見表3。

表2 不同HT分期HT合并PTC患者血清Cla-1、MK和Gal-1水平比較

注：與早期比較，*P<0.01；與中期比較，#P<0.01

表3 不同TNM分期HT合并PTC患者血清Cla-1、MK和Gal-1水平比較

注：與Ⅰ～Ⅱ期比較，*P<0.01；與Ⅲ期比較，#P<0.01

2.4HT合并PTC患者血清Cla-1、MK和Gal-1之間的相關性 HT合并PTC患者血清Cla-1與MK(r=0.768，P<0.01)和Gal-1(r=0.813，P<0.01)水平呈正相關，而血清MK與Gal-1呈正相關(r=0.753，P<0.01)。

2.5血清Cla-1、MK和Gal-1水平診斷PTC的效能 血清Cla-1、MK和Gal-1水平在診斷HT合并PTC方面具有較高的靈敏度和特異度，將Cla-1、MK和Gal-1進行Logistic回歸得方程0.289×XCla-1+0.017×XMK+0.267×XGal-1-15.054，聯合檢測的靈敏度為88.8%，特異度為90.8%，AUC為0.941，明顯高于Cla-1(Z=4.813，P<0.01)，MK(Z=5.437，P<0.01)和Gal-1(Z=4.338，P<0.01)，而3個指標之間在診斷甲狀腺癌方面差異無明顯統計學意義(P>0.05)。見表4和圖1。

表4 血清Cla-1、MK和Gal-1水平診斷PTC的效能

圖1 血清Cla-1、MK和Gal-1水平在診斷PTC的曲線下面積比較

3 討 論

HT表現為機體對正常甲狀腺的免疫耐受消失，而免疫系統將甲狀腺組織視為抗原，激發機體的免疫反應。現有的診斷主要由彩色超聲，甲狀腺球蛋白抗體、過氧化酶抗體和病理檢查。近年來發現HT與PTC具有密切聯系，HT的炎癥反應加速PTC的發生發展，但兩者的確切關系仍不清楚。已有研究表明HT和PTC具有相同的致病因素，HT可能是PTC的危險因素，如何監測HT患者，早期發現PTC是改善預后的關鍵。

本研究發現HT合并PTC組血清Cla-1水平高于HT組和健康對照組，而HT和健康對照之間差異無統計學意義，與文獻報道[6]甲狀腺惡性腫瘤中的Cla-1水平明顯高于良性腫瘤水平類似，并且發現細胞核中Cla-1的磷酸化活性改變，導致細胞遷移和侵襲增加。并且發現血清Cla-1水平隨著HT分期和PTC的TNM分期升高而升高，說明血清Cla-1水平與HT和PTC具有明顯的相關性，并且與HT合并PTC疾病的嚴重程度呈正相關。Cla-1與甲狀腺腫瘤分級，淋巴轉移等具有明顯的相關性，在腫瘤的發生發展過程中具有促進作用[6-7]。在一項結腸癌的研究中發現Cla-1表達與腫瘤分期，淋巴結轉移，侵犯深度等具有明顯相關性，說明Cla-1參與了結腸癌的發生發展過程，Cla-1表達的改變提示了癌變的風險[8]。基礎研究證實Cla-1在結腸癌前病變階段出現了異常，緊密結構遭到破壞，細胞極性喪失，導致生長失控，是引起腫瘤發生發展的重要原因[9-10]。在血清Cla-1水平是否能夠成為監測HT發生PTC方面，本組研究發現當血清>14.65 ng/ml時，其靈敏度為55.1%，特異度為96.9%，AUC為0.795，說明在HT預測PTC方面具有較高的靈敏度和特異度。

本研究發現血清MK水平HT合并PTC組明顯高于HT組和健康對照組，并且隨著HT分期和PTC腫瘤分期的升高而升高，說明MK參與了HT發生發展到PTC的過程中，與文獻報道的結果類似[11]。現已經MK作為一種生長因子在健康成人的表達量低，是維持機體必要的水平，而在惡性腫瘤中呈過度表達，并參與了惡性腫瘤細胞的增殖和轉移，并與腫瘤的惡性程度和預后具有密切相關性[12]。在基礎的研究發現MK可以通過與相應的受體結合，通過磷酸化激活絲裂素活化蛋白激酶信號通路，是細胞凋亡受到抑制，細胞增殖和分裂加速[12]。并且在甲狀腺惡性腫瘤的治療中得到驗證，甲狀腺癌患者手術后血清MK水平出現明顯降低，并且發生轉移的患者血清MK水平出現明顯升高，認為血清MK是甲狀腺癌診斷和預后的重要指標[11]。本研究發現當血清MK>355.95 pg/ml時，HT發生PTC的靈敏度為60.7%，特異度為81.5%，AUC為0.759，說明對HT發生PTC的診斷具有一定的特異度。與文獻報道的結果接近：血清MK水平在鑒別甲狀腺良惡性腫瘤方面，其靈敏度和特異度分別為75.71%，特異度為75.0%，AUC為0.834，故認為血清MK水平在鑒別甲狀腺腫瘤良惡性方面具有一定的臨床價值。

本研究顯示血清Gal-1水平HT合并PTC組明顯高于HT組和健康對照組，并且發現HT組血清Gal-1水平高于健康對照組，與MK和Cla-1具有一定的差異，故可以作為鑒別診斷。本組研究還發現血清Gal-1水平與HT分期和PTC腫瘤分期呈正相關，說明Gal-1參與了HT發現到PTC的發生發展過程，與文獻報道的結果類似[13]。現已知Gal-1定位染色體22q13.1的單基因編碼，是糖類識別結構域，為免疫反應的負調節蛋白[14]。現有研究顯示Gal-1表示在甲狀腺癌中顯著增強，而在良性腫瘤中表達較弱，并且與甲狀腺腫的分期和淋巴結轉移具有明顯的正相關[15-16]。本研究還發現當血清Gal-1>24.93 ng/ml時，診斷HT合并PTC具有較高的特異度，說明血清Gal-1水平在診斷HT合并PTC方面具有一定的臨床價值。本研究通過聯合檢測血清Cla-1、MK和Gal-1水平在預測HT并發PTC的診斷效能方面，發現聯合檢測的靈敏度為88.8%，特異度為90.8%，AUC為0.941明顯提高了診斷效能，說明3個指標聯合檢測能夠提高靈敏度，我們通過相關性分析發現血清Cla-1、MK和Gal-1水平之間存在正相關，說明這3個指標聯合檢測具有一定的互補性，能夠提高HT預測發生PTC的診斷效能，之間的確切機制需要進一步研究。由于3個指標在HT轉變為PTC的過程中的功能不同，單獨檢測的診斷效能仍需要提高，而3個不同機制的指標聯合檢測對于發生PTC的預測具有重要臨床價值，當3個指標均超過臨界值時，高度警示是否發生的PTC的可能，建議臨床醫師引起重視。

總之，Cla-1、MK和Gal-1參與了HT合并PTC的發生發展，在預測HT患者發生PTC具有較高的診斷效能。