結(jié)核患者痰結(jié)核桿菌檢驗的方法探討

許瑞軍，劉欣

（1.新疆奇臺縣疾病預(yù)防控制中心，新疆 奇臺 831800；2.新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院昌吉分院，新疆 昌吉 831100）

結(jié)核病作為一種傳染性疾病，在一定程度上已經(jīng)對人類的身體健康造成嚴(yán)重威脅，按照WTO的數(shù)據(jù)顯示在全球范圍內(nèi)感染結(jié)核桿菌的人數(shù)大約有三分之一，每年大約會增加一千萬例。近年來，隨著社會經(jīng)濟(jì)的發(fā)展與人們不斷加快的生活節(jié)奏，結(jié)核發(fā)病率逐年增加[1]。由于結(jié)核早期癥狀類似于感冒，因此很難確診，時常因誤診而耽誤病情。為深入研究PCR對于結(jié)核的檢查效果，我院現(xiàn)選取100例患者進(jìn)行分組研究，詳情如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇我中心醫(yī)院在2016年3月-2018年3月期間收治的100例結(jié)核患者，作為本次研究對象，男68例、女32例。現(xiàn)將全部患者隨機(jī)分為兩組，每組50例。觀察組年齡33-62歲，平均年齡（42.12±5.46）歲；對照組年齡34-61歲，平均年齡（41.21±5.22）歲。兩組間差異性不明顯，P＞0.05。

1.2 方法 早晨7點(diǎn)取患者咳出的深部痰液。

觀察組：PCR法。在EP管中取1 mL痰液，在13000 rpm條件下進(jìn)行為期10 min的離心處理，取上清液并加入生理鹽水進(jìn)行1次洗滌，之后再次進(jìn)行離心處理與取上清。將30 μL TB提取液加入到沉淀中，進(jìn)行均勻的振蕩，然后做好水浴工作，即100 ℃、30 min，37 ℃、10 min，13000 rpm離心10 min，取上清，PCR的反應(yīng)條件設(shè)置為95 ℃ 1 min、55 ℃ 30 s、72 ℃ 1 min，如此進(jìn)行40次循環(huán)。

對照組：傳統(tǒng)涂片檢查。取痰標(biāo)本直接進(jìn)行涂片，抗酸染色，關(guān)于涂片上的結(jié)核菌需要使用顯微鏡進(jìn)行檢測，若在100個視野中可見3-9條，便可確診為陽性。

1.3 觀察指標(biāo) 統(tǒng)計患者的陽性檢測率，并進(jìn)行對比。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS 22.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)的分析與統(tǒng)計，P＜0.05為有統(tǒng)計學(xué)差異。

2 結(jié)果

觀察組與對照組的陽性檢測率分別為72.00%、26.00%，具有統(tǒng)計學(xué)差異（P＜0.05），詳情見表1。

表1 兩組患者陽性檢測率的對比

3 討論

結(jié)核作為一種比較常見的呼吸系統(tǒng)疾病，具有很強(qiáng)的傳染性且難以治愈，已經(jīng)對患者的生活質(zhì)量與家人健康造成嚴(yán)重影響，若不能進(jìn)行及時有效的控制則出現(xiàn)轉(zhuǎn)移的可能性較大，甚至?xí){到患者的生命安全。我國結(jié)核疫情十分嚴(yán)峻，感染與發(fā)病人數(shù)均比較多、死亡率高、多集中發(fā)生在農(nóng)村以及耐藥者多等，再加上該病早期很難被診斷，確診時病情多發(fā)展到養(yǎng)殖階段，由此會增加臨床治療難度，為此必須進(jìn)行及時確診[2]。在進(jìn)行臨床診斷時需要按照不同感染部位提取不同標(biāo)本，如痰液、胸水、心包液、尿、腦脊液以及組織勻漿等，為避免對診斷結(jié)果造成不必要的影響，需要及時收集標(biāo)本、保存一檢驗標(biāo)本[3]。

痰涂片作為一種比較常用的方法，關(guān)于疾病的判定可以通過在痰液中檢測結(jié)核桿菌的方式，操作簡單、價格低廉且容易掌握等，但是臨床檢出率不高，必須進(jìn)行反復(fù)檢驗，且存在較大誤差。PCR技術(shù)則是加入一條與靶基因序列互補(bǔ)的熒光雙標(biāo)記寡核苷酸探針，在標(biāo)本存在特異性PCR擴(kuò)增時特異熒光變化發(fā)出，以此可以采用檢測儀器進(jìn)行科學(xué)的檢測，以此來準(zhǔn)確地判斷擴(kuò)增產(chǎn)物[4]。這種方法具有一系列優(yōu)點(diǎn)，如高檢出率、強(qiáng)特異性與時間較短等，且應(yīng)用在血液標(biāo)本、胸腔積液與痰液中的價值較高，以此提供重要的參考依據(jù)便于診治疾病。

在本次研究中，相比較于傳統(tǒng)方法檢測的對照組，觀察組經(jīng)PCR檢測后陽性檢測率明顯提高，P＜0.05。

綜上所述，PCR技術(shù)在結(jié)核患者的檢查應(yīng)用中具有很高的價值，能夠極大地提高臨床診斷率，值得臨床推廣與應(yīng)用。