核酸檢測技術在獻血者血液篩查中的應用

周陸

（欽州市中心血站，廣西 欽州 535000）

血液和血液制品是輸血性傳染疾病得以傳播的重要載體，雖然積極檢測輸血相關病毒的抗體或抗原能在很大程度上降低廣大人民群眾所面臨的輸血傳播疾病感染風險，但事實上該風險依舊存在，輸血傳播疾病發生事件仍時有發生，這是因為HBV、HCV、HIV血清學檢測具有較長的“窗口期”，因而單純對抗體或抗原進行檢測是無法從根本上保證血液和血液制品安全性的[1]。本研究旨在對核酸檢測技術應用于獻血者血液篩查中的臨床應用價值展開分析與探討，研究詳情如下。

1 資料和方法

1.1 資料來源 選擇2017年1月-2018年12月我站采集的54575份無償性獻血者所提供血液樣本納入本次研究（其中26003份為我站2017年1月-2017年12月所采集血液樣本數；28572份為2018年1月-2018年12月我站所采集血液樣本數），全部無償性獻血者中31483例男性、23092例女性，年齡最大的55歲，年齡最小的18歲，年齡均數（34.76±4.51）歲。所有無償性獻血者相關情況均符合獻血標準，且全部納入研究血液樣本均經酶聯免疫吸附實驗（ELISA法）檢測項目確認合格后進入核酸檢測環節。

1.2 方法 研究中所有接受NAT檢測血液樣本的混合和檢測皆利用全自動核酸提取、擴增檢測系統及全自動加樣儀完成：在6個無償獻血者血液樣本中各取167 μL血漿，由全自動混樣儀加入一級混樣池；依據MGP磁珠分離技術原理，應用全自動核酸提取儀提取核酸，通過核酸擴增檢測儀對血液樣本中HCV、HCV、HIV靶序列展開擴增檢測，由系統自帶服務器對結果進行自動判讀，確保每組檢測均設有指控對照；當某一一級混樣池中樣本經全自動核酸提取、擴增檢測系統確認為陽性，則對組成該一級混樣池中血液樣本的6份原始血液樣本行單標本檢測，若單標本經NAT檢測得出結果呈陽性則認定為NAT陽性；若單標本經NAT檢測得出結果呈陰性則認定為NAT陰性。對經NAT檢測得出的NAT陽性標本行HBsAg、HBeAg、抗-HBe、抗HBs、抗HBc單標本檢測，以對NAT檢測結果的準確性予以判定。

2 結果

表1顯示，54575份無償性獻血者所提供血液樣本中共檢出ELISA法陰性、NAT陽性血液樣本49份，此49份血液樣本檢測報告均表明該血液樣本為HBV-DNA陽性，無HCV-DNA和HIV-DNA血液樣本出現，ELISA檢測方法的漏檢率為0.0898%（49/54575）。

表1 2017-2018年我站無償性獻血血液樣本ELISA法陰性、NAT陽性情況

3 討論

相關研究結果顯示，無償獻血者在病毒感染“窗口期”進行獻血是輸血性傳染疾病傳播風險的主要來源，如HIV感染“窗口期”者、HBV隱匿性感染者等所獻出的處于病毒感染“窗口期”的血液和血液制品均是無法利用ELISA檢測方法有效檢測出來的，具有一定的漏檢可能[2]。為解決這個問題，越來越多的專家學者和行業內人士均十分致力于推動將NAT應用于獻血者血液篩查中，以提升血液安全性。

NAT是一種可對病原體核酸進行直接檢測的方法，現被許多國家與地區應用于血液篩查工作的實際開展過程當中[3]。ANT的敏感性與特異性均較高，即使受檢血液樣本中病毒濃度不高，甚至微量，其仍舊能夠將病毒核酸檢測出來，可大大縮短ELISA檢測方法的“窗口期”，還能使由隱匿性感染、病毒變異等原因所導致的ELISA漏檢情況的發生得到有效規避[4]。

為探究NAT在獻血者血液篩查中的應用價值，本研究對我站2017年-2018年間所采集的54575份血液樣本實施了核酸檢測，所得結果顯示：全部血液樣本中共檢出ELISA法陰性、NAT陽性血液樣本49份，ELISA檢測方法的漏檢率為0.0898%（49/54575），在很大程度上提示著NAT在獻血者血液篩查中應用的必要性。

由此可見，核酸檢測技術的應用可使輸血傳播疾病的發生得到有效規避，令臨床用血安全與臨床用血質量得到更好保障。