地桃花不同部位中銀鍛苷的含量比較

陳貴，夏稷子，史娟，鄧言歡，王濤，張華，盧婭玲

(黔南州檢驗檢測院，貴州 都勻 558000)

地桃花為錦葵科梵天花屬植物地桃花UrenalobataL.的干燥根、地上部分或全草，具有清熱解毒、活血消腫、祛風利濕的功效，主治感冒、痢疾、帶下、月經不調、喉痹等[1-3]。地桃花主含黃酮、有機酸及多酚類成分，其黃酮類中的銀鍛苷具有顯著的抗氧化和抗炎作用[4-5]。蘇聰等[6]研究表明，廣西和廣東不同地區地桃花地上部分中銀鍛苷的含量差別較大，考慮為不同莖葉比造成，但未考察銀鍛苷在地桃花各部位中的分布差異。本研究建立了HPLC方法對貴州不同采集地、不同部位地桃花中的銀鍛苷含量進行比較，為更加合理制定地桃花質量標準提供依據。

1 儀器與材料

LC-2010A型高效液相色譜儀(日本島津公司)；AG135型電子天平(瑞士梅特勒-托利多公司)；BSA224S型電子天平(賽多利斯科學儀器(北京)有限公司)；HH-6型數顯恒溫水浴鍋(常州國華電器有限公司)。銀鍛苷對照品(批號：170305，含有量99.34%，北京世紀奧科生物技術有限公司)；乙腈為色譜純；水為哇哈哈純凈水；其余試劑為分析純。地桃花樣品采于貴州丹寨、安順、盤縣等地，經貴州省食品藥品檢驗所中藥標本館李楊館長鑒定為錦葵科植物地桃花UrenalobataL.的干燥全草。具體樣品信息見表1。

表1 地桃花樣品信息

2 方法與結果

2.1 色譜條件[7]

島津InertSustain?C18色譜柱(150 mm×4.6 mm，5 μm)；流動相為乙腈-0.1%冰醋酸溶液(22∶78)；柱溫30 ℃；檢測波長315 nm；體積流量1.0 mL·min-1；進樣量為10 μL。在此條件下，不同部位樣品中銀鍛苷與相鄰成分的分離度均大于1.5，其理論塔板數均大于6 000，HPLC色譜見圖1。

注：A.對照品；B-E.地桃花不同部位樣品(B.根；C.莖；D.葉；E.果實)；1.銀鍛苷

圖1 地桃花不同部位樣品HPLC色譜

2.2 對照品溶液的制備

取銀鍛苷對照品，加入80%甲醇制成每1 mL含銀鍛苷238.2 μg的溶液，即得。

2.3 供試品溶液的制備

精密稱取各部位地桃花粉末(過三號篩)約1 g，精密加入80%甲醇25 mL，稱重后置水浴上加熱回流提取1 h，放冷，加入80%甲醇補足減失的重量，用微孔濾膜濾過，取續濾液即得。

2.4 方法學考察[7]

取“2.2“項下對照品溶液制備不同稀釋濃度對照品溶液，測定其峰面積后，以銀鍛苷質量濃度(X)對峰面積(Y)作線性回歸，得回歸方程為Y=31 242X+475(r=1.000 0)，線性范圍為0.4764～238.2 μg·mL-1。精密度試驗：將同一稀釋濃度對照品溶液重復進樣6次，銀鍛苷峰面積的RSD為0.14%，表明儀器具有良好的精密度。穩定性試驗：分別測定供試品溶液制備后0、2、4、6、12和24 h銀鍛苷的含量，結果其含量的RSD為0.56%，表明供試品溶液在制備后24 h內穩定性良好。重復性試驗：6份平行樣品中銀鍛苷含量的RSD為0.28%，表明該方法的重復性良好。加樣回收率試驗銀鍛苷平均回收率為99.2%，RSD為2.34%，回收率符合要求。

2.5 樣品測定

分別取不同采集地、不同部位的地桃花粉末約1 g，每個樣品照“2.3”項下方法平行制備3份供試品溶液，按“2.1”項下色譜條件外標法測定其銀鍛苷的含量，結果見表2。

表2 不同采集地不同部位地桃花中銀鍛苷的含量測定結果 (n=3)

3 討論

含量測定結果顯示，不同采集地地桃花相同部位的銀鍛苷含量存在一定差別，采用SPSS 18.0軟件分析得出貴州荔波產地桃花莖和葉測定結果為離群值，這可能與不同生長環境有關。同一采集地不同部位之間也存在較大差異，其分布規律為果實>葉>莖>根，其中根部少含或幾乎不含；莖中含量較少，大部分含量低于萬分之一；葉和果實中含量較高。因此，銀鍛苷用于地桃花葉或果實的質量控制更具意義。若用于地上部分或全草的含量測定，則應注意含量限度確定的科學性和合理性，同時應注意取樣的均勻性和代表性。