重癥肌無力患者血清cortactin、AChR-Ab、MuSK-Ab抗體檢測的臨床價值

袁曉林

湖北省荊州市第五人民醫院 434020

重癥肌無力(Myasthenia gravis，MG)是一種自身免疫性疾病，它主要由神經—肌肉接頭處傳遞功能障礙所引起[1]。目前，MG的致病原因尚不明確，但較多研究指出，MG可能與遺傳、感染、環境等因素有關。臨床上MG常伴有骨骼肌無力、易乏易疲勞等癥狀，在活動后其癥狀更加明顯，但可隨休息后有所減輕。資料顯示，重癥肌無力患者中有65%～80%患者合并有胸腺增生，有10%～20%合并有胸腺瘤，嚴重影響患者的生命安全[2]。據文獻報道，抗皮動蛋白(cortactin)、乙酰膽堿受體(Acetycholine receptors，AChR-Ab)及肌肉特異性酪氨酸激酶(Muscle specific tyrosine kinase，MuSK-Ab)抗體與MG均存在一定關系[3-4]。基于此，本文探討血清cortactin、AChR-Ab及MuSK-Ab在不同病理中的表達情況，并分析其對MG的診斷價值，以期為臨床防治提供參考。現將結果報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2017年8月—2018年12月本院收治的MG患者78例為MG組，其中胸腺病變的52例(胸腺組)，非胸腺病變者的26例(非胸腺組)；同期體檢健康者50例為健康對照組。病例納入標準：(1)符合《重癥肌無力診斷和治療中國專家共識》[5](2012)診斷標準者，且經MRI或CT檢查確診、病理學檢查等確定為MG者；(2)疲憊勞累表現明顯，但休息后可緩解；(3)新斯的明實驗結果為陽性；(4)合并有胸腺病變者；(5)患者及其家屬簽署知情同意書。排除標準：(1)嚴重心、肝、腎等功能障礙；(2)有智力或精神障礙不能配合本研究者。MG組中，男、女各為30、48例；年齡15～75歲，平均年齡(42.35±7.12)歲；病程1～3個月，平均病程2個月；體質量指數(BMI)20～28，平均BMI 23.32±4.18。健康對照組中男、女各為18、32例，年齡17～74歲，平均年齡(42.13±7.25)歲；BMI 19～28，平均BMI 23.26±4.02。其中MG組中經MRI檢查確定胸腺瘤有32例、胸腺增生32例、胸腺囊腫14例；根據Osserman分型，得出Ⅰ型有24例、ⅡA型有18例、ⅡB型有26例、Ⅲ+Ⅳ型有10例。各組基礎資料比較無統計學差異(P>0.05)。本研究征得院醫學倫理委員會批準，受試者均知情同意。

1.2 方法 采集受試者空腹肘靜脈血5ml進行離心(3 000 r/min，10min)，分離血清，取上層血清-80℃保存備測。cortactin、AChR-Ab、MuSK-Ab水平采用酶聯免疫吸附法進行檢測(試劑盒供自Santa Cruz生物有限公司，美國)。AChR-Ab、MuSK-Ab分別以AChR、MuSK為抗原，在波長為490nm下進行吸光度值測定。Cortactin抗體采用Western印跡法檢測。上述操作均遵循試劑說明嚴格進行。

2 結果

2.1 兩組cortactin、AChR-Ab、MuSK-Ab表達比較 MG組cortactin、AChR-Ab、MuSK-Ab的陽性表達均高于對照組，差異具有統計學意義(P<0.05)，見表1。

2.2 MG組中cortactin、AChR-Ab、MuSK-Ab表達比較 胸腺組cortactin、AChR-Ab的陽性表達均高于非胸腺組，差異具有統計學意義(P<0.05)，見表2。

表1 兩組cortactin、AChR-Ab、MuSK-Ab表達比較[n(%)]

表2 MG組中cortactin、AChR-Ab、MuSK-Ab表達比較[n(%)]

2.3 cortactin、AChR-Ab、MuSK-Ab與MG病理參數的關系 cortactin、AChR-Ab、MuSK-Ab的陽性表達與MG的病理類型及Osserman分型有關，差異具有統計學意義(P<0.05)；與MG患者的年齡、性別等無關(P>0.05)。見表3。

表3 cortactin、AChR-Ab、MuSK-Ab與MG病理參數的關系[n(%)]

3 討論

MG在臨床上已較常見，其致病原因尚不明確。近年來，關于MG的研究已經日漸進步，且已有較多研究發現，血清cortactin、AChR-Ab、MuSK-Ab與MG均存在一定關系。cortactin是位于細胞皮層的一種單體蛋白，它能夠與肌動蛋白進行結合，并促進其聚合[6]。目前關于cortactin抗體的報道很少，但國外已有研究發現，MG患者中發現cortactin存在一定的陽性。且陳美秋等[7]報道指出，cortactin可通過干擾信號通路使運動終板上的AChR數量減少，從而導致患者肌無力。而AChR-Ab已被證實為MG的主要致病抗體，其作用機制主要表現為：AChR-Ab能與AChR進行結合，促進AChR的降解、破壞，從而減少AChR的數量，阻礙信號通路的傳導，進而發生肌無力現象[8]。據文獻報道，AChR-Ab在MG患者中的陽性率較高，且在不同胸腺病理中，胸腺瘤的陽性率最高[9]。提示AChR-Ab對MG患者的臨床診斷均有一定價值。另外，MuSK為肌肉神經源性蛋白受體的組成部分，其對神經突觸具有重要意義。已有相關報道指出，MuSK-Ab的陽性患者多為正常，且在胸腺瘤中較為少見[10]。本文中，cortactin、AChR-Ab、MuSK-Ab在MG組患者中的陽性率均明顯高于健康者中，胸腺組患者中的陽性表達均高于非胸腺組。該結果說明，cortactin、AChR-Ab、MuSK-Ab在MG有陽性表達，均能作為MG的致病抗體。進一步對cortactin、AChR-Ab、MuSK-Ab與MG病理參數的關系進行分析，結果發現，cortactin、AChR-Ab、MuSK-Ab的陽性表達與病理類型、Osserman分型有關，與年齡、性別無關。且cortactin、AChR-Ab、MuSK-Ab在胸腺瘤中均有較高表達。該結果中cortactin、AChR-Ab與上述結論相符，MuSK-Ab與上述結論不一致。分析原因可能與樣本數及檢測方法有關。另外MuSK-Ab在Osserman分型中Ⅲ+Ⅳ型具有較高表達，說明MuSK-Ab主要存在于MG臨床癥狀較重的患者中。

綜上所述，血清cortactin、AChR-Ab、MuSK-Ab抗體血清與MG具有一定關系，且AChR-Ab對MG患者具有較高的診斷價值，MuSK-Ab主要存在于MG臨床癥狀較重的患者中。本研究不足為樣本量偏小，仍有待進一步行大樣本研究檢驗。