COVID-19 相關樣本處理加工的實驗室生物安全——來自CDC的臨時指導文件

林愛芬，張小燕，劉妍 編譯，胡迅 審校

·新型冠狀病毒專欄·

COVID-19 相關樣本處理加工的實驗室生物安全——來自CDC的臨時指導文件

林愛芬，張小燕，劉妍 編譯，胡迅 審校

317000 臺州，浙江省臺州醫院生物資源中心（林愛芬）；201210 上海，生物芯片上海國家工程研究中心（張小燕）；100039 北京，解放軍總醫院第五醫學中心臨床研究管理中心（劉妍）；610041 成都，四川大學華西醫院生物樣本庫（胡迅）

本指導文件更新于2020年2月10日，修訂內容摘要如下：

1．增加“認證”一詞，以說明任何有可能產生氣溶膠或飛沫的實驗均應在經認證的二級生物安全柜（BSC）中進行。

2．增加了在 BSC 外完成任何實驗程序的相關細節。

3．提供了更多有關使用美國環保局（EPA）注冊的醫用消毒劑的細節。

4．增加了 COVID-19 實驗廢棄物處置的相關內容。

5．補充現場和項目特定的風險評估，以確定是否需要增加實驗室生物安全控制措施。

在更多信息尚未獲得前，收集和處理可能含有 SARS-CoV-2 的樣本時應采取預防措施。臨床和實驗室工作人員之間的及時溝通對減少 SARS-CoV-2 潛在感染患者的樣本處理風險至關重要。因此，此類標本應該貼上相應的標簽，并提醒實驗室工作人員正確處理樣本。

本文介紹 SARS-CoV-2 樣本處理的生物安全指導文件。其他有關細節，請參閱《微生物和生物醫學實驗室的生物安全》（BMBL）（第五版）以及《實驗室生物安全手冊》（第三版）

一、一般準則（用于處理潛在感染材料）

實驗室工作人員應穿戴適當的個人防護裝備（PPE），包括一次性手套、處理潛在感染樣本時的實驗室外套/工作服，并做好眼睛保護。

任何可能產生氣溶膠或飛沫（如振蕩混勻）的操作應在經認證的二級 BSC 中進行。離心時應該用合適的物理容器（如離心機安全吊桶，密封轉子）。理想情況下，轉子和安全吊桶應在 BSC 中裝卸。任何在 BSC 外的操作均應做好眼睛和面部保護（如佩戴護目鏡、口罩、面罩等）或用其他物理屏障（如防濺擋板）做好保護，以使實驗室工作人員的暴露風險降至最低。

樣本處理后，使用合適的消毒劑對工作表面和設備進行消毒處理。應使用 EPA 注冊且有說明對其他呼吸道病原體（如季節性流感和其他人類冠狀病毒）有效的醫用消毒劑。消毒劑的稀釋度（即濃度）、作用時間及操作注意事項均應遵循廠家的說明書。

對于 SARS-CoV-2 實驗室廢棄物的處理，參照其他呼吸道病原體（如季節性流感和其他人類冠狀病毒）相關的標準程序。

二、具體準則

目前不建議在細胞培養物中進行病毒分離及 SARS-CoV-2 樣本培養物中病毒性病原體的初步鑒定。上述工作應在生物安全等級 3（BSL3）實驗室并采用 BSL3 操作流程進行。

以下工作可在 BSL-2 實驗室采用 BSL-2 標準流程進行：

·經福爾馬林固定或其他方式滅活的組織的病理檢查和處理

·所提取的核酸制劑的分子分析

·戊二醛固定的（細胞或組織）的電鏡研究

·細菌和真菌培養的常規檢查

·固定涂片的常規染色及顯微分析

·將樣本運輸至診斷實驗室進行進一步檢測時需要最終包裝。包裝前樣本應放在密封且消毒的主容器里

·滅活的樣本（如核酸提取緩沖液中的樣本）

以下涉及潛在感染樣本的操作至少應按照上述要求，在滿足經認證的 BSL-2 設施的二級 BSC 中進行。同時對現場和項目所特定的風險進行評估，以確定是否有必要根據具體情況加強生物安全預防措施（如測試樣本容量高）。

·樣本分裝和（或）稀釋

·接種細菌或真菌培養基

·進行不涉及病毒性病原體在體內/體外傳播的診斷試驗

·用于顯微分析的樣本涂片制備、化學或加熱固定

三、臨床實驗室檢測

用于常規血液學、尿液分析、臨床化學研究的臨床實驗室和利用血清、血液或尿液樣本進行診斷的微生物實驗室，在處理 COVID-19 潛在感染患者樣本時應遵循標準實驗室操作流程，包括標準預防措施。其他有關信息，請參閱《微生物和生物醫學實驗室生物安全》（BMBL）-第五版（第225 頁）。

四、包裝和運輸

COVID-19 疑似病例或受檢對象的樣本包裝、航運和陸上轉運必須按照最新版的國際航空運輸協會（IATA）危險物品條例進行。

郵寄潛在 COVID-19 感染患者樣本時，應遵循 UN 3373 B 類感染性疾病生物樣本的運輸規定。

五、資源

·包裝清單，見 B 類感染性疾病安全運輸包裝（附件 1）

·B 類生物安全運輸箱（UN3373）的包裝說明 650（https://www.iata.org/en/programs/cargo/dgr/download）

·在“感染性物質”（https://www.iata.org/en/programs/ cargo/dgr/download）可以下載相關包裝說明。

·UN 3373 標簽

·使用冰袋時（附件 2），請提供日常工作時間、聯系人的姓名和電話號碼。該聯系人（可以是 CDC 工作人員）應知曉運輸貨物的內容。把標簽放在運輸包裝盒子的一側，并用透明膠帶完全蓋住標簽（請勿僅粘貼標簽的邊緣）。

·使用干冰時（附件 3），請提供日常工作時間、聯系人的姓名和電話號碼。該聯系人（可以是 CDC 工作人員）應知曉運輸貨物的內容。把標簽放在運輸包裝盒子的一側，并用透明膠帶完全蓋住標簽（請勿僅粘貼標簽的邊緣）。

·包裝示意圖，UN 3373 B 類（附件 4）

附件 1

附件 2

附件 3

附件 4

胡迅，Email：hxxhu99@163.com

2020-03-11

10.3969/j.issn.1673-713X.2020.02.008