胃癌組織中程序性死亡受體-1和程序性死亡-配體1表達與臨床病理特征及預后的相關性

林華隆 虞希祥

(1.溫州醫科大學附屬第三人民醫院腫瘤內科 瑞安 325200；2.溫州醫科大學溫州市第三臨床學院介入血管外科 溫州 325000 )

胃癌為臨床中常見消化系統惡性腫瘤之一，隨著飲食和生活習慣改變、人口老齡化，發病率成顯著升高趨勢。胃癌發生機制較復雜，其中基因變異、免疫功能逃逸為重要發生機制，臨床中通過分析免疫因子在胃癌組織中表達情況，對判定胃癌疾病嚴重程度、預后有重要價值[1]。PD-1在惡性腫瘤免疫逃逸中發生有重要參與作用，PD-1是T細胞介導免疫反應中的重要抑制性免疫檢查點,腫瘤細胞通過表達PD-L1,與腫瘤浸潤淋巴細胞的PD-1結合,誘導淋巴細胞的凋亡,從而抵抗淋巴細胞的殺傷作用,最終造成腫瘤發生免疫逃逸。為探究PD-1和PD-L1與胃癌患者病理特征和預后相關性，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

選取2016年2月～2018年2月我院診治實施手術治療胃癌患者103例臨床資料行回顧性分析。納入標準：(1)患者均行手術治療，術后取胃癌組織、胃癌旁組織行病理檢查；(2)患者臨床資料均收集完成；(3)患者預后均得到隨訪。排除標準：(1)精神疾病、認知功能障礙患者；(2)合并其他系統惡性腫瘤患者，如肺癌、腸癌；(3)合并免疫功能障礙、血液系統疾病、內分泌系統疾病患者；(4)臨床資料收集不完整患者。其中男58例，女45例；年齡45～79歲，平均(61.2±6.5)歲。

1.2 方法

所有患者均實施胃癌根治術，術中取癌病灶組織和癌旁組織行病理檢查，由病理科醫師對組織切片，脫臘、水處理，用過氧化氫對標本進行孵育10min，用PBS緩沖液對標本沖洗3次，將標本放入檸檬酸鹽緩沖溶液，采用微波加熱20min，后放置自然冷卻，再次用PBS緩沖液對標本沖洗3次。在標本上滴加1:200濃度鼠抗人PD-1多克隆抗體和1∶200濃度兔抗人PD-L1多克隆抗體，在4℃恒溫環境中進行孵育，用PBS緩沖液對標本進行沖洗，在標本上滴加PV-6000二抗50ul，在外溫室中孵育20min，用PBS緩沖液對標本進行沖洗3次，在標本上滴加DAB顯示試劑，控制顯示時間為4min，室溫、避光條件下，由醫師在顯微鏡下觀察標本顯示情況，觀察完成后用蒸餾水沖洗，用蘇木精染色1min，水沖洗、返藍，用酒精對標本進行脫水，在中性樹膠封片鏡下進行觀察。如細胞漿或細胞膜中存在棕褐色或黃色顆粒物質為PD-1和PD-L1表達陽性[2]。

1.3 觀察指標

(1)比較癌組織和癌旁組織中PD-1、PD-L1表達陽性率；(2)對患者進行1～3年隨訪，比較死亡和存活患者癌組織中PD-1、PD-L1表達陽性率；(3)比較不同病理分期中PD-1、PD-L1表達陽性率差異。

1.4 統計學方法

此次研究獲得數據用SPSS24.0統計軟件包(由美國SPSS公司提供)分析；PD-1、PD-L1表達陽性率用χ2檢驗。檢驗水準α=0.05。

2 結果

2.1 胃癌組織和胃癌旁組織PD-1、PD-L1表達陽性率

癌組織PD-1和PD-L1表達陽性率顯著高于癌旁組織[40.78% vs.0.00%，63.11% vs.0.97%，P<0.05]，見表1。

表1 胃癌組織和胃癌旁組織PD-1、PD-L1表達陽性率[n(%)]

組別nPD-1PD-L1癌組織10342(40.78)65(63.11)癌旁組織1030(0.00)1(0.97)χ2值-52.756191.3177P值-0.00000.0000

2.2 死亡和存活患者癌組織中PD-1、PD-L1表達陽性率

103例患者術后隨訪1～3年，平均隨訪(2.1±0.3)年，死亡48例，死亡率為46.60%。死亡患者癌組織中PD-1、PD-L1表達陽性率顯著高于存活患者[62.50% vs.21.82%，87.50% vs.43.64%，P<0.05]，見表2。

表2 死亡和存活患者癌組織中PD-1、PD-L1表達陽性率[n(%)]

組別nPD-1PD-L1死亡患者4830(62.50)42(87.50)存活患者5512(21.82)24(43.64)χ2值-17.565613.1593P值-0.00000.0003

2.3 不同病理分期中PD-1表達陽性率

不同分化程度、不同TNM分期PD-1表達陽性率無統計學意義(P>0.05)，見表3。

表3 不同病理分期中PD-1表達陽性率[n(%)]

項目n陽性χ2值P值分化程度低分化2812(42.86)中分化5520(36.36)高分化2010(50.00)0.80120.6699TNM分期I～II5119(37.25)III～IV5223(44.23)0.51880.4713

2.4 不同病理分期中PD-L1表達陽性率

不同分化程度PD-L1表達陽性率無統計學意義(P>0.05)；TNM分期中III～IV期患者PD-L1表達陽性率顯著高于I～II期患者[78.85% vs.29.41%，P<0.05]，見表4。

表4 不同病理分期中PD-L1表達陽性率[n(%)]

項目n陽性χ2值P值分化程度低分化2817(60.71)中分化5527(49.09)高分化2012(60.00)1.32760.5149TNM分期I～II5115(29.41)III～IV5241(78.85)25.36200.0000

3 討論

本研究結果得出，在胃癌組織中PD-1和PD-L1表達陽性率顯著高于癌旁組織(P<0.05)，且在死亡患者中PD-1和PD-L1表達陽性率顯著高于癌旁組織(P<0.05)。證實胃癌中PD-1和PD-L1表達陽性率較高，且PD-1和PD-L1表達情況和患者預后有一定相關性。本研究結果另得出，胃癌TNM分期越高患者，PD-L1表達陽性率越高(P<0.05)，進一步證實PD-L1表達陽性率和腫瘤分期、分級有重要相關性，今后臨床中可通過檢測PD-L1表達陽性率，對胃癌患者疾病嚴重程度、預后輔助進行判定。有學者在胃癌患者病理組織中同樣分析PD-1和PD-L1表達情況和患者預后相關性，同樣證實PD-1和PD-L1表達陽性率越高，患者腫瘤惡性程度越高，預后越差[6]。

綜上所述，胃癌組織中PD-1和PD-L1表達水平較高，PD-L1表達水平和病理特征有一定相關性，PD-1和PD-L1與患者預后有一定相關性。