CKMB活性法和質(zhì)量法檢測(cè)結(jié)果回歸方程建立和臨床應(yīng)用

劉建平 ，熊思憶 ，楊愛(ài)平 ，楊柳

(1.南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科，江西 南昌 330006；2.南昌大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院 14級(jí)，江西 南昌330031；3.蕭山人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，浙江 杭州 311202；4.南昌市第三醫(yī)院病理科，江西 南昌 330003)

CK-MB是CK的同工酶之一,它的主要來(lái)源是心肌，是非常重要的心肌損傷的標(biāo)志物。臨床將CKMB當(dāng)做急性心肌梗死（AMI）的輔助診斷工具，也用在心肌梗塞發(fā)作后血栓溶解治療的監(jiān)控指標(biāo)[1，2]。目前CKMB的檢測(cè)方法主要酶活性法即間接酶免抑制法，得出CKMB活性結(jié)果。這個(gè)方法優(yōu)點(diǎn)是簡(jiǎn)便、快速、經(jīng)濟(jì)、容易實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化，缺點(diǎn)是容易出現(xiàn)一定比例假性升高的結(jié)果、干擾臨床醫(yī)生的判斷[3]。CKMB另一種檢測(cè)方法是質(zhì)量法，它的優(yōu)點(diǎn)是特異性高、準(zhǔn)確度好、抗干擾性強(qiáng)，缺點(diǎn)是試劑相對(duì)昂貴、費(fèi)時(shí)[4]。因此臨床工作中CKMB檢測(cè)以活性法為主,當(dāng)其出現(xiàn)假性升高時(shí)可以進(jìn)行質(zhì)量法檢測(cè)糾正，這樣可以兼顧兩者的優(yōu)點(diǎn)。現(xiàn)對(duì)CKMB活性法和質(zhì)量法檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行l(wèi)ogistics分析得出兩者的回歸方程，并探討其在糾正假性升高CKMB活性法結(jié)果中的應(yīng)用。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來(lái)源 我院2017年體檢健康的正常人25份和確診心肌梗死病人（診斷標(biāo)準(zhǔn)參照2015版急性ST段抬高型心肌梗死診斷和治療指南[5]）的血清標(biāo)本35份，年齡25~86歲，男女標(biāo)本占比相同。我院2017年某周常規(guī)進(jìn)行生化檢測(cè)的臨床標(biāo)本。

1.2 試劑與儀器 上海德賽肌酸激酶MB同工酶測(cè)定試劑盒（速率法）、校準(zhǔn)品及高、低濃度質(zhì)控品;丹麥雷度肌酸激酶MB同工酶測(cè)試卡（時(shí)間分辨免疫熒光法）及定標(biāo)卡和質(zhì)控品。丹麥雷度AQT90 FLEX免疫分析儀、北京白洋臺(tái)式4000A型低速離心機(jī)、日立7600-210全自動(dòng)分析儀。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法 對(duì)臨床常規(guī)樣本采用間接酶免疫抑制法檢測(cè)CKMB，IFCC連續(xù)監(jiān)測(cè)法檢測(cè)CK。對(duì)用于回歸方程建立的體檢健康人和心梗病人血清標(biāo)本同時(shí)采用間接酶免疫抑制法和時(shí)間分辨免疫熒光法檢測(cè)CKMB活性及質(zhì)量。

1.4 數(shù)據(jù)計(jì)算與統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 統(tǒng)計(jì)分析采用SPSS19.0軟件，相關(guān)回歸方程建立采用logistics回歸，R2>0.9兩者顯著相關(guān)。計(jì)數(shù)資料以百分率表示；計(jì)量資料以（x±s）表示、組間比較采用 t檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.1 CKMB活性法和質(zhì)量法檢測(cè)結(jié)果回歸方程以X軸為質(zhì)量法結(jié)果，Y軸為酶活性結(jié)果，經(jīng)過(guò)logistics回歸得出方程Y=0.0263X3-1.0666X2+11.724X-18.747（X>2以上適用，因?yàn)橘|(zhì)量法結(jié)果檢測(cè)下限為2），R2>0.9，兩者顯著相關(guān)。見(jiàn)圖1。

圖1 CKMB活性法和質(zhì)量法檢測(cè)結(jié)果回歸方程

2.2 CKMB活性法工作量及假性升高比例 我院一周CKMB的活性法總工作量是1883測(cè)試數(shù)，其中出現(xiàn)CKMB>0.3CK的標(biāo)本數(shù)為220,所占比率為11.2%。CK-MB>CK活性的次數(shù)為66,比率為3.5 05%。出現(xiàn)危急值異常CK-MB＞CK＞50μ/L的標(biāo)本數(shù)為18，所占的比率為0.96%。見(jiàn)表 1。

表1 我院一周CKMB活性法檢測(cè)數(shù)及假性升高比例

2.3 假性升高CKMB活性法危急值與回歸方程糾正值比較 假性升高CKMB活性法危急值結(jié)果與經(jīng)質(zhì)量法檢測(cè)再經(jīng)過(guò)兩者回歸方程糾正換算得出活性結(jié)果比較，P<0.05差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見(jiàn)表2。

表2 假性升高CKMB活性法結(jié)果與回歸方程糾正出結(jié)果比較

3 討論

CK為二聚體結(jié)構(gòu)，主要分布在各種肌肉組織中和腦組織。 CK由M和B兩個(gè)亞基構(gòu)成,可以組成 3種同工酶，即CKMM、CKMB和CKBB[6,7]。CKMM主要存在于骨骼肌中。CKMB唯一含量豐富的器官是心肌。CKMB是心肌梗死較有價(jià)值的指標(biāo)[8]。血清CKMB活性水平在AMI發(fā)病后4~6h出現(xiàn)增高，9~24h即可達(dá)到峰值，在48~72h恢復(fù)正常。CKMB活性可以用于AMI的診斷，估計(jì)梗死范圍和判斷再梗死[9]。另外AMI患者在溶栓治療后出現(xiàn)的再灌注使得血清CK，CKMB活性升高，導(dǎo)致CK，CKMB峰值時(shí)間的提前，據(jù)此可以判斷溶栓治療后的再灌注情況[10]。CKBB主要存在平滑肌組織中，例如大腦、前列腺、肺、胃腸道[11]。CKBB在正常人血清中含量極微，可忽略不計(jì)。

CK和CKMB是目前臨床上常用的指標(biāo)，它們主要用于肌肉損傷和心肌損傷疾病鑒別和診斷[12],其中CKMB在心肌梗死等心肌損傷疾病中的診斷和治療監(jiān)測(cè)價(jià)值較大[13,14]。目前臨床上常規(guī)設(shè)有C KMB危急值,我院CKMB活性檢測(cè)結(jié)果大于50 U/L為危急值。當(dāng)CKMB檢測(cè)結(jié)果達(dá)到危急值時(shí)，臨床醫(yī)生需要立即處理。CK和CKMB常常聯(lián)合檢測(cè)應(yīng)用，檢驗(yàn)和臨床醫(yī)生可以通過(guò)CK，CKMB的值或者結(jié)合兩者比值判斷病情[15]。CKMB常用的檢測(cè)方法采用的是活性法即間接酶免疫抑制法檢測(cè)CKMB活性。它的原理是通過(guò)抗CK-M亞基抗體抑制M亞基活性檢測(cè)B亞基活性,因正常人血清中CKBB含量極微可忽略不計(jì),故所測(cè)結(jié)果乘2即可大致反映血液CKMB的活性。CKMB間接酶免疫抑制法檢測(cè)在各級(jí)醫(yī)院應(yīng)用非常普遍,因其對(duì)儀器要求不高適合自動(dòng)化,且經(jīng)濟(jì)，快速。但CKMB間接酶免疫抑制法存在一定比例的假性升高結(jié)果干擾臨床醫(yī)生對(duì)疾病的判斷[16]。

由于CKMB組織學(xué)分布特點(diǎn)，CKMB不會(huì)超過(guò)CK的30%。大型三甲醫(yī)院由于工作量大，實(shí)際遇到CK-MB/CK>30%的結(jié)果也不少。有學(xué)者將CK-MB/CK>30%的 256例病歷進(jìn)行病因?qū)W分析[17]，只有百分之八左右可以經(jīng)過(guò)心電圖、超聲影像等其它檢查確診有心肌損傷的疾病。CKMB活性假性升高常見(jiàn)于惡性腫瘤、神經(jīng)系統(tǒng)或嚴(yán)重肺、胃腸道平滑肌損傷的疾病[18,19]。目前關(guān)于如何糾正CKMB>30%CK假性升高現(xiàn)象及必要性還沒(méi)有一個(gè)定論。因此本研究調(diào)查分析了我院臨床實(shí)際工作中遇到假性升高CKMB活性法結(jié)果及建立活性法和質(zhì)量法檢測(cè)結(jié)果回歸方程的臨床應(yīng)用。通過(guò)調(diào)查分析發(fā)現(xiàn)我院臨床一周CKMB活性檢測(cè)數(shù)1883，其中CKMB>0.3CK占比11.2%，CKMB>CK占比3.5%，對(duì)臨床診療影響較大的CKMB>CK>50μ/L占比0.96%。如果CKMB和CK值都在正常參考范圍之內(nèi),兩者之間比例異常對(duì)臨床影響較小。在CKMB質(zhì)量法檢測(cè)出現(xiàn)之前，出現(xiàn)CKMB>CK>50μ/L結(jié)果常使臨床工作者感到困惑和棘手。因我們較難判斷CKMB＞CK＞50μ/L是否是一個(gè)真危急值。當(dāng)然臨床上可以通過(guò)影像、B超、心電圖、肌鈣蛋白檢測(cè)或者臨床癥狀等最終判斷病人是不是存在嚴(yán)重的心肌損傷疾病[20]。如直接將可疑的CKMB＞50μ/L酶活性結(jié)果危急值報(bào)送給臨床,那么出現(xiàn)臨床不符合的時(shí)候臨床醫(yī)生需要進(jìn)一步采取一系列檢查或者治療來(lái)確診是不是存在嚴(yán)重的心肌損傷。所以糾正假性升高CKMB活性法結(jié)果特別是假性升高的危急值，可以幫助臨床醫(yī)生精確診斷治療、減少一系列不必要的檢查、降低病人的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。本研究中,我們建立了CKMB活性法和質(zhì)量法結(jié)果回歸方程，R2＞0.9，兩者顯著相關(guān)。我們選取臨床工作中出現(xiàn)假性升高CKMB活性結(jié)果標(biāo)本進(jìn)行質(zhì)量法檢測(cè),再將質(zhì)量法檢測(cè)結(jié)果經(jīng)兩者回歸方程計(jì)算得出糾正后的接近真實(shí)CKMB活性結(jié)果。糾正后的CKMB活性結(jié)果與糾正前結(jié)果比較，P＜0.05、兩者之間有顯著差異,說(shuō)明應(yīng)用兩者回歸方程可以有效糾正假性升高CKMB活性法結(jié)果。

綜上所述，CKMB是診斷心肌損傷的重要指標(biāo)。目前CKMB活性法存在檢測(cè)結(jié)果假性升高的可能，但由于其快速方便經(jīng)濟(jì)等原因還暫時(shí)不能被CKMB質(zhì)量法取代。在各大醫(yī)院，每天用于篩查心肌損傷的CKMB活性檢測(cè)數(shù)量多,累積出現(xiàn)假性升高結(jié)果的次數(shù)和概率相對(duì)較多。當(dāng)出現(xiàn)假性升高CKMB活性結(jié)果時(shí),特別是明顯影響臨床判斷的假性升高危急值有必要予以糾正。建立CKMB活性法和質(zhì)量法檢測(cè)結(jié)果回歸方程有助于這類假性升高活性法結(jié)果的糾正。