陳美紅,何雯娟,丘麗萍
(福建省立金山醫院 福建省立醫院南院檢驗科,福建 福州 350028)
精液常規分析是一項評估男性生育能力、提供不育癥診斷和療效觀察的重要依據,在臨床中越來越被重視[1-3]。人工顯微鏡分析方法是傳統的檢測方法,但手工分析檢測項目有限,不能很好地滿足臨床需求,且由于檢驗人員的主觀性,缺少量化的判斷指標,重復性較差,差異較大[4]。隨著標本量的增加,工作量大,效率低,不宜大批量作業,給臨床男性不育癥的診治和科研工作帶來一定的困難。隨著檢測技術的不斷提高,計算機在醫學領域的廣泛應用,計算機輔助分析精液質量逐步應用于男性不育癥的檢測中[5]。目前,我院引進了一臺上海BEION S3全自動精子質量分析儀,通過對精子圖像的分析,記錄精子的運動軌跡,獲得標本的精子濃度、精子存活率和精子總活力等數據,并輔助檢驗人員進行精子形態學統計,具有準確、客觀、快速等優點[6]。本文通過對BEION S3全自動精子質量分析儀與人工顯微鏡法檢測的主要參數進行比較分析,探討BEION S3全自動精子質量分析儀的臨床實用性[7]。
1.1 標本來源 取自2017年1月至2017年10月本院泌尿外科門診患者的精液,年齡25~45歲,平均年齡(33±5)歲,除去無精癥患者和無活動精子標本,隨機抽取210例精液標本分別同時用BEION S 3全自動精子質量分析儀和人工顯微鏡進行檢測。
1.2 儀器與試劑 上海BEION S3全自動精子質量分析儀;儀器配套一次性精子計數板;日本奧林巴斯CKX53倒置相差顯微鏡;人工檢測用Makler精子計數板。
1.3 方法
1.3.1 標本的采集 患者禁欲3~7d后,用手淫法(不能使用避孕套)將一次性射出的精液直接排入廣口有刻度的精液容器內,立即送檢,置于37℃溫箱內溫育 30~60min,待精液液化后檢測[8,9]。
1.3.2 人工顯微鏡分析 待精液液化后嚴格按照《全國臨床檢驗操作規程》的標準和方法進行分析[10]。
1.3.3 BEION S3全自動精子質量分析儀分析 同一份標本同步嚴格按照BEION S3全自動精子質量分析儀操作手冊進行分析。
1.3.4 重復性分析 以顯微鏡測定的精子濃度為標準,選取檢測結果從低到高的4份標本,在BEION S3全自動精子質量分析儀上分別重復計數5次,計算均值、標準差和變異系數。
1.3.5 統計學分析 采用SPSS22.0軟件進行數據處理與統計學分析。各檢測指標以均數±標準差(x±s)表示。兩種方法檢測結果的相關性用散點圖和回歸方程表示。采用wilcoxon秩和檢驗對兩種方法的檢測結果進行統計學分析。以α=0.05為檢驗水準,P<0.05差異有統計學意義。
2.1 兩種方法測定結果的相關性分析 分別以人工顯微鏡法檢測的精子濃度、精子存活率和精子總活力的結果為X軸,以BEION S3全自動精子質量分析儀的結果為Y值,將所有結果作散點圖,進行相關性分析[11]。得出相關系數r分別為0.996,0.967,0.983,P 值均<0.05,見圖 1、圖 2、圖 3,結果表明二者相關性良好。

圖1 BEION S3全自動精子質量分析儀與顯微鏡精子濃度相關性分析

圖2 BEION S3全自動精子質量分析儀與顯微鏡精子存活率相關性分析
2.2 兩種方法測定結果的比較分析 兩者測定結果比較P值均>0.05,差異無統計學意義,見表1。
2.3 重復性
2.3.1 標本分組 按照顯微鏡檢測得出的精子濃度對標本進行分組。其中,精子濃度在分組(20~100)×106/ml之間標本例數最多。見表2。

圖3 BEION S3全自動精子質量分析儀與顯微鏡精子總活力相關性分析

表1 BEION S3全自動精子質量分析儀與人工顯微鏡檢測結果的比較

表2 精子濃度分組
2.3.2 重復性分析 在各濃度分組內分別隨機選取一份標本在BEION S3全自動精子質量分析儀上重復測定5次,精子濃度、精子存活率和精子總活力的重復性均良好,CV均小于15%,見表3。
目前,男性不育診斷、治療和研究的一項基本檢查是精液分析,而計算機精液分析儀正逐步廣泛地應用于臨床。評估男性生育能力的重要參考指標是精子濃度、精子存活率和A+B級精子總活力,其檢測結果的質量保證與臨床效果息息相關[12]。傳統的人工顯微鏡分析方法因檢測者的經驗不同及技術水平差異等人為因素,難以標準化,給臨床和研究帶來不利影響[13]。如今,隨著臨床標本量的增多,操作繁瑣,工作量大,人工顯微鏡法逐步被計算機精液分析儀代替。近年來,國內外研制的采用電-光學設計且可定量評估男性精液的計算機精液質量分析儀,能更好地服務于臨床[14]。

表3 BEION S3全自動精子質量分析儀的重復性分析
本文結果表明,BEION S3全自動精子質量分析儀檢測的主要參考指標精子濃度、精子存活率、精子總活力的結果CV均小于15%,有較好的重復性,避免了精液常規分析因技術人員水平和實驗室條件等原因造成的誤差。通過對比分析BEION S3全自動精子質量分析儀與人工顯微鏡分析法的結果,差異無統計學意義(P>0.05),說明兩者具有良好的一致性[15]。但是,計算機精液分析儀測定精子濃度的準確性和精子總活力受精液中細胞成分和非精子顆粒物質的影響。而且計算機精液分析儀分析精子形態特征,只能按精子頭部大小來定,導致計算機精液分析儀精子濃度計數偏高、畸形率偏低的不足[16]。然而,BEION S3全自動精子質量分析儀具有人工修正的功能,可降低該誤差。且在精子濃度大于200×106/ml時,可進行手工稀釋上機檢測,按稀釋比例換算檢測結果,使檢測結果具有更好的準確性和客觀性,為臨床和研究提供了更為科學的依據。
綜上所述,BEION S3全自動精子質量分析儀能客觀反映精液質量與生育能力的情況,且能實現分析過程的自動化控制,操作簡便快速、直觀實用,提高了實驗室的診斷水平,是值得在臨床上推廣使用的。