抗感敗毒口服液對靶動物雞的安全性試驗

馮文麗，劉升，呂鳳霞，劉聯盟，岳旭龍，郝小倩，舒剛

（1.河南牧翔動物藥業有限公司鄭州 451162；2.四川農業大學動物醫學院成都 611130）

抗感敗毒口服液由黃芩、梔子、板藍根、連翹、綿馬貫眾和野菊花依據傳統中獸醫理論組方而成，黃芩清肺經實火，燥濕涼血；梔子通瀉三焦實熱，涼血解毒共為主藥；連翹疏風散熱，解毒散結；貫眾清氣分實熱，涼血止血共為臣藥；板藍根，野菊花清熱解毒，涼血利咽止痛，共為佐使。全方合用，共奏疏風散熱，清熱解毒之效。該制劑具有清熱解毒，用于雞外感發熱[1]，癥見體溫升高、精神萎靡、羽毛蓬松、呼吸困難伴有咳嗽等。為了評價該制劑在臨床使用的安全性及安全劑量范圍，本試驗根據農業部第1596號公告《獸用中藥、天然藥物臨床試驗技術指導原則》[2]中靶動物安全試驗的要求考察抗感敗毒口服液的安全性，旨在為臨床應用提供數據資料。

1 材料

1.1 試驗動物

80只健康雛雞，體重80±5g，購自雅安鳳茗谷禽類養殖專業合作社。

1.2 受試藥物

抗感敗毒口服液，河南牧翔動物藥業有限公司生產，批號：20180601，規格：每1mL相當于原生藥量為1.49g。

1.3 儀器設備

AU5800全自動生化分析儀，購自美國貝克曼庫爾特公司；SQP型電子天平，購自賽多利斯公司；LEICA RM2025型組織切片機，購自德國Leica公司。

2 方法

2.1 試驗動物分組及給藥

將80只雞隨機分為4組，每組20只，分別為抗感敗毒口服液高、中、低劑量組和空白對照組。其中高劑量組為臨床推薦劑量的5倍量（5.0mL/L·天），中劑量組為臨床推薦劑量的3倍量（3.0mL/L·天），低劑量組為臨床推薦劑量的1倍量（1.0mL/L·天）；飲水給藥，連續30d；空白對照組不給藥，自由飲水與采食。

2.2 觀察及檢查指標

1）一般臨床觀察：試驗期間每天觀察各組試驗雞的精神狀態、采食量等情況，并記錄死亡情況及其他異常。如果出現死亡，對死亡試驗雞進行病理剖檢和組織學檢查。

2）平均增重：試驗前及試驗結束時逐只稱重，計算各組增重情況，以此考察本品對雞生長性能的影響。

3）血液學和血液生化學檢查：試驗結束后采集試驗雞血樣進行血常規檢查，進行紅細胞總數（RBC）、白細胞總數（WBC）、白細胞分類計數、血紅蛋白（HGB）等指標的測定。紅細胞和白細胞采用血細胞計數法測定。并進行血液生化檢查，用全自動生化分析儀測定血清中谷丙轉氨酶（ALT）、谷草轉氨酶（AST）、白蛋白（ALB）、總蛋白（TP）、總膽紅素（TBiL）、血糖（GLU）、尿素（UREA）、肌酐（Crea）指標。

4）臟器指數：試驗結束后，每組隨機撲殺10只雞，收集心、肝、脾、肺、腎等組織，稱重后計算臟器指數。臟器指數=器官鮮重（g）/活體重（g）×100%。

5）組織病理檢查：給藥及觀察結束后，各組隨機抽取10只雞進行剖檢，觀察心、肝、脾、肺、腎等臟器是否出現裸眼病變；如有裸眼病變則做組織石蠟切片，作進一步微觀病變鏡檢。

2.3 數據處理

采用SPSS18.0軟件對試驗數據進行統計分析，試驗數據以“平均數±標準差”表示，組間數據差異性采用單因素方差分析。

3 結果與分析

3.1 抗感敗毒口服液對雛雞臨床表現的影響

試驗期間，各給藥試驗組與空白對照組雞精神狀態均良好，采食飲水正常，糞便沒有發生明顯異常變化，各組無死亡情況發生。

3.2 抗感敗毒口服液對體重的影響

給藥前和給藥后分別稱量各組試驗雞體重，根據試驗數據可知，高、中、低給藥劑量組與空白對照組相比，給藥30d后體重增重差異性不顯著（P＞0.05），由此可見，抗感敗毒口服液對雞生長性能不會產生負面作用。

表1 抗感敗毒口服液對雞體重的影響

3.3 抗感敗毒口服液對血液生理指標的影響

不同劑量組及空白對照組分別在給藥后30d后采血測定各項血常規指標值，根據試驗數據得知，紅細胞（RBC）、血紅蛋白（HGB）、白細胞（WBC）、淋巴細胞百分率（Ly）、中性粒細胞百分率（NEU）、單核細胞百分率（Mn）與空白對照組無顯著差異（P＞0.05）。這表明，試驗后各組雞的各項血常規指標正常，至少5倍劑量的抗感敗毒口服液給藥30d不會引起雞血液生理指標異常。

3.4 抗感敗毒口服液對雞血液生化指標的影響

通過對試驗雞血清生化指標測定，各劑量組與空白對照組在谷丙轉氨酶（ALT）、谷草轉氨酶（AST）、總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、血清總膽紅素（Tbil）、血糖（Glu）等多項指標上對比，均未有顯著性差異（P＞0.05）。這表明，至少5倍劑量的抗感敗毒口服液連續給藥30d不會引起雞血液生化指標異常。

表2 給藥后血液生理指標

表3 給藥后血液生化指標

3.5 抗感敗毒口服液對臟器指數的影響

給藥后各組雞的臟器指數變化見表4。從表中可以看出，給藥組雞的心、肝、脾、腎的臟器指數與空白對照組無顯著差異（P＞0.05）。這表明抗感敗毒口服液對雞臟器的生長無明顯影響。

表4 給藥后雞臟器指數的變化

3.6 抗感敗毒口服液對雞重要器官病理組織學的影響

經過剖檢，各組雞經肉眼觀察內臟器官未見明顯病理變化，大小、組織形態、顏色均未見明顯異常改變。組織病理學切片檢查表明，高劑量組雞的心、肝、脾和腎均未發現明顯病理學變化。心肌纖維致密，相互連結成網狀；肝臟中央靜脈明顯，肝細胞以中央靜脈為軸心呈放射狀，有不規則的竇狀隙；脾臟脾竇和小靜脈結構明顯，淋巴細胞均勻分布；腎臟組織中腎小管密集，腎小體、遠曲小管和近曲小管結構完整。表明至少5倍劑量抗感敗毒口服液不會造成雞實質性器官的病理損傷，具體見圖1。

圖1 病理組織切片

4 討論

抗感敗毒口服液由黃芩、梔子、板藍根、連翹、綿馬貫眾和野菊花組方而成，這幾味中藥材均被臨床廣泛應用。王永彬等[3]研究表明長期服用板黃口服液無毒副作用。徐春燕等[4]研究銀翹藍芩口服液對靶動物雞是安全的。賈興等[5]研究表明長期服用復方芩藍口服液無不良作用。段夢迪等[6]對抗感敗毒口服液對大鼠的生長和血液理化指標的影響進行研究，結果表明長期應用抗感敗毒口服液對大鼠生長和血液理化指標無顯著影響，臨床用藥安全。本試驗對投喂抗感敗毒口服液推薦劑量1、3、5倍劑量的受試雞進行了安全性研究和評估。從試驗結果可以看出，使用抗感敗毒口服液推薦劑量1～5倍劑量的受試雞均未出現明顯的臨床癥狀，血液生理和血液生化指標等參數與空白對照組相比也無顯著差異。病理組織學觀察顯示，高劑量組心臟、肝臟、腎臟等實質臟器均未出現明顯的病理組織學變化。由此可以說明，抗感敗毒口服液按推薦劑量（1mL/L）飲水給藥對靶動物雞是安全的。