張延智 吳金洪 繆菊連 陳旭冰,2*
1.大理大學藥學與化學學院,云南 大理 671000;2.云南省昆蟲生物醫藥研發重點實驗室,云南 大理 671000
胡蜂是膜翅目細腰亞目中胡蜂總科昆蟲的統稱,世界上已發現的胡蜂有5000多種,我國發現的有200余種[1]。《本草綱目》、《本草綱目彩色藥圖》記載,胡蜂性狀甘、涼、有小毒,主治心腹脹滿痛、干嘔、輕身益氣、祛風、解毒,治雀斑面瘡[2-3]。現代研究發現,胡蜂發揮藥理作用的物質基礎主要是蜂毒多肽(來自黑尾胡蜂、蜜蜂或人工合成),蜂毒多肽具有抗腫瘤[4-6]、抗菌[7]、抗炎[8]的作用,蜂毒多肽還可以用來治療動脈粥樣硬化[9-10]和帕金森病[11-12]。其中黃腳胡蜂主要分布在云貴川,是養殖較多的一種胡蜂,不僅有較高的食用價值,也有較高的藥用價值,云南民間常將黃腳胡蜂用酒浸泡后取其提取物治療關節炎,文獻也報道,蜂毒可以治療佐劑性關節炎和類風濕性關節炎[13-15]。為了研究黃腳胡蜂提取物治療關節炎的物質基礎是蜂毒還是其他成分,本實驗對黃腳胡蜂的脂溶性成分進行檢測。
1.1 材料 黃腳胡蜂(Vespa velutina)樣品收集于云南省大理市,經我院楊自忠教授鑒定為膜翅目細腰亞目胡蜂科的黃腳胡蜂。乙醇、乙酸乙酯和無水碳酸鈉均為國產分析純。
1.2 儀器 7890A /5975C氣相色譜-質譜聯用儀 (美國Agilent Technologies公司) 。
2.1 樣品的制備 將黃腳胡蜂100 g置于300 mL50%乙醇溶液中,室溫下浸漬提取30 d,將提取物于30℃下減壓蒸餾至無醇味后,用50 mL乙酸乙酯萃取,萃取物中加入少許無水碳酸鈉進行干燥,測定前用微孔濾膜過濾,備用。
2.2 GC-MS分析條件 色譜柱: Agilent氣相色譜柱 (Agilent 19091S-433,30 m×250 μm×0. 25 μm) ;程序升溫:起始溫度為70℃,保持3 min,以8℃ /min升至170℃,再以1℃ /min升至220℃,最后以8℃ /min升至300℃。質譜條件:載氣為高純氦氣,流速:1. 0 mL /min;分流比:10∶1;進樣量1. 0 μL。EI 離子源,離子源溫度230℃,電離能量 70eV;掃描質量范圍:50~550 amu。采用 NIST11. L 標準譜圖庫進行檢索。
2.3 實驗結果 利用上述GC-MS條件進行分析,得到黃腳胡蜂脂溶性成分的總離子流色譜圖,如圖1所示。所得各組分的質譜數據經NIST11. L 標準譜圖庫及人工譜圖解析,確定其化學成分,各成分的相對百分含量采用峰面積歸一化法進行計算,結果見表1。
從黃腳胡蜂脂溶性成分中共檢測出18個峰,鑒定了12個化合物,其主要成分為油酸乙酯 (57.82%)、亞油酸乙酯(11.76%)、棕櫚酸乙酯 (8.32%)、苯乙醇 (8.08%)、丁二酸二乙酯 (3.48%)。在已鑒定的組分中,酯類占58.33%,烷烴占25.00%,醇類占16.67%。

表1 黃腳胡蜂脂溶性成分

實驗結果表明,黃腳胡蜂脂溶性成分主要是酯、烷烴和醇等物質。含量較高的亞油酸乙酯和棕櫚酸乙酯具有抗炎的作用[16-17],這與云南民間將黃腳胡蜂用酒浸泡后用來治療佐劑性關節炎和類風濕性關節炎相一致,為民間的用法提供了理論依據。而文獻報道蜂毒可以治療關節炎[8],而民間廣泛使用的黃腳胡蜂提取物治療關節炎,究竟是其中的蜂毒發揮作用還是蜂毒與其他成分(例如亞油酸乙酯和棕櫚酸乙酯)協同作用的結果還需進一步研究。