ICSI在體外助孕Half-ICSI治療中的有效性和安全性評估

陳海霞 白曉紅

摘要：目的 ?評估ICSI顯微操作技術在體外助孕Half-ICSI治療中的有效性。方法 ?回顧性分析2007年4月～2018年12月于我院接受Half-ICSI治療的不孕患者中213例周期，同一患者卵子分為兩組分別采用IVF和ICSI兩種受精方式，比較IVF組和ICSI組的受精情況、胚胎發育潛能、臨床妊娠結局及出生缺陷。結果 ?納入研究的213個取卵周期共獲卵4374枚，平均獲卵（19.97±7.53）枚，2159枚卵行IVF，2215枚卵行ICSI，其中成熟卵1840枚。Half-ICSI治療中，ICSI組的正常受精率（74.62%）高于IVF組（68.18%）（P<0.05）;兩組間卵裂率，優胚率，每周期優質胚胎數比較，差異無統計學意義（P>0.05），ICSI組異常受精率（1PN率2.28%，3PN率2.23%）低于IVF組（1PN率3.84%，3PN率8.31%）（P<0.05）。兩組種植率、出生缺陷率、累積妊娠率、累積活產率、流產率比較，差異無統計學意義（P>0.05）;兩組活產單胎、活產雙胎的體重比較，差異無統計學意義（P>0.05）。結論 ?在Half-ICSI治療中，ICSI可獲得較為滿意的受精結局，但臨床妊娠結局無明顯改善。

關鍵詞：體外受精-胚胎移植;Half-ICSI;卵子;臨床結局;出生缺陷

中圖分類號：R714 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 文獻標識碼：A ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?DOI：10.3969/j.issn.1006-1959.2020.05.022

文章編號：1006-1959（2020）05-0074-03

Abstract：Objective ?To evaluate the effectiveness of ICSI micromanipulation technology in Half-ICSI in vitro fertility treatment. Methods ?A retrospective analysis of 213 cycles of infertility patients who were treated with Half-ICSI in our hospital from April 2007 to December 2018. The eggs of the same patient were divided into two groups using IVF and ICSI respectively.The fertilization status， embryo development potential， clinical pregnancy outcomes and birth defects were compared between the IVF and ICSI groups. Results ?A total of 4374 eggs were obtained from the 213 egg retrieval cycles included in the study， with an average of （19.97±7.53） eggs， 2159 eggs lined IVF， 2215 eggs lined ICSI， of which 1，840 mature eggs. In Half-ICSI treatment， the normal fertilization rate of ICSI group （74.62%） was higher than that of IVF group （68.18%）（P<0.05）. There was no difference in cleavage rate， superior embryo rate， and number of high-quality embryos per cycle between the two groups（P>0.05）. The abnormal fertilization rate （1PN rate 2.28%， 3PN rate 2.23%） in the ICSI group was lower than that in the IVF group （1PN rate 3.84%， 3PN rate 8.31%）（P<0.05）. There was no significant difference in implantation rate， birth defect rate， cumulative pregnancy rate， cumulative live birth rate， and miscarriage rate between the two groups（P>0.05）.There was no significant difference in body weight between single and twin births between the two groups（P> 0.05）.Conclusion ?In Half-ICSI treatment， ICSI can obtain satisfactory fertilization outcomes， but clinical pregnancy outcomes have not improved significantly.

Key words：In vitro fertilization-embryo transfer;Half-ICSI;Eggs;Clinical outcome;Birth defect

ICSI技術自1992年被提出并成功用于男性不育癥，使該病治療有了較大突破[1]，此后逐漸擴展用于體外受精（IVF）周期失敗、受精低下等方面，逐漸成為輔助生殖技術領域中的主要組成部分。原發不孕時間較長（≥5年），不明原因不孕或僅有輕度弱精子癥的患者可能存在精卵結合障礙[2]，因此根據取卵日獲卵數情況建議采用Half-ICSI受精方式[3]。但ICSI的選擇指征尚不明確，常規IVF受精方式可能存在受精失敗的風險，受精一旦失敗，患者可能因無可移植胚胎而被迫放棄周期，精神壓力較大。ICSI顯微操作技術屬于一項侵入性操作，其有效性和安全性目前尚無統一定論。本研究結合我中心接受Half-ICSI治療的患者臨床資料，分析這兩種方式受精情況、臨床妊娠和出生缺陷等，評估實行ICSI顯微操作技術在Half-ICSI治療中的有效性和安全性，現報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料 ?選擇2007年4月～2018年12月天津醫科大學總醫院婦產科生殖醫學中心接受輔助生殖助孕治療行Half-ICSI受精方式的患者312例，納入患者均為原發不孕5年以上不明原因性不孕，排除受精率小于60的99個周期，剩余213個取卵周期。

1.2方法

1.2.1促排方案 ?根據患者基礎性激素、卵巢竇卵泡數等病情制定個性化促排方案，包括長方案、短方案、拮抗劑方案。當主導卵泡直徑1個≥18 mm或者3個≥17 mm時，當天予以HCG 5000～10000 IU板機，扳機后36～38 h取卵。

1.2.2受精方案 ?每位患者所獲卵子隨機分為2部分，其中IVF組2159枚，ICSI組2215枚。IVF方案：采用過夜受精，ICSI方案：取卵后2 h后，用透明質酸酶去除顆粒細胞，以第一極體是否排出判定是否為成熟卵，進行單精子顯微操作，次日觀察受精情況。

1.3胚胎評分以及移植 ?根據伊斯坦布爾共識對胚胎進行形態學評分，取卵后第2天或第3天選取優質胚胎進行移植或者冷凍。在新鮮周期中，將評估符合移植條件者進行新鮮胚胎移植，如果有嚴重的卵巢過度刺激綜合征、內膜厚度太薄、子宮內膜容受性差、促排方案不適合新鮮移植，則將胚胎冷凍，在下1個解凍周期中，將胚胎解凍，進行胚胎移植。在1個移植周期中優先選擇IVF來源胚胎進行移植，在IVF無可移植胚胎的情況下選擇移植ICSI來源的胚胎。

1.4統計學分析 ?采用SPSS 23.0統計軟件進行統計學處理，計數資料以[n（%）]表示，組間比較采用？字2檢驗;計量資料采用（x±s），比較采用t檢驗。P<0.05為差異有統計學意義。

2結果

2.1兩組實驗室指標比較 ?納入研究的213個取卵周期共獲卵4374枚，平均獲卵（19.97±7.53）枚，其中成熟卵1840枚。IVF組和ICSI組在受精率、正常受精率、1PN率、3PN率比較，差異有統計學意義（P<0.05）;兩組間卵裂率，優質胚胎率，優質胚胎數比較，差異無統計學意義（P>0.05），見表1。

2.2 兩組新鮮移植周期中妊娠結局分析 ?IVF組和ICSI組的種植率、臨床妊娠率、活產率、流產率、活產單胎及活產雙胎的體重比較，差異無統計學意義（P>0.05），見表2。

2.3 兩組新鮮加解凍移植周期中妊娠結局分析 ?IVF組累積移植周期242例，ICSI組累積移植周期83例。IVF組和ICSI組累積妊娠率、累積活產率、流產率比較，差異無統計學意義（P>0.05），見表3。

3討論

ICSI技術避開了受精和精子選擇所需要的自然步驟如精子透明帶結合及卵黃膜的融合與穿透，對于男性因素不孕有明顯的治療效果，應用范圍包括臨界精液質量、常規IVF受精失敗、不明原因不孕及非男性因素不孕等多個方面，但其在顯微操作過程中有可能損傷細胞骨架或紡錘體或人為的不適當精子優選，外源物質及污染物的侵入等[4]。因此ICSI技術的和有效性和安全性是臨床關注的熱點。

本研究中213例行Half-ICSI的不孕患者，同一患者的卵母細胞分配到IVF組和ICSI組兩個治療組。每個患者以自身為對照，從而減少女方年齡、卵巢刺激方案選擇、卵母細胞質量和精子質量及實驗室環境等因素影響。研究顯示[5]，ICSI正常受精率高于IVF，異常受精率降低，ICSI保證較高的受精率同時顯著的降低多精受精率的發生。本研究中ICSI組的正常受精率（74.62%）高于IVF組（68.18%），異常受精率（1PN率2.28%，3PN率2.23%）低于IVF組（1PN率3.84%，3PN率8.31%）（P<0.05）。ICSI操作需對卵母細胞裸化后進行成熟度評估，只有成熟的卵母細胞才進行顯微操作，而IVF則是所有卵子均進行常規過夜受精，次日觀察受精情況，這種選擇偏移可能是導致ICSI受精率高的原因之一。ICSI操作是直接將單根精子注射到卵母細胞中，理論上避免了多精受精的發生，從而降低異常受精率。

本研究中兩組在種植率、卵裂率、優胚率、妊娠率、活產率、累積妊娠率、累積活產率、出生缺陷例比較，差異無統計學意義（P>0.05），說明ICSI對卵母細胞受精、胚胎發育潛能、臨床妊娠結局及出生缺陷與IVF相比并無明顯差異，與Foong SC等[6]報道結果一致。Bonduelle M等[7]對2995例IVF和2889例ICSI出生的孩子進行隨訪顯示，ICSI并未增加出生嬰兒畸形風險。另有研究顯示[8]，IVF和ICSI出生的2周歲左右的兒童在發育方面無明顯差異。但Catford SR等[9]的研究表明行ICSI的兒童發生自閉癥和智力受損的風險可能會增加。本研究中對出生半年以后的孩子通過電話隨訪未發現出生后代缺陷的發生，但本研究樣本量比較小并且隨訪僅追蹤到出生階段，仍需進一步長期隨訪研究觀察ICSI對胚胎的潛在影響及ICSI來源的后代是否出生缺陷。

總之，Half-ICSI治療中，ICSI顯微操作較IVF可獲得較為滿意的受精結局，但臨床妊娠結局無明顯改善。本研究對研究對象均來自本中心且納入研究周期數少，有待進一步多中心、大樣本的研究。

參考文獻：

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[6]Foong SC，Fleetham JA，O'Keane JA，et al.A prospective randomized trial of conventional in vitro fertilization versus intracytoplasmic sperm injection in unexplained infertility[J].Journal of Assisted Reproduction and Genetics，2006，23（3）：137-140.

[7]Bonduelle M，Liebaers I，Deketelaere V，et al.Neonatal data on a cohort of 2889 infants born after ICSI （1991-1999） and of 2995 infants born after IVF （1983-1999）[J].Human Reproduction，2002，17（3）： 671-694.

[8]Zheng Z，Chen L，Yang T，et al.Multiple pregnancies achieved with IVF/ICSI and risk of specific congenital malformations： a meta-analysis of cohort studies[J].Reprod Biomed Online，2018，36（4）：472-482.

[9]Catford SR，McLachlan RI，O'Bryan MK，et al.Long-term follow-up of intra-cytoplasmic sperm injection-conceived offspring compared with in vitro fertilization-conceived offspring： a systematic review of health outcomes beyond the neonatal period[J].Andrology，2017，5（4）：610-621.

收稿日期：2019-12-06;修回日期：2020-01-09

編輯/肖婷婷