注射用阿莫西林鈉克拉維酸鉀在0.9%氯化鈉注射液中有關物質的考察

張紅梅，王桂英，魏永濤

(濟南市食品藥品檢驗檢測中心，濟南 250021)

注射用阿莫西林鈉克拉維酸鉀為阿莫西林鈉和克拉維酸鉀(5∶1)的復方制劑。阿莫西林為廣譜β-內酰胺類抗生素；克拉維酸鉀僅有微弱的抗菌活性，但具有較強廣譜β-內酰胺酶抑制作用，可保護阿莫西林免遭β-內酰胺酶水解。該復方制劑拓寬了抗菌譜，增加了抗菌活性，臨床上使用廣泛。但其溶液穩定性較差，極易變色[1-2]。雖然對于使用過程中的安全性影響尚沒有數據支持，但其活性成分含量快速下降可影響其有效性。本實驗結合臨床實際應用情況，通過測定安全性重要指標——有關物質的變化，來探討在有效性下降的同時，其存在的安全性風險。

1 材料和方法

1.1 儀器

1.2 試藥

阿莫西林克拉維酸系統適用性對照品(批號：130588-201603，來源：中國食品藥品檢定研究院)；注射用阿莫西林鈉克拉維酸鉀(編號1、2、3、4，規格：1.2 g；批號分別為：22190409、190302、608190101、19040942，來源：山東省4個不同廠家)；阿莫西林鈉(批號：3201904306，來源：珠海聯邦制藥股份有限公司)；克拉維酸鉀(批號：3561906620，來源：珠海聯邦制藥股份有限公司)；0.9%氯化鈉注射液(NS，批號：C180501041，來源：山東科倫藥業有限公司)；乙腈(色譜純，國藥集團化學試劑有限公司)；其他試劑均為市售分析純。

1.3 色譜條件[3]

色譜柱：Agilent Zorbax SB C18(150 mm×4.6 mm，5 μm)；流動相A：0.01 mol/L磷酸二氫鉀溶液(用2 mol/L 氫氧化鈉溶液調節pH值至6.0)，流動相B：0.01 mol/L磷酸二氫鉀溶液(用2 mol/L氫氧化鈉溶液調節pH值至6.0)-乙腈(20∶80)；檢測波長：230 nm；流速：1.0 ml/min；進樣量：20 μl；柱溫：30 ℃。

1.4 溶液的制備

系統適用性溶液：取阿莫西林克拉維酸系統適用性對照品約10 mg，加4 ml流動相A溶解。

供試品溶液：4個廠家樣品，各取2瓶。1瓶加20 ml NS溶解，1瓶加10 ml NS溶解，在0 h、0.17 h(10 min)、0.5 h、1 h、2 h、3 h時間點，分別精密量取適量，用流動相A稀釋成每1 ml中約含阿莫西林 2 mg 的溶液。精密稱取阿莫西林鈉原料藥1.0 g和克拉維酸鉀原料藥0.2 g置同一西林瓶中，一瓶加20 ml NS，另一瓶加10 ml NS，在0 h、0.17 h(10 min)、0.5 h、1 h、2 h、3 h時間點，分別精密量取適量，用流動相A稀釋成每1 ml中約含阿莫西林 2 mg 的溶液。精密稱取阿莫西林鈉原料藥1.0 g、克拉維酸鉀原料藥0.2 g，按上述操作分別單獨制備相應供試品溶液。

對照溶液：精密量取供試品溶液2 ml，置100 ml量瓶中，用流動相A稀釋至刻度。藥典標準規定：單個雜質不得過對照溶液兩個主峰面積和的2.5%，各雜質的和不得過對照溶液兩個主峰面積和的7.0%。

2 結果

按“1.3”色譜條件測定的有關物質結果見表1和表2。從結果中看出：① 單一克拉維酸鉀原料藥用NS溶解后，隨時間延長峰面積幾乎無變化，無雜質峰產生。② 4個樣品及阿莫西林鈉與克拉維酸鉀混合物變化趨勢一致，隨時間延長，雜質個數增多，單個最大雜質含量增加，并趨于穩定，雜質總和含量不斷增加。③ 單一阿莫西林鈉原料藥隨時間延長，雜質個數增多，單個最大雜質含量增加，雜質總和含量不斷增加，但雜質個數明顯比樣品及其與克拉維酸鉀的混合物少。④ 第一步用10 ml NS溶解，隨時間延長，在相同時間點雜質個數、單個最大雜質、雜質總和明顯比用20 ml NS溶解多。

表1 不同企業產品在不同時間的有關物質結果

續表1

*: 最大雜質分離，所以含量較2 h低

表2 不同時間克拉維酸鉀原料藥結果

通過與系統適用性溶液的標準圖譜疊加比較(見圖1)，幾個典型雜質的含量如下(見表3)：① 阿莫西林鈉原料藥中最大雜質是阿莫西林閉環二聚體，占雜質總量的50%以上，且隨時間延長一直在增大。② 4個樣品及阿莫西林鈉與克拉維酸鉀混合物最大雜質是阿莫西林閉環三聚體，隨時間延長增大并趨于平穩，但阿莫西林閉環二聚體的含量隨時間延長一直在增加，兩者之和占雜質總量的50%左右。

A: 系統適用性溶液的標準圖譜；B：阿莫西林鈉原料藥0 h、3 h與標準圖譜的疊加圖1 高效液相色譜圖

表3 不同企業產品在不同時間各雜質的變化

續表3

3 討論

從實驗數據看出，用NS溶解后，各樣品隨著時間延長，阿莫西林二聚體及三聚體的含量增加非常明顯。高分子聚合物雜質是引起速發型過敏反應的主要因素[4-8]，這就增加了藥物的安全性風險；而且溶解液體積越小，溶液濃度越高，雜質變化越明顯，提示第一步溶解時盡可能用較大體積NS。在 0 h 和0.17 h(10 min)時，單個最大雜質(<2.5%)、雜質總和(<7.0%)均符合2015年版《中國藥典》的規定[3]，但0.5 h后，各樣品的數據均超出了限度范圍，所以建議配制的第一步溶液應在10 min內使用，最好臨用現配。

經查詢，全國范圍內注射用阿莫西林鈉克拉維酸鉀共有32家生產企業，61個藥品批準文號，其中山東省有5家企業、8個批準文號。而國內提供原料藥的廠家只有3家。前期我們檢測了9個廠家35批樣品，單個最大雜質含量在0.2%～0.6%之間，各雜質和含量在0.4%～0.9%之間。可見從目前現有的工藝水平、技術手段、嚴格的貯存條件來控制雜質的含量降低是困難且有限的。基于現實情況，如能在臨床使用過程中抓住細節、規范操作，減少雜質尤其是高分子聚合物的產生，則可以直接快速地提高藥品的安全性和有效性。

綜上，為保證藥品的安全有效，建議藥典標準增設聚合物項目的檢查。臨床使用時，要臨用現配；第一步溶解時盡可能用大體積溶劑，溶解后立即注入輸液瓶中并盡快使用，不可放置，一旦變色不可再用。