羅漢松實化學成分及藥理作用研究進展

林樂珍，趙凱麗，黃增瓊

(廣西醫科大學 藥學院，廣西 南寧 530021)

羅漢松實是羅漢松科植物羅漢松Podocarpusmacrophyllus(Thunb.)D.Don和短葉羅漢松P.macrophyllus(Thunb.)D.Don var.makiEndl.的種子及花托[1]。羅漢松和短葉羅漢松原產于日本，在我國主要分布在江蘇、浙江、福建、湖南、貴州、廣西、廣東等地[2]。羅漢松具有較高的藥用價值，其根皮能活血、止痛、殺蟲，可用于跌打損傷和風濕骨痛；葉子能止血，可用于咳血和風濕跌打損傷；果實具有大補元氣，治心胃痛和血虛面色萎黃的功效[3]。近年來，國內外學者從羅漢松屬植物的枝葉中分離得到了黃酮類、二萜與降二萜雙內酯類、酚類、三萜、木脂素以及甾體類化合物，其中許多化合物表現出了抗炎、抗氧化、抗腫瘤、抗真菌、殺蟲以及增強免疫力的活性[3-8]，但目前關于羅漢松實化學成分及藥理作用的研究報道不多。本研究對羅漢松實化學成分及其藥理作用的研究概況進行綜述，為羅漢松實的后續研究提供參考。

1 化學成分

1.1 降二萜內酯類及萜類化合物

本研究小組成員趙凱麗[13]報道了羅漢松種子揮發油及石油醚提取物的化學成分；研究小組利用GC-MS法，從揮發油和石油醚提取物中分別鑒定出45個和53個化合物，其中大部分化學成分都是萜類化合物，如馬鞭草烯酮、匙葉桉油烯醇、海松酸、石竹烯氧化物和古巴烯等。據文獻報道[14]，羅漢松葉也含有揮發油，但其揮發油中所含的萜類成分較少，已確定的成分中只有一種為萜類——即貝殼杉烯。由此可見，即使是同種植物不同部位所含的化學成分也存在較大的差異。此外，本課題組還研究發現，不同產地、不同采收季節和不同樹齡的羅漢松種子揮發油的化學成分及相對百分含量也有所不同(另有研究報道)。

1.2 生物堿類化合物

在對羅漢松種子揮發油化學成分的研究中，本研究小組首次發現，產于廣西北海的羅漢松種子揮發油中含有大量的川芎嗪(四甲基吡嗪)，其在揮發油中的相對百分含量高達97.27%[13]。為此，我們提出了一種從羅漢松種子快速提取分離純化川芎嗪的方法，使羅漢松種子成為川芎嗪的另一個來源[15]。川芎嗪作為一種生物堿類化合物，在揮發油中的存在實屬罕見，然而，川芎嗪具有升華性，且易溶于熱水，這可能是其隨揮發油一同被提取的主要原因。眾所周知，含有川芎嗪的制劑已廣泛應用于冠心病及腦缺血等心腦血管疾病的治療[16]；而根據《中藥大辭典》的記載，羅漢松實具有治心胃痛的功效[17]。因此，我們認為羅漢松種子中的川芎嗪是其具有治心胃痛功效的主要化學物質基礎。本研究小組還建立了羅漢松種子揮發油中川芎嗪的含量測定方法；不過研究也發現不同產地、不同采收季節、不同品種和不同樹齡的羅漢松種子中川芎嗪含量存在較大差異，許多研究工作仍需進一步開展。

圖1 羅漢松種子的降二萜內酯及甾體類化合物化學結構

1.3 多糖類化合物

多糖類化合物是一類具有降血脂、調節免疫、抗腫瘤、抗氧化、控制血糖和降膽固醇等作用的活性物質[18]。龐逸敏等[19]采用超聲輔助提取法對羅漢松實花托中的多糖進行了提取，并采用硫酸-苯酚比色法測定其含量，結果發現鮮品中花托多糖含量為4.74 mg/g(以葡萄糖計)。據了解，在羅漢松產地廣西北海，人們常用羅漢松花托泡酒，或直接采摘鮮果食用，當地人認為其具有美容養顏的功效，這極有可能與羅漢松花托多糖的抗氧化作用有關。關于羅漢松花托多糖的生物活性，本研究小組正在逐步探索中。

1.4 黃酮類化合物

與多糖類化合物相似，黃酮類化合物也具有多種生物活性，如抗氧化、抗腫瘤和調節血脂等。黃鳳音等[20]采用超聲法，提取羅漢松果實中的總黃酮，發現用75%的乙醇超聲60 min，在料液比例為1：40的條件下，能夠獲得最大量的總黃酮，最大含量達4.67 mg/g；而在羅漢松葉的提取物中，以70%乙醇為溶劑進行超聲提取，并采用大孔吸附樹脂對總黃酮進行富集，可以獲得最大量的總黃酮；此提取法使提取物中總黃酮的含量達到1.5 mg/g[21]。另據文獻報道[22]，70%的乙醇適于提取黃酮苷類和極性較大的游離黃酮，因此，可推測出羅漢松果實中的黃酮類化合物可能是黃酮苷及極性較大的游離黃酮。

1.5 氨基酸、礦質元素和維生素

為了探索羅漢松實的營養價值，本研究小組孟軍等[23]利用氨基酸自動分析儀和原子吸收光譜法等，測定了羅漢松實的氨基酸、礦質元素和維生素含量，在羅漢松實中檢測出17種氨基酸和6種礦質元素；在測得的氨基酸中，谷氨酸、天門冬氨酸和亮氨酸含量最高，三者之和占總氨基酸含量的1/3；檢測出的礦物質元素有Ca、Mg、Fe、Zn、Mn、Cu，其中Ca含量最高，其次為Mg。此外，研究還發現羅漢松的花托中富含維生素A和維生素C，這些物質很可能為羅漢松實治療心胃痛起到輔助作用。

近年來，隨著羅漢松種植業的發展，越來越多的學者開始關注羅漢松實的藥用價值，對羅漢松實化學成分和生物活性的研究也陸續開展。目前，通過對羅漢松實化學成分的研究，除了發現上述報道的化學成分外，再無更多其他類別的化合物研究的相關報道，這表明，羅漢松實化學成分和生物活性的研究仍存在很大的空間。

2 藥理作用

2.1 降血脂

隗磊等[24，25]研究發現，羅漢松實75%和95%乙醇提取物均能顯著降低高脂血癥小鼠的體重并改善血清生化指標；且95%醇提物能顯著降低高脂血癥小鼠血清中的總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)和低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)含量；可以極顯著提高載脂蛋白及低密度脂蛋白受體在高脂血癥小鼠肝臟中的表達。一般認為，羅漢松實95%醇提物的降血脂和改善血脂代謝作用是通過雙重作用實現的。據文獻報道[26，27]，75%乙醇可以提取藥材中的黃酮苷和極性較大的黃酮類成分，而95%乙醇可以提取藥材中的低極性成分，包括色素、脂類、萜類和黃酮苷元等。羅漢松實75%和95%醇提物都有降血脂作用，不過究竟是哪類成分在其中發揮作用仍需進一步研究。

2.2 抗氧化作用

除了降血脂作用，羅漢松花托50%、75%和95%乙醇提物及醇浸物還能顯著提高小鼠肝臟超氧化歧化酶(SOD)的活力，且95%醇提物可顯著降低丙二醛(MDA)含量，表明羅漢松實具有抗氧化作用[24，25]。王全澤等[28]運用索氏提取法提取羅漢松葉總黃酮，并發現其對1，1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基、超氧自由基(O2-)和羥自由基(·OH)有明顯的清除能力，表明羅漢松葉總黃酮具有抗氧化活性。植物中黃酮類化合物的抗氧化作用，已有大量文獻報道[29，30]，因此，可以推測，羅漢松實發揮抗氧化作用的主要成分可能為黃酮類化合物。

2.3 保肝作用

脂肪肝的發生與發展與高脂血癥密切相關。隗磊等[24，25]對有脂肪肝的高脂血小鼠給予不同濃度羅漢松實醇提物及醇浸物治療后，發現75%、95%醇提物及醇浸物組均能顯著降低高脂血小鼠的肝系數、谷丙轉氨酶(ALT)與谷草轉氨酶(AST)水平；且95%醇提物的作用最為顯著，小鼠肝細胞沒有出現明顯的脂肪變性，表明羅漢松實95%醇提物是保肝作用的有效物。通過比較發現，羅漢松實95%乙醇提取物具有很好的抗氧化及保肝作用，不過其保肝作用是否通過抗氧化作用實現，其機理又是什么，有待進一步研究。

2.4 抗腫瘤作用

周燕等[31，32]研究了羅漢松種子醇提取物對人胃癌細胞的抗腫瘤作用及其作用機制，發現羅漢松種子95%乙醇提取物對人胃癌細胞MGC-803的抑制能力具有時間和濃度依賴性——即隨著作用時間的延長和濃度的增大，醇提物對MGC-803細胞的生長抑制作用明顯增強。有國外學者研究發現[33]，羅漢松實醇提物能通過改變細胞周期、增加細胞凋亡，并誘導自噬，從而降低結腸癌細胞的增殖。本研究小組還對羅漢松花托多糖的抗腫瘤活性進行了研究，發現羅漢松花托多糖對肝癌H22荷瘤小鼠的腫瘤生長有顯著抑制作用。目前，關于羅漢松花托多糖抗腫瘤的作用機理及羅漢松種子單體成分的抗腫瘤活性研究正逐步開展。

3 結語

綜上所述，羅漢松實含有降二萜內酯類及萜類化合物、生物堿化合物，多糖類、黃酮類化合物以及氨基酸、礦物元素和維生素等化學成分。羅漢松實提取物具有降血脂、抗氧化、保肝和抗腫瘤等藥理活性。據《中藥大辭典》記載，羅漢松實具有治血虛面色萎黃、心胃痛，補腎益肺、大補元氣等功效[17]。然而，在已報道的藥理作用中，未見有關于羅漢松實抗貧血、抗心肌缺血和抗潰瘍作用等方面的研究報道。并且，已報道的藥理活性研究都只停留在提取物水平上，羅漢松實中單體成分的活性研究及相關機理研究均未見報道。值得注意的是，本研究小組在羅漢松種子揮發油中發現了川芎嗪，其很可能是羅漢松實治療心胃痛的化學物質基礎——即羅漢松實具有抗心肌缺血作用。那么，羅漢松實中的黃酮類成分是否也具有抗心肌缺血作用，羅漢松實還含有哪些化學成分，其他單體成分是否具有抗腫瘤活性，這些問題都需要進一步研究解答。因此，關于羅漢松實的研究還有很大的空間。