E-鈣黏附蛋白、骨膜蛋白在高血壓腎病中的診斷價值

楊 柳,陳 艷，張康建

上海市浦東新區人民醫院：1.檢驗科；2.心內科，上海 201299

高血壓是一種常見的慢性疾病,隨著社會老齡化的發展、膳食結構的變化和生活水平的逐步提高,其發病率逐年增加,威脅著人們的健康和生命[1]。高血壓腎病是高血壓最常見、最嚴重的并發癥[2]。當腎小球處于高壓力、高濾過和高代謝狀態時,會引起腎小管和腎小球濾過膜受損,然后導致高血壓腎病。高血壓腎病的早期臨床表現比較隱匿[3],當腎功能出現異常時,往往腎臟已經嚴重受損。因此,高血壓患者的腎功能指標和尿蛋白均正常并不一定代表腎臟沒有病理損傷。因此,尋找高血壓患者腎損傷診斷的敏感指標尤為重要。E-鈣黏附蛋白是一個跨膜糖蛋白,位于細胞-細胞接觸區域的上皮細胞表面,在維持上皮組織的正常結構和功能中發揮關鍵作用[4]。 已有研究發現,糖尿病腎病肥沙鼠模型的腎組織中E-鈣黏附蛋白水平明顯降低[5],但其在高血壓腎病中的變化鮮有報道。骨膜蛋白是在骨中表達的可溶性細胞外基質蛋白,有研究發現,骨膜蛋白在正常腎小管中未被觀察到,而在腎損傷期間,骨膜蛋白在腎小管間質區高度表達[6]。本研究分析了E-鈣黏附蛋白、骨膜蛋白在高血壓腎病中的變化情況,以期為臨床診斷高血壓腎病提供新的標志物。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2017年1月至2019年1月本院收治的108例高血壓患者為研究對象,患者均符合高血壓診斷標準,意識清晰,排除合并嚴重心腦血管疾病及肝病的患者。108例高血壓患者中男65例,女43例；年齡31～83歲,平均 (65.44±7.23)歲。依據患者的嚴重程度分成3組:單純高血壓組35例,高血壓腎病Ⅰ～Ⅱ期組(腎小球濾過率≥60 mL/min)40例,高血壓腎病Ⅲ～Ⅳ期組(腎小球濾過率<60 mL/min)33例。單純高血壓組男21例,女14例；年齡31～84歲,平均 (65.65±7.32)歲。高血壓腎病Ⅰ～Ⅱ期組男24例,女16例；年齡31～83歲,平均 (65.48±7.27)歲。高血壓腎病Ⅲ～Ⅳ期組男19例,女14例；年齡31～84歲,平均 (65.25±7.63)歲。選擇同期參加體檢的健康志愿者35例納入對照組,其中男20例,女15例；年齡31～84歲,平均 (65.21±7.58)歲。4組研究對象在性別、年齡等方面比較,差異無統計學意義(P>0.05),具有可比性。所有研究對象均自愿參與本研究,并簽署知情同意書,本研究經本院倫理委員會批準后進行。

1.2方法 所有研究對象均采集晨起空腹肘靜脈血3 mL,3 000 r/min離心10 min,取血清,采用美國雅培全自動生化分析儀檢測血清肌酐、尿素氮、尿酸、清蛋白水平。所有研究對象均進行1次尿檢,并收集24 h尿液標本,采用免疫比濁法檢測24 h尿清蛋白排泄率(UAER)。酶聯免疫吸附試驗(ELISA)法檢測E-鈣黏附蛋白、骨膜蛋白水平。試劑盒均由南京建成生物研究所提供。

2 結 果

2.13組患者基本情況比較 與單純高血壓組比較,高血壓腎病Ⅰ～Ⅱ期組、高血壓腎病Ⅲ～Ⅳ期組病程更長,收縮壓、舒張壓更高,UAER、尿素氮、血清肌酐、尿酸、清蛋白水平更高,腎小球濾過率更低,差異均有統計學意義(P<0.05)。與高血壓腎病Ⅰ～Ⅱ期組比較,高血壓腎病Ⅲ～Ⅳ期組病程較長,收縮壓、舒張壓更高,UAER、尿素氮、血清肌酐、尿酸、清蛋白水平明顯增加,腎小球濾過率降低,差異均有統計學意義(P<0.05)。見表1。

2.24組研究對象血清E-鈣黏附蛋白、骨膜蛋白水平分析 與對照組比較,單純高血壓組、高血壓腎病Ⅰ～Ⅱ期組、高血壓腎病Ⅲ～Ⅳ期組E-鈣黏附蛋白水平明顯降低,骨膜蛋白水平明顯增加,差異有統計學意義(P<0.05)；與單純高血壓組比較,高血壓腎病Ⅰ～Ⅱ期組及高血壓腎病Ⅲ～Ⅳ期組E-鈣黏附蛋白水平明顯降低,骨膜蛋白水平明顯增加,差異有統計學意義(P<0.05)；與高血壓腎病Ⅰ～Ⅱ期組比較,高血壓腎病Ⅲ～Ⅳ期組E-鈣黏附蛋白水平明顯降低,骨膜蛋白水平明顯增加,差異有統計學意義(P<0.05)。見表2。

2.3各項指標在患者中的相關性分析 E-鈣黏附蛋白與UAER(r=—0.487,P=0.012)、尿素氮(r=—0.312,P=0.021)、血清肌酐(—0.341,P=0.043)呈負相關,與腎小球濾過率(r=0.512,P=0.017)呈正相關。骨膜蛋白與UAER(r=0.412,P=0.033)、尿素氮(r=0.447,P=0.029)、血清肌酐(r=0.337,P=0.036)呈正相關,與腎小球濾過率(r=—0.486,P=0.028)呈負相關。而E-鈣黏附蛋白與骨膜蛋白呈負相關(r=—0.509,P=0.015)。

表1 3組患者基本情況比較

組別n尿素氮(x±s,mmol/L)腎小球濾過率[M(P25～P75),mL·min-1]血清肌酐(x±s,μmol/L)尿酸(x±s,μmol/L)清蛋白(x±s,g/L)單純高血壓組355.26±1.4798.2(81.1～112.5)72.32±23.46354.72±63.6431.53±5.84高血壓腎病Ⅰ～Ⅱ期組406.22±2.55a81.4(68.8～101.7)a82.39±25.53a362.54±81.55a39.53±3.74a高血壓腎病Ⅲ～Ⅳ期組338.53±2.75ab67.2(44.1～84.3)ab118.28±49.18ab404.94±113.86ab42.43±4.14ab

注:與單純高血壓組比較,aP<0.05；與高血壓腎病Ⅰ～Ⅱ期組比較,bP<0.05。

表2 4組研究對象血清E-鈣黏附蛋白、骨膜蛋白水平分析

注:與對照組比較,aP<0.05；與單純高血壓組比較,bP<0.05；與高血壓腎病Ⅰ～Ⅱ期組比較,cP<0.05。

2.4高血壓腎病危險因素的Logistic回歸分析 將是否有高血壓腎病作為因變量,以患者E-鈣黏附蛋白、骨膜蛋白水平作為自變量進行多因素分析,結果顯示患者的E-鈣黏附蛋白、骨膜蛋白水平是影響高血壓腎病的獨立危險因素(P<0.05)。見表3。

表3 高血壓腎病危險因素的Logistic回歸分析

3 討 論

高血壓容易導致器官損傷,在多種因素的相互作用下(包括血壓、內皮功能障礙、淋巴細胞活性氧自由基和炎癥),腎損傷為最常見病變。持續的腎損傷易導致腎臟細胞外基質的合成增加,其包圍并最終取代受損結構[7]。在慢性腎臟疾病中,這種纖維化過程會自發地加重,無論疾病的最初原因如何,都會導致功能性腎單位數量的逐漸減少。因此,理解纖維化進展或逆轉的機制是主要的治療靶點。最近的研究強調了細胞外基質蛋白的重要性,細胞外基質蛋白是纖維化瘢痕的組分,而且是通過細胞基質信號傳導的組織重塑的活性調節劑[8]。

E-鈣黏附蛋白是一種位于染色體16q22.1中E-鈣黏附蛋白基因編碼的跨膜糖蛋白,位于細胞-細胞接觸區域的上皮細胞表面,在維持正常上皮組織的正常結構和功能中發揮關鍵作用,能介導細胞間、細胞與細胞外基質相互聯系[9]。E-鈣黏附蛋白在鈣依賴性細胞與細胞黏附中起關鍵作用。以往的研究表明,E-鈣黏附蛋白通過增殖、侵襲和(或)轉移促進癌癥進展,可溶性E-鈣黏附蛋白是各種惡性腫瘤的預后標志物[10]。但是,E-鈣黏附蛋白和高血壓腎病之間的關系很少被報道。而已有的研究顯示,在排除腫瘤和其他因素基礎上,大量清蛋白組患者血清的E-鈣黏附蛋白水平表達較低[11]。有研究采用大鼠石蠟包埋的腎切片進行免疫組織化學分析,發現腎纖維化組E-鈣黏附蛋白基因和蛋白表達均明顯下降[12]。本研究中,高血壓腎病Ⅰ～Ⅱ期組、高血壓腎病Ⅲ～Ⅳ期組的E-鈣黏附蛋白水平明顯低于對照組和單純高血壓組,而高血壓腎病Ⅲ～Ⅳ期組明顯低于高血壓腎病Ⅰ～Ⅱ期組,這也說明E-鈣黏附蛋白可以作為診斷早期腎病的標志物。在糖尿病腎病患者腎功能損傷的進展過程中,腎小管上皮細胞的缺血和凋亡均增加。另有研究證明,蛋白水解酶活化導致的E-鈣黏附蛋白降解是由缺血和細胞凋亡引起的[13]。因此,腎損傷引起的降解可能是血清E-鈣黏附蛋白降低的主要原因之一。Pearson相關分析顯示,E-鈣黏附蛋白與UAER、尿素氮、血清肌酐呈負相關,與腎小球濾過率呈正相關。這也證實了E-鈣黏附蛋白在腎功能中的可能作用。

骨膜蛋白的原始名稱是成骨細胞特異性因子-2,是在骨中表達的可溶性蛋白,也是一種細胞外基質蛋白[14]。有研究顯示骨膜蛋白是腎臟損傷的組織生物標志物,其在正常腎小管中表達水平很低,只有在遠端小管受損時排出,而且發現在腎損傷期間,骨膜蛋白在腎小管間質區高度表達[15]。本研究中,高血壓腎病Ⅰ～Ⅱ期組、高血壓腎病Ⅲ～Ⅳ期組的骨膜蛋白水平明顯高于對照組和單純高血壓組,而高血壓腎病Ⅲ～Ⅳ期組明顯高于高血壓腎病Ⅰ～Ⅱ期組,這與文獻[12]研究一致,該項研究發現骨膜蛋白在小鼠腎臟中的表達增加,并與腎纖維化嚴重程度相關。Pearson相關分析還顯示,骨膜蛋白與UAER、尿素氮、血清肌酐呈正相關,與腎小球濾過率呈負相關。

本研究中,將是否有高血壓腎病作為因變量,以患者E-鈣黏附蛋白、骨膜蛋白水平作為自變量進行多因素分析,發現E-鈣黏附蛋白、骨膜蛋白是影響高血壓腎病的獨立危險因素。這也說明E-鈣黏附蛋白、骨膜蛋白水平可以作為診斷高血壓腎損傷的標志物,當然其具體機制還有待進一步研究。