608例兒童及青少年食物不耐受情況結果分析

楊焦峰，王偉娟，徐 璐

1.新鄉醫學院第二附屬醫院檢驗科，河南新鄉 453002；2.新鄉醫學院第三附屬醫院檢驗科，河南新鄉 453003；3.河南省新鄉市疾病預防控制中心，河南新鄉453000

食物不耐受是一種非常復雜的免疫反應性疾病[1]，它可以刺激身體產生一種或多種自身特異性免疫IgG抗體，該類IgG抗體與食物小分子物質形成特殊的免疫復合物，這些免疫復合物沉積在全身各個系統，導致全身相應部位出現慢性癥狀，由于食物不耐受癥狀不具有特異性，而且比較隱匿，因此在生活中和臨床上不易被發現和診斷。食物不耐受特異性IgG抗體的實驗室檢測為該類疾病提供了一種可靠而有效的診療手段。根據檢測的食物種類，少食、輪食或忌食不耐受食物，可極大地改變患者的病癥，預防及控制疾病的發生和發展，促進患者盡快恢復健康。大規模人口調查顯示，近45%的人群曾經產生過食物不耐受，而且兒童的食物不耐受陽性率遠高于成年人[2-4]。當前，兒童食物不耐受的研究已經成為醫療界研究的熱點，在臨床上也逐步受到重視[5]。本研究分析了新鄉醫學院第三附屬醫院608例兒童及青少年的食物不耐受檢測結果，初步分析其流行現狀，旨在引起家長、醫生、社會的重視，從而改善患兒飲食習慣，促進兒童及青少年健康成長。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2016年1月至2019年6月在新鄉醫學院第三附屬醫院檢驗科進行食物不耐受項目檢測的608例兒童及青少年為研究對象，按年齡分為5組：嬰兒期(<1歲)，幼兒期(1～<3歲)，學齡前期(3～<6歲)，學齡期(6～<12歲)，青春期(12～<18歲)。全部研究對象平均年齡為(3.4±3.0)歲，其中男373例，平均年齡(3.3±2.8)歲；女235例，平均年齡(3.7±3.2)歲。同時收集所有研究對象的性別、年齡等人口統計學信息和臨床癥狀、體征、就診目的等臨床資料。

1.2檢測方法 本次檢測食物特異性IgG抗體所用試劑由美國Biomerica公司生產，用ELISA法測試人體血清中14種食物特異性IgG抗體，包括牛肉、雞肉、鱈魚、玉米、蟹、雞蛋、蘑菇、牛奶、豬肉、大米、蝦、大豆、西紅柿、小麥。所有操作過程嚴格按照試劑盒說明書進行標椎化操作。首先將所有試劑平衡至室溫，然后將標本用生理鹽水進行100倍稀釋(20∶2 000)，再用加樣槍吸取100 μL稀釋后的血清，分別加入反應孔，用封口玻璃紙封閉微孔板，放置室溫中1 h左右，使用全自動洗板機清洗3次反應板，分別向各反應孔中加入100 μL辣根過氧化物酶標抗體結合液，在室溫20～28 ℃孵育(30±2)min，分別向各微孔中加50 μL顯色劑A(過氧化氫)和50 μL顯色劑B(色原底物)，在室溫下放置10 min左右，向每孔內加入50 μL稀硫酸終止液，溶液由藍色變為穩定的黃色，用自動酶標儀在450 nm波長比色，讀取每個孔的吸光度。根據定標曲線及每個孔的吸光度值電腦自動換算為濃度，依據每一種食物特異性IgG濃度值進行食物不耐受判斷：(1)0～<50 U/mL為陰性，(2)50～<100 U/mL為輕度不耐受，(3)100～<200 U/mL為中度不耐受，(4)≥200 U/mL為重度不耐受；只要有1種或1種以上食物特異性IgG濃度≥50 U/mL，即判定該研究對象為食物不耐受，即結果陽性。

1.3臨床疾病分類 根據就診者的癥狀和體征，以及就診科室分為以下幾類，(1)消化系統：慢性腹瀉、腹痛、潰瘍、消化不良；(2)皮膚系統：皮疹、紅斑、瘙癢、蕁麻疹、皮膚干燥、濕疹、痤瘡等；(3)神經系統：焦慮、躁狂、抑郁、注意力不集中、孤僻、智力低下等；(4)呼吸系統：氣喘、咳嗽、咽喉炎、鼻竇炎、哮喘等；(5)免疫系統：強直性脊柱炎、風濕性關節炎、類風濕性關節炎、關節肌肉疼痛、過敏性紫癜(HSP)等；(6)多系統：兩個或兩個以上系統出現癥狀；(7)其他：無法分類的兒童及青少年歸為其他；(8)體檢門診：體檢門診主要是提供健康咨詢服務和進行常規體檢。

1.4統計學處理 采用SPSS19.0統計軟件進行數據處理及統計學分析，計數資料以例數或百分率表示，組間比較采用χ2檢驗，以P<0.05為差異有統計學意義。食物不耐受陽性率=食物不耐受陽性例數/該組總例數×100%；N為陽性項目總數(Σn)，M為總項目數(n×14)，總陽性率=N/M。

2 結 果

2.1不同性別研究對象食物不耐受的分布情況 在608例兒童及青少年中，男373例，食物不耐受陽性例數為47例；女235例，食物不耐受陽性例數為30例，共計食物不耐受陽性例數77例。男性和女性食物不耐受總陽性率分別為12.60%、12.77%，整體總陽性率為12.66%，男性和女性食物不耐受總陽性率比較，差異無統計學意義(χ2=0.039，P=0.792)。見表1。

表1 不同性別研究對象食物不耐受情況比較

2.214種食物不耐受陽性結果及不同性別間的比較 在14種食物中IgG抗體陽性率由高到低依次為：牛奶(74.18%)、雞蛋(66.45%)、大豆(9.70%)、西紅柿(8.22%)、鱈魚(7.89%)、牛肉(1.97%)、大米(1.97%)、蟹(1.15%)、玉米(1.15%)、小麥(0.99%)、蝦(0.66%)、蘑菇(0.49%)、雞肉(0.33%)、豬肉(0.16%)。男性和女性在14種食物IgG抗體陽性率之間分別進行比較，差異無統計學意義(P>0.05)。見表2。

表2 14種食物不耐受陽性結果及不同性別間的比較[n(%)]

2.3食物不耐受在不同年齡段的分布情況 在5個年齡段內，學齡前期總陽性率最高，為12.85%(295/2 296)，其他依次為幼兒期、嬰兒期、學齡期、青春期，分別為12.26%(340/2 772)、11.30%(212/1 876)、11.17%(147/1 316)、11.11%(28/252)，青春期總陽性率最低。在14種食物中不耐受陽性率居前兩位的是牛奶(50.00%～80.81%)和雞蛋(48.51%～75.00%)。具體表現在3歲以前兒童主要是牛奶不耐受陽性率高(73.88%～80.81%)，3歲以后兒童主要是牛奶(67.02%～73.17%)和雞蛋(64.89%～75.00%)不耐受陽性率均高，到了青春期主要變為雞蛋不耐受(66.67%)。見表3。

2.4食物不耐受在各系統疾病或受檢科室間的分布情況 食物不耐受總陽性率在各組間的分布情況為：體檢門診為13.04%(387/2 968),呼吸系統12.79%(308/2 408)，皮膚系統11.79%(203/1 722)，消化系統10.98%(83/756)，神經系統13.53%(36/266)，免疫系統12.86%(9/70)，多系統10.71%(3/28)，其他11.56%(34/294)。在多系統疾病中，有1例兒童反復咳嗽伴發佝僂病，另1例為智力低下伴發生長發育遲緩。牛奶和雞蛋在各個分組間的食物不耐受陽性率均高于50%。見表4。

表3 14種食物在各個年齡段的不耐受陽性情況[n(%)]

表4 食物不耐受在各系統疾病或受檢科室間的陽性情況[n(%)]

3 討 論

目前關于成人食物不耐受的研究較多，兒童相關的報道卻相對較少，而且研究多關注與單一疾病的相關性。本研究側重于兒童及青少年食物不耐受的流行病學調查，以及探究性別、年齡段與食物不耐受的關系，總結食物不耐受在各個系統疾病或受檢科室中出現的陽性率，試圖為臨床兒童及青少年相關疾病的診斷和治療提供一條新的途徑。

本研究顯示，食物不耐受現象在兒童及青少年群體中發生率較高，總項目陽性率達到12.66%。醫院每年的食物不耐受檢測申請呈現一個不斷的遞增趨勢，當病因不明時進行有針對性的檢查，說明食物不耐受現象已經得到了兒科醫生的逐漸重視，在尋求疾病發生原因時，也會考慮到食物不耐受，這是一個可喜的現象。本研究結果顯示不同性別群體食物不耐受總陽性率比較，差異無統計學意義(χ2=0.039，P=0.792)，但是有報道顯示成年女性更容易發生食物不耐受，有學者推測這可能與女性血液里雌二醇水平較高有關，雌二醇可以極大地提高免疫反應的強度，并且還可以提高反應的敏感性。食物進入體內后，在消化道內被分解出大量的肽分子，在雌激素的作用下，免疫原性和免疫反應性增高，刺激機體產生大量的IgG分子，這些IgG分子與相應的食物抗原分子結合后形成大量的免疫復合物，從而引起食物不耐受現象的發生。而兒童及青少年正處于生長發育期，該年齡段男性和女性激素水平差異不大，因而性別對于食物不耐受的影響較小。

本研究結果表明，在14種食物中兒童及青少年易產生不耐受的品種是牛奶(74.18%)和雞蛋(66.45%)，原因可能為這兩類食品蛋白質含量較高，而兒童及青少年的消化系統正處于發育階段，因此這兩類食品可以耐受胃腸道的分解作用；另外，正是由于含有大量的蛋白質，導致這些小分子物質的免疫原性和免疫反應性增強，更易在消化道里形成大量的免疫復合物，進而導致免疫反應的發生。

食物不耐受的陽性率在不同成長時期也有差異[6]。本研究將研究對象按年齡分為5組，分別為嬰兒期、幼兒期、學齡前期、學齡期和青春期，各個時期的食物不耐受總陽性率都在11%以上，其中學齡前期的陽性率(12.85%)最高，其次為幼兒期(12.26%)，青春期的陽性率(11.11%)最低。在嬰兒期主要的食物是母乳，進入幼兒期及學齡前期后，隨著輔食的不斷增加和母乳的減少，兒童接觸的食物更加廣泛，對于胃腸道的消化和吸收功能提出了更高的要求，但是幼兒期及學齡前期的消化系統還正處于生長發育階段，不能滿足當前的要求，因而容易產生食物不耐受。隨著各個系統不斷地生長發育，進入青春期后身體功能逐漸達到成人水平，而且所接觸的食物品種也基本固定，免疫系統基本完善，食物不耐受的陽性率也會降到最低。但是青春期結束，隨著年齡的增長，食物不耐受的程度是否會繼續降低，品種是否會發生變化，值得進一步探究。

食物不耐受的發生不受組織和器官限制，主要表現為長期的慢性癥狀。本研究表明，在兒童各個系統疾病中均存在不同程度的食物不耐受，而且均在10%以上，說明疾病與食物不耐受的程度非常密切。其中，消化系統的陽性率為10.98%，該系統目前被研究最多的疾病是腸易激綜合征(IBS)，是胃腸功能紊亂疾病的一種，以腹痛為主要癥狀，胃腸道容易受到刺激痙攣引起腹痛。IBS過去又稱胃腸神經官能癥，顧名思義也容易受到情緒影響，現在已經證實食用特定的食物后可引起IBS[7]。最早被研究的食物不耐受是乳糖不耐受，IBS與乳糖不耐受的關系也非常密切。因此，可以通過避免乳糖的大量服用，有效地代替臨床藥物來減輕腹痛兒童的IBS癥狀。本研究皮膚系統的陽性率為11.79%。另有研究發現，在未成年異位性皮炎的患者中，食物不耐受陽性率為93.3%，兩種以上食物不耐受陽性率高達70.4%[8]。另有研究報道，107例蕁麻疹患者IgG抗體陽性率為71.2%，健康人IgG抗體陽性率為25.0%，兒童患者的食物不耐受陽性率為91.9%，明顯高于其他年齡組[9]。在食物敏感人群中，皮膚癥狀可由食物經過消化道引起，也可經過皮膚直接接觸引發，所以制訂限食計劃，避免不合適的食物長期損害機體，控制皮膚疾病發生的根源，阻止其發生和發展，是該類疾病進行治療的重要措施之一。

食物不耐受與免疫系統疾病和神經系統疾病也密切相關[10-11]。本研究顯示，免疫系統疾病的食物不耐受陽性率為12.86%。HSP屬于自身免疫系統疾病，是學齡期兒童最常見的血管炎癥之一。實驗室檢查通常伴有血清IgA、IgG、IgM、C3等升高。HSP其實并非真正的“過敏”，實質上是一種血管炎癥，是由IgA、IgG、IgM、C3等在血管壁上沉積所致的炎癥，因此癥狀沒有系統特異性，治療也沒有特異性，大部分患者可以自行緩解。黎雅婷等[12]通過研究58例HSP患兒發現，其血清中食物特異性IgG抗體陽性率高達85.0%，明顯高于健康對照者(12.5%)，表明在HSP患兒群體中廣泛存在著食物不耐受的現象，而且以牛奶、雞蛋、鱈魚、蟹不耐受最為嚴重，很明顯，以上幾種食物含有大量的蛋白質，這些蛋白質的免疫原性和免疫反應性比較強，非常容易刺激機體產生特異性IgG抗體，該研究還指出，大約有50%的HSP兒童存在多重食物不耐受現象(≥2種)，從而證明食物不耐受在HSP中存在滯后和累積效應過程。另外，本研究結果顯示，食物不耐受在兒童及青少年神經系統疾病中的陽性率為13.53%。隨著研究的深入，發現食物不耐受在孤獨癥和智力低下等神經系統疾病的兒童群體間廣泛存在，所引發的癥狀也逐漸受到關注。TIMOTHY等[13]通過長期研究孤獨癥兒童，發現有10%～90%的孤獨癥患兒有不同程度的消化道癥狀，例如慢性便秘、腹痛、腹瀉、腹脹、炎癥、菌群失調等，因而提出消化道與中樞神經系統之間存在著某種關聯的觀點。國內學者耿香菊等[14]推斷，體內不耐受的食物尤其是蛋白質類的食物進入機體后，未被完全分解，所形成的部分短肽片段通過消化道黏膜進入血液，再通過血液循環突破血腦屏障進入顱腦，從而影響中樞神經系統功能，其中的谷蛋白和酪蛋白引發的自身免疫反應起到主要作用，最終導致大腦功能紊亂，外在表現為兒童的一系列神經系統癥狀。另外，有研究從基因角度分析，認為孤獨癥兒童可能是由于主管胃腸功能的基因在顱腦發育期間出現了突變，從而直接作用于胃腸道引發消化功能紊亂，而并非由胃腸道內源性基因突變引起[15-16]。因此，食物不耐受與孤獨癥孰因孰果，或互為因果，尚無定論，需要進一步深入研究。

目前，普遍認為神經精神系統疾病和食物不耐受存在著非常密切的聯系，但是無法通過FOOKER博士的食物不耐受理論得到很好的解釋，是否可以通過“腦-腸軸”理論得到解答？研究發現，哺乳動物的腸道和大腦之間有一條保持密切雙向通信的神經內分泌通道，即“腸-腦軸”，而且腸道中的菌群，及其代謝產物在其中發揮著巨大的作用[17-19]。健康的腸道會通過傳遞神經、內分泌及化學分子信號影響大腦發育，而反過來大腦也會傳遞信號影響身體對食物的分解吸收利用、腸道菌群和免疫系統[20-22]。

食物不耐受作用機制是否能通過腸道內菌群發揮作用呢？因為不同細菌內部存在著不同的生物活性酶，由于缺乏某種細菌(或酶類)，因而缺乏大量分解脂肪、蛋白質、糖類的能力，導致產物減少，或是某種細菌(或酶類)的數量異常增加，導致異常產物增多(如大量不飽和脂肪酸或多肽片段)，這些異常物質通過“腦-腸軸”影響大腦或其他身體系統。腸道菌群作用于腸道內食物，通過分解食物所得產物來影響大腦和其他系統，通過食物-腸道菌群-腦腸軸，架起食物不耐受與神經精神疾病的橋梁，值得進一步研究。

綜上所述，通過本研究發現兒童食物不耐受現象廣泛存在。但是由于病情表現多種多樣[23-24]，并沒有引起家庭和社會的足夠重視，只有癥狀和疾病長期存在時，才會引起關注。目前常用的14種食物不耐受相應抗體檢測為臨床確診提供了一種可靠的檢測手段，而且性價比高，易于推廣。食物不耐受檢測具有指導膳食、消除隱患、未病先防、慢性篩查、飲食干預等重大意義，為患兒解除長期痛苦，提高生活質量。