RBP、CysC聯(lián)合檢測(cè)在糖尿病腎病早期診斷中的應(yīng)用效果

王 芳，金雪雯

1.上海市虹口區(qū)江灣醫(yī)院檢驗(yàn)科，上海 200430；2.上海市黃浦區(qū)中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院檢驗(yàn)科，上海 200010

糖尿病腎病(DN)是糖尿病最常見(jiàn)且最嚴(yán)重的微血管并發(fā)癥，臨床表現(xiàn)以蛋白尿、高血壓、水腫為主要特征。有資料表明，我國(guó)DN患者占終末期腎臟衰竭患者的5%，DN已經(jīng)成為老年糖尿病患者致殘、致死的主要原因之一[1]。因此，早期診斷、及時(shí)干預(yù)，對(duì)于延緩DN的進(jìn)展尤為重要，然而該病起病隱匿，進(jìn)展緩慢，機(jī)體代謝改變復(fù)雜，因此不易早期確診。目前臨床上常用肌酐(Scr)和尿素氮(BUN)作為診斷DN的指標(biāo)，靈敏度較差[2]。有研究表明，視黃醇結(jié)合蛋白(RBP)和血清胱抑素C(CysC)可作為反映腎功能的早期診斷指標(biāo)[3]。RBP屬于視黃醇物質(zhì)的載體蛋白，正常情況下較為穩(wěn)定，可以有效反映腎功能的損傷程度；CysC經(jīng)腎小球?yàn)V過(guò)最終被完全分解而不返回血液，因此不受年齡、性別、營(yíng)養(yǎng)狀況等因素的影響，比Scr和BUN能更靈敏地反映腎功能損傷情況[4-5]。本文以80例2型糖尿病患者和40例健康者為研究對(duì)象，旨在分析RBP、CysC聯(lián)合檢測(cè)在DN早期診斷中的應(yīng)用效果。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2018年1-12月上海市虹口區(qū)江灣醫(yī)院收治的80例2型糖尿病患者(病例組)和同期于上海市虹口區(qū)江灣醫(yī)院體檢中心參加體檢的40例健康者(對(duì)照組)為研究對(duì)象。病例組根據(jù)尿蛋白水平進(jìn)一步分為尿蛋白陰性組和尿蛋白陽(yáng)性組。對(duì)照組40例，其中男24例，女16例；年齡57～76歲，平均(64.86±7.48)歲；尿蛋白陰性組42例，其中男26例，女16例；年齡59～77歲，平均(65.11±5.15)歲；尿蛋白陽(yáng)性組38例，其中男22例，女16例；年齡58～76歲，平均(64.57±5.83)歲。對(duì)照組、尿蛋白陰性組和尿蛋白陽(yáng)性組患者年齡、性別構(gòu)成比比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。對(duì)照組患者24 h尿蛋白明顯低于尿蛋白陰性組和尿蛋白陽(yáng)性組(P<0.05)，且尿蛋白陽(yáng)性組24 h尿蛋白水平明顯高于尿蛋白陰性組(P<0.05)。見(jiàn)表1。本研究經(jīng)上海市虹口區(qū)江灣醫(yī)院倫理委員會(huì)審查通過(guò)，所有入組研究對(duì)象均了解本研究的目的及過(guò)程，且簽署知情同意書(shū)。

注：與對(duì)照組比較，*P<0.05；與尿蛋白陰性組比較，#P<0.05。

1.2納入與排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)尿蛋白陰性組和尿蛋白陽(yáng)性組患者均符合2010年美國(guó)糖尿病學(xué)會(huì)關(guān)于2型糖尿病的診斷標(biāo)準(zhǔn)[6]；(2)患者無(wú)泌尿系統(tǒng)感染；(3)近期未服用腎毒性藥物。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)合并原發(fā)性高血壓、心絞痛、腦血栓等疾病者；(2)合并其他代謝性疾病或腫瘤者；(3)合并精神系統(tǒng)疾病，依從性差者；(4)合并腎功能障礙者；(5)女性患者處于妊娠或哺乳期。

1.3方法 所有研究對(duì)象均于晨起空腹時(shí)采集外周靜脈血2～4 mL，加入含促凝劑的采血管中，3 500 r/min離心5 min分離血清。Scr、BUN、RBP和CysC均采用免疫比濁法經(jīng)日立7600全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定，試劑選擇普瑞柏品牌試劑。所有檢測(cè)試劑均在有效期內(nèi)，所有操作均由經(jīng)驗(yàn)豐富的技師操作完成。各指標(biāo)參考范圍如下：RBP，男性36～72 mg/L，女性22～53 mg/L；CysC為0.00～1.03 mg/L；Scr，男性57～97 μmol/L，女性41～73 μmol/L；BUN，男性3.1～8.0 mmol/L，女性2.6～7.5 mmol/L。當(dāng)兩種指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)時(shí)，其中任意指標(biāo)陽(yáng)性即為聯(lián)合檢測(cè)陽(yáng)性。

2 結(jié) 果

2.13組研究對(duì)象Scr、BUN、RBP和CysC水平比較 尿蛋白陽(yáng)性組和對(duì)照組Scr、BUN、RBP和CysC水平比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；尿蛋白陰性組與對(duì)照組間的比較，僅RBP和CysC水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，而Scr和BUN在兩組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)表2。

2.2尿蛋白陰性組和尿蛋白陽(yáng)性組患者Scr、BUN、RBP 和CysC陽(yáng)性率比較 尿蛋白陰性組RBP+CysC聯(lián)合檢測(cè)陽(yáng)性率和Scr+BUN聯(lián)合檢測(cè)陽(yáng)性率分別為61.90%和14.29%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；尿蛋白陽(yáng)性組RBP+CysC聯(lián)合檢測(cè)陽(yáng)性率和Scr+BUN聯(lián)合檢測(cè)陽(yáng)性率分別為94.74%和84.21%，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)表3。

表2 3組研究對(duì)象Scr、BUN、RBP和CysC水平比較

注：與對(duì)照組比較，*P<0.05。

表3 尿蛋白陰性組和尿蛋白陽(yáng)性組患者Scr、BUN、RBP和CysC陽(yáng)性情況比較[n(%)]

注：與同一組中Scr+BUN聯(lián)合檢測(cè)的陽(yáng)性率比較，▲P<0.05。

3 討 論

DN是一種糖尿病腎臟微血管并發(fā)癥，是導(dǎo)致慢性腎臟衰竭的主要原因，在我國(guó)已經(jīng)成為糖尿病致死主要原因之一[7]。臨床常用Scr和BUN來(lái)判斷腎功能，其水平可以反映腎小球的濾過(guò)功能，但由于腎臟的儲(chǔ)備和代償能力較強(qiáng)，因此在腎小球輕度受損時(shí)，Scr和BUN仍可表現(xiàn)正常，只有當(dāng)腎小球?yàn)V過(guò)率降低50%以上，腎小球損傷嚴(yán)重時(shí)，Scr和BUN才會(huì)升高，因此靈敏度較低，對(duì)腎功能損傷的反映能力較差[8-9]。此外，Scr和BUN還易受體質(zhì)量、炎性反應(yīng)等諸多因素影響，穩(wěn)定性較差。因此，探索靈敏度高的新標(biāo)志物作為DN早期診斷的檢測(cè)指標(biāo)尤為重要。

RBP是由肝臟合成并分泌的一種半衰期很短的運(yùn)載蛋白，僅由1條多肽鏈和碳水化合物組成，主要參與維生素A(視黃醇)由肝臟至靶組織的轉(zhuǎn)運(yùn)。RBP由于相對(duì)分子質(zhì)量較小，能夠經(jīng)腎小球?yàn)V過(guò)[10]。當(dāng)腎臟出現(xiàn)早期損傷，腎小球?yàn)V過(guò)率和腎血流量降低會(huì)導(dǎo)致血液中RBP的蓄積。因此，對(duì)血液RBP進(jìn)行檢測(cè)能夠及早反映腎臟濾過(guò)功能受損情況，并根據(jù)血液中RBP水平判斷腎臟損傷的程度。已有研究發(fā)現(xiàn)，RBP可作為反映腎臟早期損傷的重要蛋白標(biāo)志物，因此RBP檢測(cè)在DN的早期診斷和病情監(jiān)測(cè)中具有重要的臨床意義[11-12]。CysC屬于半胱氨酸蛋白酶抑制劑，在多數(shù)人體組織器官中表達(dá)恒定，不容易受年齡、性別、飲食及肌肉量等相關(guān)因素的影響，也不會(huì)受藥物及機(jī)體病理改變的影響[13]。CysC是一種低相對(duì)分子質(zhì)量、帶正電荷、堿性非糖化的蛋白質(zhì)，可被腎小球?yàn)V過(guò)后經(jīng)近曲小管重吸收，最終被代謝清除。由于CysC只能經(jīng)腎臟代謝，因此患者一旦出現(xiàn)腎功能損傷，即會(huì)表現(xiàn)為血清CysC水平的明顯升高，因此血清CysC能夠較為靈敏地反映腎小球?yàn)V過(guò)情況，對(duì)于診斷糖尿病患者腎組織早期或輕度損傷具有更高的靈敏度[14]。本研究結(jié)果顯示，尿蛋白陰性組的RBP和CysC水平明顯高于對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，而Scr和BUN水平與對(duì)照組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，尿蛋白陽(yáng)性組Scr和BUN水平高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。尿蛋白陰性組患者中RBP和CysC的陽(yáng)性率分別為35.71%和40.48%，而Scr和BUN的陽(yáng)性率僅為9.52%和7.14%，提示患者雖然尿蛋白檢查正常，但腎功能已經(jīng)有所下降，已出現(xiàn)早期DN，因此RBP和CysC的升高能夠更靈敏地反映糖尿病患者腎功能情況。

相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，糖尿病患者出現(xiàn)早期腎損傷時(shí)，RBP和CysC水平會(huì)出現(xiàn)明顯的改變，且其診斷陽(yáng)性率與Scr、BUN等指標(biāo)比較明顯提升，然而單一指標(biāo)檢測(cè)在診斷中存在一定的局限性，不利于排除一些腎外因素的影響，也不利于實(shí)現(xiàn)精準(zhǔn)診斷[15]。本研究中RBP和CysC在尿蛋白陰性組中的陽(yáng)性率雖然高于傳統(tǒng)的Scr和BUN的陽(yáng)性率，但仍較低；而兩者聯(lián)合檢測(cè)的陽(yáng)性率則高達(dá)61.90%，明顯高于Scr+BUN聯(lián)合陽(yáng)性率(14.29%)。鑒于本研究的樣本量有限，上述結(jié)果仍需大樣本研究來(lái)論證。

綜上所述，RBP、CysC在DN患者尿蛋白呈陰性時(shí)已有所升高，能較為靈敏地反映腎功能損傷情況，兩指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)有助于DN的早期診斷，從而盡早對(duì)患者進(jìn)行治療。