新生兒缺氧缺血性腦病血清IGF-1、GH、NGB水平與NBNA評分的相關性分析

新生兒缺氧缺血性腦病(HIE)指由于圍生期缺氧窒息導致腦組織缺血缺氧性損害，是新生兒的常見疾病，足月兒發病率較早產兒高，目前發病機制尚不清楚。HIE臨床表現主要為意識障礙、肌張力異常、原始反射消失、顱內壓升高及腦干癥狀，根據嚴重程度將HIE分為輕度、中度和重度。HIE導致神經系統損傷，部分HIE患兒伴有不同程度的神經系統后遺癥，如失神和腦癱[1-3]。新生兒行為神經學評分(NBNA)可用于全面評估新生兒神經系統，并一定程度反映HIE患兒腦損傷程度[4]。胰島素樣生長因子1(IGF-1)是一種活性多肽，在神經系統增殖和調節中起重要作用[5-6]；血清生長激素(GH)可影響IGF-1的表達和分泌，有研究表明，GH可影響新生兒神經系統發育[7-8]；神經球蛋白(NGB)可有效地結合氧分子，提高腦組織的氧利用率[9]。本研究旨在探討HIE患兒IGF-1、GH、NGB水平與NBNA評分的相關性。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選自2011年10月—2013年4月在我院新生兒科住院的60例HIE患兒，其中男32例，女28例。根據診斷標準將患兒分為輕度組(33例)、中度組(20例)和重度組(7例)，另選擇同期我院20名正常新生兒作為對照組，其中男10名，女10名。納入標準：孕齡37～42周；所有新生兒出生體重2500～4 000 g；所有HIE患兒均符合診斷標準；母親一般情況好；受試者無先天性畸形或代謝性疾病。排除標準：患兒死亡或父母拒絕配合；代謝性疾病引起的先天性腦部異常或抽搐；父母有吸毒史或吸煙史；不符合納入標準。所有患兒家長均簽署知情同意書，且本研究已通過我院倫理委員會認證批準。

1.2 標本采集 新生兒出生后第1天(急性期)和第14天(恢復期)收集清晨空腹靜脈血，取自凝血3 mL送檢，室溫靜置20 min后，以1 000 r/min離心5～10 min，將上層血清儲存于-90 ℃條件下。

1.3 酶聯免疫吸附試驗(ELISA)檢測血清IGF-1、NGB水平 嚴格按照試劑盒(R&D Systems，USA)實驗步驟操作，將標準品梯度稀釋，制作標準曲線。將血清樣本室溫下均勻混合，每個樣品做3個復孔；使用酶標儀在490 nm測定OD值；根據標準曲線計算血清IGF-1、NGB含量。

1.4 放射免疫分析法測定血清GH水平 嚴格按照試劑盒[Biofuge prime Heraeus(Porton Down，UK)]實驗步驟操作，采用放射免疫測定法檢測血清GH水平。將血清樣本室溫下均勻混合后，將130 IGH抗體100 μL和血清100 μL室溫孵育24～30 h；加入500 μL免疫分離劑并均勻混合，室溫孵育20 min；以4 000 r/min離心15 min并收集上清液。所有試管發射系數由科亞生物技術公司計算機自動分析并統計結果。

1.5 NBNA NBNA評分由經過培訓、操作熟練的專業醫師完成。測定要求在安靜、半暗及溫度26 ℃房間，喂奶后1 h進行，檢查時間為10 min，狀態不佳時可間隔。評分包括行為能力、主動肌張力、被動肌張力、原始反射和一般反應5個部分，共20項，每項按0～2分評分，總分40分。

2 結 果

2.1 4組一般資料比較(見表1)

注：4組各項比較，P>0.05。

2.2 4組血清IGF-1、NGB、GH水平比較 患兒血清IGF-1、NGB水平與HIE病情嚴重程度相關，患兒病情越重血清IGF-1水平越低，NGB水平越高，差異有統計學意義(P<0.05)；患兒血清GH水平與HIE病情嚴重程度相關性不大，差異無統計學意義(P>0.05)。詳見表2。

組別樣本量 IGF-1(ng/mL) 急性期緩解期 NGB(μg/mL) 急性期緩解期 GH(μg/mL) 急性期緩解期對照組2053.36±26.51 60.14±25.8279.56±23.2126.37±13.7828.81±15.1211.03±13.28輕度組3336.12±22.49①58.26±26.4088.63±44.9129.76±15.4529.16±14.9511.21±13.26中度組2029.22±13.68①41.39±27.02①②182.36±66.22①②95.35±35.36①②19.87±13.4518.37±12.34重度組718.73±13.01①24.15±14.56①②285.32±84.16①②③163.75±56.43①②③18.56±14.4315.76±14.29

與對照組比較，①P<0.05；與輕度組比較，②P<0.05；與中度組比較，③P<0.05。

2.3 4組NBNA評分比較(見表3)

表3 4組NBNA評分比較(±s) 單位：分

與對照組比較，①P<0.05；與重度組比較，②P<0.05。

2.4 HIE患兒血清IGF-1、GH和NGB水平與NBNA評分的相關性分析 急性期和恢復期HIE患兒血清IGF-1水平與NBNA評分呈正相關(r=0.542，P<0.05；r=0.684，P<0.05)；急性期和恢復期HIE患兒血清NGB水平與NBNA評分呈負相關(r=-0.650，P<0.05；r=-0.714，P<0.05)；急性期和恢復期HIE患兒血清GH水平與NBNA評分無相關性(r=-0.214，P>0.05；r=-0.176，P>0.05)。詳見表4。

表4 HIE患兒血清IGF-1、GH和NGB水平與NBNA評分的相關性分析

3 討 論

HIE是由于圍生期各種因素引起的新生兒腦組織缺氧，常見的原因包括羊水污染、妊娠期高血壓疾病或子癇、胎盤異常、臍帶異常[10-11]。中度及以上HIE可能引起腦癱和智力發育障礙，嚴重影響患兒生存質量，甚至危害生命健康。若早期發現并診斷HIE，采取適當的措施治療和干預，可有效減少HIE患兒出生，并降低HIE患兒圍生期死亡率[12-14]。

IGF-1是神經系統重要的調節因子，直接促進新生兒神經細胞生長和分化，可促進血管生成，營養神經

系統，間接降低神經細胞死亡率。有研究顯示，新生兒在子宮內或出生時出現缺氧缺血時，IGF-1可發揮保護神經系統作用。IGF-1通過不同機制保護HIE患兒神經系統，包括降低新生兒腦血管壓力和腦細胞死亡率。患有HIE時，新生兒自身產生反應，外周血清IGF-1通過特定通道轉運到腦細胞，從而有效防止病情進展[15-17]。NGB是一種在氧運輸中起作用的蛋白質，有研究表明，NGB可較大程度保護缺氧缺血性腦細胞，主要原因是在缺氧缺血情況下，NGB具有高親和力，有效結合氧，以維持神經系統的正常功能。HIE發生時，身體產生一系列有毒物質，如一氧化氮等，NGB可有效去除有毒物質并保護神經系統[9]。有研究顯示，GH對神經細胞有維持作用，且GH影響IGF-1的合成和分泌[8]，但未表明GH是否與HIE嚴重程度相關。

本研究對輕度、中度、重度HIE患兒與對照組血清IGF-1、NGB、GH水平進行兩兩比較，發現患兒血清IGF-1、NGB水平與HIE病情嚴重程度相關，病情越重患兒血清IGF-1水平越低，NGB水平越高，差異有統計學意義(P<0.05)；患兒血清GH水平與HIE病情嚴重程度相關性不大，差異無統計學意義(P>0.05)。急性期和恢復期HIE患兒血清IGF-1水平與NBNA評分呈正相關(r=0.542，P<0.05；r=0.684，P<0.05)；急性期和恢復期HIE患兒血清NGB水平與NBNA評分呈負相關(r=-0.650，P<0.05；r=-0.714，P<0.05)；急性期和恢復期HIE患兒血清GH水平與NBNA評分無相關性。

HIE是一種復雜的臨床疾病，不能通過單一指標判斷患兒病情嚴重程度和估計預后，應通過臨床表現、體格檢查、實驗室檢查、影像檢查，對患兒進行全面評估和分析[18-20]。本研究發現HIE與正常新生兒血清IGF-1和NGB水平比較，差異有統計學意義，且與NBNA評分有關(P<0.05)，提示HIE患兒血清IGF-1和NGB水平可能與病情嚴重程度有關，可能預測HIE患兒預后，但其敏感性和特異性仍需進一步深入研究。