黃芪免煎顆粒與其傳統飲片主要成分含量對比分析

倪晶瑩 張慧霖 陳璟巧

福建省廈門市中醫院 361000

中藥黃芪[Astragalus membranaceus(Fisch.)Bge]是豆科植物蒙古黃芪或膜莢黃芪的根。其味甘，性微溫；歸脾、肺經。健脾補中、升陽舉陷、益衛固表、利尿、托毒生肌，可謂補氣要藥。現代研究顯示，黃芪化學成分主要含苷類、多糖、黃酮、氨基酸、微量元素等。而2015版《中國藥典》規定，對黃芪的含量進行測定，以黃芪甲苷作為主要指標成分。可以說，無論是醫生臨證遣方抑或日常養生保健，黃芪都非常常用。但傳統中藥黃芪飲片煎煮時相較耗時費力，遠行攜帶及服用亦有諸多不便。而作為新興劑型的免煎顆粒，具有用量準確、攜帶方便、患者用藥依從性高等優勢，受到醫生及患者的青睞。免煎顆粒黃芪能否代替傳統飲片發揮療效呢？本文對比分析黃芪免煎顆粒與其傳統飲片，探究其主要成分含量與穩定性，具體如下。

1 材料與方法

1.1 儀器 高效液相色譜儀(型號：LC-2010AHT，廠家：日本島津公司)，色譜柱(型號：C18，廠家：菲羅門科學儀器有限公司，4.6mm×250mm)。

1.2 藥材 黃芪傳統飲片(安國宏仁藥業有限公司,批號：201905001-3)，黃芪免煎顆粒(江陰天江藥業有限公司，批號：19071991)。

1.3 試劑 黃芪甲苷對照品(中國食品藥品檢定研究院，批號110781-201616，純度>97.4%)，色譜純：乙腈、甲醇，其他試劑均為分析純。

2 黃芪免煎顆粒與其傳統飲片中黃芪甲苷檢測方法與結果

2.1 對照品溶液制備 稱取適量黃芪甲苷對照品，利用甲醇進行溶解，定容0.27mg/ml。

2.2 色譜條件 C18色譜柱、甲醇水(30∶70)、流動相、流速1.0ml/min、柱溫為室溫、檢測波長設置203nm。

2.3 線性關系分析 分別吸取1.0ml、2.0ml、3.0ml、4.0ml、5.0ml對照品溶液，并置入100ml容量瓶內，采用甲醇進行稀釋后定容，通過微孔濾膜(0.45μm)過濾后，進樣測定；將黃芪甲苷進樣量作為橫坐標，其峰面積作為縱坐標，在坐標上繪制標準曲線圖，并計算相關系數與回歸方程，r=0.999 8，Y=1 787 338.4X-301.01，顯示黃芪甲苷含量在0.028～0.136μg范圍內，并與其峰面積呈良好線性關系。

2.4 穩定性試驗 室溫環境下，黃芪免煎顆粒樣品溶液分別在配制后即刻、2h、6h、8h、12h內進行含量檢測，在色譜條件下進行6次，計算黃芪甲苷含量RSD=1.89%，結果顯示黃芪甲苷含量在12h內處于穩定狀態。

2.5 精密度試驗 吸取10μl黃芪甲苷對照品溶液，在色譜條件下重復進樣共6次，詳細記錄峰面積，準確計算黃芪甲苷含量RSD=1.32%，結果說明方法符合精密度檢測標準。

2.6 供試品溶液制備 稱取10g黃芪免煎顆粒、100g黃芪飲片，蒸餾水溶解黃芪免煎顆粒，并進行定容100ml；將傳統黃芪飲片粉碎成微小粗粒，過14目篩后，將8倍量蒸餾水加入黃芪飲片粗粒中，煎煮3次，40min/次，煎煮后過濾，將3次煎煮溶液混合均勻過濾，水浴濃縮，溶液恢復至室溫后利用蒸餾水進行定容100ml，吸取傳統黃芪飲片溶液進行制備，最終定容為100ml供試品溶液；依次吸取20ml供試品溶液，水飽和正丁醇進行4次萃取，分別為20ml、20ml、10ml、10ml，將其混合，并加入氫氧化鈉溶液(0.5%)內充分洗滌3次，分別為20ml、20ml、40ml，去除堿液層，促使正丁醇揮干，甲醇溶解剩余殘渣，并定容50ml。

2.7 回收率試驗 精密稱取適量已知黃芪甲苷含量的黃芪免煎顆粒共5份，加入黃芪甲苷對照品溶液，根據試劑制備方法進行制備，并吸取10μl進樣檢測，結果顯示加樣回收率=95.96%，RSD=5.4%。

2.8 供試品溶液檢測 上述已制備供試品溶液通過微孔濾膜(直徑0.45μm)過濾后，10μl進樣進行含量測定，記錄色譜峰面積，每個供試品溶液進行3次測定，求取黃芪甲苷、毛蕊異黃酮葡萄糖苷含量的平均值，結果見表1。

表1 黃芪甲苷、毛蕊異黃酮葡萄糖苷含量試驗結果

2.9 影響因素試驗 將黃芪免煎顆粒、傳統飲片置于高濕、高溫、強光條件下進行儲存，分別于0d及存儲7d、14d進行黃芪甲苷含量測定，黃芪免煎顆粒與傳統飲片黃芪甲苷含量相比無顯著差異(P>0.05)，結果見表2。

表2 黃芪甲苷影響因素試驗結果

2.10 加速試驗 分別將黃芪免煎顆粒、傳統飲片置于加速條件中，即濕度(75±5)%RH、溫度(40±5)℃下進行儲存，并在儲存即刻、第1個月、第3個月、第6個月時分別對黃芪甲苷含量進行考察，黃芪免煎顆粒與傳統飲片黃芪甲苷含量相比無顯著差異(P>0.05)，結果見表3。

3 討論

近年來，隨著我國中藥制劑管理不斷科學化、規范化，國家食品藥品監督管理局公布了《中藥配方顆粒管理暫行規定》，明確規定中藥免煎顆粒歸類為傳統中藥飲片管理范圍[1]。與傳統中藥飲片抓藥調劑相比，中藥免煎顆粒具有取藥時間短、干凈衛生、配藥精準、可隨身攜帶、便于儲存、患者用藥依從性高等特點，在中醫臨床應用中具有良好價值[2]。

表3 加速試驗黃芪甲苷含量

多方研究發現，中藥免煎顆粒受不同原輔料供應商、不同制備工藝、多樣化質量標準等因素影響，造成其與傳統中藥飲片在主要含量、臨床療效、穩定性方面存在一定差異[3-4]。因此，中藥免煎顆粒能否完全代替傳統飲片仍需進一步印證。經Meta分析可知，在中藥免煎顆粒與中藥飲片臨床療效對比研究中發現，中藥免煎顆粒在疾病治療中有效率更高，中藥免煎顆粒應用于中醫臨床治療中，具有一定價值[5]。

中藥免煎顆粒是在傳統飲片基礎上演變而來的新型中藥制劑，為中藥湯劑劑型改革的創新性嘗試。本試驗將黃芪免煎顆粒作為研究對象，黃芪免煎顆粒是中草藥黃芪研制而成的純中藥顆粒藥劑，具有補氣固表、增強機體免疫力等作用，主要應用于自汗、氣短心悸、體虛浮腫、久瀉、癰疽難潰，創口久不愈合等疾病治療中；同時相比傳統中藥飲片，具有攜帶方便、無須長時間煎煮等優勢。此外，黃芪主要成分有皂苷、黃酮、多糖等，除皂苷類物質黃芪甲苷外，黃酮類物質毛蕊異黃酮葡萄糖苷也是其活性及含量較高成分，具有降血脂、抗病毒等作用[6-7]。因此，在探究黃芪主要成分黃芪皂苷時，增加對毛蕊異黃酮葡萄糖苷含量檢測，有助于提升黃芪免煎顆粒與其傳統飲片主要成分含量對比的準確性。本研究通過紫外光區波長掃描得知，黃芪甲苷在203nm波長時存在較強吸收性，且噪音影響較小；同時利用不同堿性溶液萃取、水飽、大孔樹脂柱分離純化等技術對黃芪免煎顆粒、傳統飲片進行處理分析，并采用正丁醇、水飽進行萃取，結果發現，黃芪免煎顆粒中黃芪甲苷、毛蕊異黃酮葡萄糖苷含量略低于傳統飲片，其原因可能在于中藥飲片煎煮過程中各成分含量間存在增溶效應。但總言之，二者相比，差異無統計學意義(P>0.05)。且中藥免煎顆粒在制備過程中經過噴霧干燥、優化低溫濃縮等系列中醫制藥工藝流程，保證了中藥成分含量溶出率，減少有效成分流失，確保中藥飲片主要成分含量。此外，本研究經穩定性試驗、加速試驗可知黃芪免煎顆粒樣品黃芪甲苷含量在12h內處于穩定狀態，并在高溫、高濕、強光狀態、40℃、75%RH加速條件下較為穩定，可見黃芪免煎顆粒中黃芪甲苷的含量受環境因素影響較小，穩定性良好，臨床應用中具有一定價值。

綜上所述，黃芪免煎顆粒與其傳統飲片主要成分黃芪甲苷含量差異不大，筆者認為黃芪免煎顆粒代替傳統飲片具有一定科學依據，并在確保治療效果的同時，實現良好藥學價值。