不同病理類型胃息肉幽門螺桿菌感染及其與黏膜組織內HIF-1α表達的相關性

陳光遠，劉星群，王秀艷

(內蒙古自治區人民醫院體檢科，呼和浩特 010017)

胃息肉是臨床常見的由于黏膜或腺體上皮過度增生所產生的良性腫瘤，其具有癌變傾向，其中腺瘤性息肉癌變性最高。依據病理組織學特征，胃息肉可分為腺瘤性息肉、炎性息肉、胃底腺息肉及增生性息肉[1-2]。目前，關于胃息肉的發病原因尚未完全明確。研究顯示，幽門螺桿菌(Helicobacter pylori，Hp)感染與胃息肉有一定聯系[3]。臨床上，胃鏡下胃息肉的檢出率并不高，僅為1.2%～5.0%[4]。部分上消化道疾病的發生與Hp感染關系密切，為胃十二指腸潰瘍及慢性胃炎的主要致病因素；同時有研究證實，Hp感染與胃癌、胃黏膜相關淋巴組織淋巴癌的發生密切相關[5]。缺氧誘導因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)屬于氧依賴性基因表達調節轉錄因子家族，同時也是缺氧時血管所形成的核心調控因子。在機體胃黏膜炎癥發展過程中，Hp感染所引起氧自由基對胃黏膜長期慢性刺激形成低氧環境，能激活HIF-1α，而HIF-1α又能激活血管內皮生長因子，加速微血管產生與細胞增殖。腺瘤性息肉已被認為是癌前疾病之一，有學者認為增生性息肉也可轉變為惡性腫瘤，內鏡下所觀察到的胃底腺息肉可能是散發性的，也可能與家族性腺瘤性息肉病相關，散發性胃底腺息肉的惡化轉化風險小，且極少發生異型增生，但與家族性腺瘤性息肉病相關的胃底腺息肉，其異型增生可高達25%～41%[6]。本研究旨在分析不同病理類型胃息肉Hp感染及其與黏膜組織內HIF-1α表達的相關性。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2017年2月至2019年2月在內蒙古自治區人民醫院接受治療且經胃鏡檢測確診為胃息肉的124例患者作為胃息肉組，其中腺瘤性息肉10例、炎性息肉19例、胃底腺息肉33例、增生性息肉62例。選取同期100例慢性胃炎患者作為胃炎組。胃息肉組男75例、女49例，年齡25～70歲，平均(51±5)歲。胃炎組男56例、女44例，年齡22～72歲，平均(50±5)歲。兩組患者的性別、年齡比較差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。本研究經內蒙古自治區人民醫院倫理委員會批準。

1.2納入與排除標準 納入標準：①胃息肉經組織病理學及胃鏡檢測確診，慢性胃炎經胃鏡檢測與臨床表征確診；②首次行胃鏡檢測；③無胃鏡檢測禁忌證者；④患者或家屬簽署知情同意書。排除標準：①胃鏡檢測合并癌變、潰瘍及糜爛者；②近2周使用過質子泵抑制劑或H2受體阻滯劑等抑酸劑；③近4周使用過抗菌藥物或鉍劑者。

1.3方法 兩組患者的胃黏膜組織行組織活檢及改良吉姆薩染色法鏡檢，檢測其Hp感染情況及胃黏膜組織內HIF-1α信使RNA(messenger RNA，mRNA)的表達。采用蛋白質印跡法檢測HIF-1α蛋白表達，常規提取細胞總蛋白，上樣電泳，80 V電壓，溴酚藍染料至分離膠提高電壓為100 V，分離膠下泳出溴酚藍結束電泳。聚偏二氟乙烯膜內進行蛋白質電轉移，30 mA恒流，持續80 min。5% TBST(Tris-buffered saline and Tween)脫脂奶粉封閉聚偏二氟乙烯膜，震蕩50 min。封閉結束后洗膜3次，每次10 min，膜移至雜交袋，置入漂洗液稀釋抗體，孵育過夜。洗膜3次，每次10 min，置入過氧化物酶標記二抗，震蕩50 min。在二抗中將聚偏二氟乙烯膜溫育6 min，依次曝光、顯影、定影。清水沖洗，晾干掃描，利用IPP軟件對掃描圖像目的條帶行灰度分析。

1.4觀察指標 比較兩組患者的Hp感染率，胃息肉組患者不同部位、不同病理類型胃息肉的Hp感染情況；比較兩組患者胃黏膜組織內HIF-1α蛋白與mRNA的表達；不同病理類型胃息肉Hp感染與黏膜組織內HIF-1α表達的相關性。

2 結 果

2.1兩組患者的Hp感染率比較 胃息肉組的Hp感染率為48.39%(60/124)，胃炎組為79.00%(79/100)，胃息肉組的Hp感染率低于胃炎組(χ2=6.182，P=0.006)。

2.2胃息肉組患者不同部位、不同病理類型胃息肉的Hp感染情況 在胃息肉不同部位中，胃竇的Hp感染率為62.96%(34/54)，賁門為36.36%(4/11)，胃角為40.00%(2/5)，胃體為40.00%(12/30)，胃底為33.33%(8/24)。在不同病理類型的胃息肉中，腺瘤性息肉的Hp感染率為30.00%(3/10)，炎性息肉為68.42%(13/19)，胃底腺息肉為15.15%(5/33)，增生性息肉為62.90%(39/62)。

2.3兩組患者胃黏膜組織內HIF-1α蛋白與mRNA的表達比較 胃息肉組胃黏膜組織內HIF-1α蛋白與mRNA的表達量分別為(62.71±4.50)%、(43.18±1.37)%，均高于胃炎組(t=64.449,214.916，均P<0.001)，胃息肉組不同病理類型與胃炎組HIF-1α蛋白和mRNA的表達量比較差異有統計學意義(P<0.05)，且炎性息肉、胃底腺息肉、增生性息肉患者HIF-1α蛋白與mRNA的表達量均低于腺瘤性息肉患者(P<0.05)。見表1、圖1。

組別例數HIF-1α蛋白表達量HIF-1α mRNA表達量胃息肉組 腺瘤性息肉1092.17±4.2686.15±1.82 炎性息肉1933.15±4.09a30.18±1.40a 胃底腺息肉3338.42±4.14a35.57±1.26a 增生性息肉6259.06±4.08a55.67±1.69a胃炎組10024.19±4.384.62±1.29F值34.10239.176P值<0.001<0.001

HIF-1α：缺氧誘導因子-1α；mRNA：信使RNA；a與腺瘤性息肉比較，P<0.05

2.4相關性分析 Spearman相關性分析結果顯示，不同病理類型胃息肉患者的Hp感染率與HIF-1α的表達無相關性(r=0.055，P=0.219)。

HIF-1α：缺氧誘導因子-1α

3 討 論

胃息肉是由于黏膜或腺體上皮過度增生所產生的良性腫瘤，其中腺瘤性息肉癌變性最高。胃息肉可分成腺瘤性息肉、炎性息肉、胃底腺息肉及增生性息肉，目前關于胃息肉的發病原因尚未完全明確，Hp感染與胃息肉有一定聯系。臨床上，胃鏡下胃息肉的檢出率并不高，部分上消化道疾病的發生與Hp感染密切相關，同時胃癌、胃黏膜相關淋巴組織淋巴癌的發生也與Hp感染密切相關。胃息肉由細胞間質成分和上皮細胞增生形成，患者無特異性表征，一般為腹痛腹脹，且多數患者是在胃鏡下偶然發現胃息肉[7]。但腺瘤性息肉會造成癌變，所以臨床應引起足夠的重視。臨床確診胃息肉多根據組織病理學檢測，目前依據第4版消化系統腫瘤世界衛生組織標準胃息肉分為非腫瘤性息肉、腫瘤性息肉，后者含神經內分泌腫瘤、腺瘤性息肉及胃底腺息肉等，非腫瘤性息肉包含幼年性息肉、增生性息肉、錯構瘤性息肉及炎性纖維性息肉等。其中，腺瘤性息肉的臨床惡變率高達6%～47%[8]。

本研究結果顯示，胃息肉組的Hp感染率低于胃炎組(P<0.05)，說明胃炎患者合并Hp的概率高于胃息肉患者，可能是Hp感染導致了胃炎的發生；在胃息肉不同部位中，胃竇的Hp感染率高于賁門、胃角、胃體及胃底，說明起于胃黏膜上皮細胞凸入胃內的隆起性病變的胃息肉高發于胃竇部位；在胃息肉患者不同病理類型胃息肉中，增生性息肉、炎性息肉的Hp感染率高于胃底腺息肉，這與既往研究[9]結果一致，提示增生性息肉可能與慢性活動性胃炎及伴隨Hp感染有直接聯系。但有研究顯示，消除Hp感染后胃底腺息肉出現復發情況，表明Hp感染對于胃底腺息肉的發展可能有抑制作用[10]。胃底息肉一般在Hp感染相關性胃炎或慢性萎縮性胃炎外正常的胃黏膜區域內發生，而增生性息肉產生通常與各種類型的慢性胃炎有關，特別是Hp相關性胃炎和萎縮性胃炎。雖然行Hp感染根治治療可能使息肉消失，但其相關機制仍需探究。有研究顯示，胃癌、胃炎和消化性潰瘍等發病與Hp感染密切相關[11]。Hp為第一類致癌因子，其導致胃癌的可能因素有：①Hp與病毒類似，它將DNA內一些片段進駐至宿主細胞內，導致宿主細胞出現變化；②Hp代謝產物轉變成黏膜類型；③Hp能夠導致炎癥反應發展為急性毒性[12-14]。有研究顯示，氧含量低于6%時HIF-1α才會表達，且伴隨氧含量下降其表達逐步增加，當無氧或氧氣含量為0.1%～0.2%時，HIF-1α的表達會明顯增加[15-18]。

胃黏膜慢性炎癥是指由多種因素引起的慢性息肉，而此類炎癥的主要致病菌為Hp。這種致病菌在慢性淺表性息肉中的檢出率遠高于其他致病菌，可高達80%。由于消化淺表性息肉高發病率、高感染率的特征，已成為臨床較為常見的消化性疾病。該類疾病的主要誘因為病原體感染、膽汁反流、熬夜或長期的不良飲食習慣等。患有該病的患者常有疝氣、腹痛、胃酸反流、腹部腫脹等臨床癥狀，對患者進行胃鏡檢查可發現胃黏膜充血、水腫等。此外，Hp在萎縮性息肉患者中也有較高的檢出率。血管內皮生長因子為特異性較高血管內皮細胞的有絲分裂素，為血管生成的主要促進因子，在多個層次HIF-1α均可對血管內皮生長因子表達進行調控。同時，HIF-1α還可誘導環加氧酶2，環加氧酶2與其形成的前列腺素均能通過轉化生長因子-β、堿性成纖維細胞生長因子、胰島素樣生長因子、表皮生長因子及血小板源生長因子等調節血管生成，從而加速腫瘤細胞的生長和轉移。本研究結果顯示，胃息肉組胃黏膜組織內HIF-1α蛋白與mRNA的表達量均高于胃炎組，且胃息肉組不同病理類型間HIF-1α蛋白與mRNA的表達量比較差異有統計學意義(P<0.05)；同時，炎性息肉、胃底腺息肉、增生性息肉患者HIF-1α蛋白與mRNA的表達量均低于腺瘤性息肉患者(P<0.05)，與相關研究[19-21]結論一致。這說明，Hp感染對胃黏膜長期慢性刺激形成低氧環境能激活HIF-1α，同時增加mRNA的表達，通過調控血管內皮生長因子加速微血管產生與細胞增殖，促進胃息肉生成。

綜上可知，不同病理類型胃息肉患者的Hp感染情況不同，但HIF-1α表達與Hp感染之間的關系及其對胃息肉的影響還需進一步探究。