臨床體液檢驗技術要求

中華人民共和國國家衛生健康委員會

1 范圍

本標準規定了腦脊液、漿膜腔積液、關節腔積液、糞便、精液和陰道分泌物等體液標本臨床檢驗的技術要求。

本標準適用于開展上述類型體液標本檢測的臨床實驗室。

2 腦脊液檢驗技術要求

2.1 標本采集、轉運和貯存

2.1.1 實驗室應與臨床共同討論并制訂腦脊液標本采集和處理的標準操作程序。

2.1.2 臨床醫生應在申請單上注明腦脊液標本采集部位(如腰椎或腦室)的相關信息。

2.1.3 腦脊液標本采集宜使用無菌試管(用于細胞學檢查的標本不宜使用玻璃材質的容器)，若能采集足量標本，應將其分裝至3～4支試管，每管宜取3～5 mL，一般無需使用抗凝劑。

2.1.4 第1管用于化學和免疫學檢查(如蛋白質、葡萄糖等)，第2管用于微生物學檢查，第3管用于細胞計數和分類計數。如需要做其它檢查(細胞病理學檢查等)，宜采集第4管標本。若第1管混有穿刺出血，不可用于以蛋白質檢查作為主要依據的疾病診斷(如多發性硬化癥)。

2.1.5 若無法采集足量標本，可不進行分裝，由醫生決定檢查項目；若需要進行微生物學檢查，宜優先進行，再盡快進行其他檢查。

2.1.6 腦脊液標本應在室溫條件下盡快運送，細胞計數和分類計數宜在1 h內完成檢查，以免細胞破損。只有用于蛋白質和核酸分析的標本，可貯存于冷凍條件下(-20℃以下)。

2.1.7 腦脊液微生物學檢查標本不可冷藏，在室溫條件下立即送檢或在患者床旁接種。

2.2 理學檢查 腦脊液理學檢查主要包括顏色、透明度和凝固性等。實驗室應規定腦脊液理學檢查指標描述和報告的規范用語。

2.3 化學和免疫學檢查

2.3.1 腦脊液化學檢查主要包括葡萄糖、蛋白質、氯化物、酶學測定和蛋白電泳等，免疫學檢查主要包括免疫球蛋白、髓鞘堿性蛋白測定等。

2.3.2 實驗室應注意各項目不同原理檢測方法的靈敏度和特異度差異，選擇適宜的方法開展檢測。2.3.3 進行腦脊液葡萄糖、白蛋白和免疫球蛋白測定時，宜同時檢測血清中的相應物質，計算腦脊液/血清葡萄糖比值、腦脊液/血清白蛋白商(Qalb)、腦脊液/血清IgG商(QIgG)及IgG指數(即QIgG與Qalb比值)。

2.4 細胞學檢查

2.4.1 手工法細胞計數

2.4.1.1 宜使用標注容積的血細胞定量計數板進行細胞計數，包括細胞總數、紅細胞計數、有核細胞計數和有核細胞分類計數。

2.4.1.2 外觀正常的標本無需稀釋，渾濁和血性標本需進行1∶10～1∶200倍稀釋，稀釋倍數甚至更高(需要時)。進行細胞計數時可使用等滲鹽水稀釋標本；進行有核細胞計數時，可使用3%冰醋酸對標本進行處理。

2.4.1.3 細胞計數按以下程序進行。a)將標本充分混勻，充液前可用旋轉式攪拌器混勻(時間不能超過2～5 min)或手工顛倒混勻10～15次，避免過度震蕩造成細胞破損，也不能產生氣泡。b)分別吸取少量充分混勻的標本，充入計數板兩側的計數池(應確保計數板潔凈)，靜置5～10 min(時間長短取決于細胞沉淀的效果)。c)使用低倍鏡(10×)瀏覽細胞分布情況，細胞分布應均勻(每個大方格內細胞數量相差宜不超過10個)，細胞應無重疊，否則宜重新充液。d)在高倍鏡(40×)下選擇合適的區域盡快進行細胞計數。每個計數池細胞計數區域的確定原則是：若初步估計9個大方格中細胞數少于200個，則計數9個大方格(計數區域相當于9 mm2)；若估計 9個大方格中細胞數大于200個，則計數4個角的大方格(計數區域相當于4 mm2)；若估計1個大方格中細胞數大于200個，則計數中央大方格內4個角和中央1個中方格(計數區域相當于0.2 mm2)。計數壓線細胞時，應遵循“數上不數下，數左不數右”的原則。

2.4.1.4 紅細胞計數和有核細胞計數宜在同一計數池中完成，取兩個計數池計數結果的均值進行報告。

2.4.2 儀器法細胞計數 儀器法細胞計數的要求見附錄A。

2.4.3 細胞形態學檢查

2.4.3.1 應在標本采集后4 h內完成細胞涂片，若超過4 h，結果報告時宜標注“細胞分類計數結果可能不可靠”。

2.4.3.2 宜使用細胞離心涂片機(細胞甩片機)制備涂片進行細胞形態學檢查，滴加標本前先向甩片機的標本室中加入1滴22%白蛋白溶液(無菌)，可增強細胞對載玻片的粘附性。

2.4.3.3 涂片制備后應置于室溫條件自然晾干，宜進行改良瑞氏染色。

2.4.3.4 進行細胞形態檢查時，應能正確識別：成熟紅細胞、有核紅細胞；中性粒細胞、嗜酸性粒細胞、嗜堿性粒細胞、肥大細胞；淋巴細胞、反應性淋巴細胞、漿細胞；單核細胞、巨噬細胞；腦室內襯細胞、柔腦膜細胞；惡性腫瘤細胞(原始細胞、淋巴瘤細胞、非造血系統腫瘤細胞等)；細菌、真菌和寄生蟲等。

2.4.3.5 應對有核細胞(包括各類造血細胞、內襯細胞、腫瘤細胞和非典型細胞)進行分類計數，計數結果以百分比報告。細胞類型無法確定時，可將其歸入“非典型細胞”，并在報告中加以描述。

2.4.3.6 懷疑惡性腫瘤時，應全片查找腫瘤細胞，發現疑似腫瘤細胞時應及時通知臨床進一步做細胞病理學檢查。

2.5 病原學檢查

2.5.1 涂片檢查 對混濁或膿性腦脊液可直接涂片，染色鏡檢。對無色透明或無明顯混濁的腦脊液，應使用細胞離心涂片機(細胞甩片機)離心。將腦脊液標本離心取沉淀物進行涂片，經革蘭染色查找肺炎鏈球菌、葡萄球菌和鏈球菌等，亞甲藍染色查找腦膜炎奈瑟菌，抗酸染色查找結核分枝桿菌，墨汁染色查找隱球菌。對于疑似寄生蟲感染的患者，應注意查找吸蟲卵、阿米巴滋養體和絳蟲囊尾蚴等。

2.5.2 病原體培養 選擇合適的培養基、培養條件進行普通細菌、苛養菌、結核分枝桿菌或真菌培養，臨床懷疑腦膿腫時宜進行厭氧菌培養。所有進行培養的腦脊液宜同時進行病原菌的涂片檢查。2.5.3 抗原檢測 可檢測腦膜炎奈瑟菌、肺炎鏈球菌、隱球菌等病原菌抗原，檢測結果宜與涂片檢查和病原培養結果一起解釋，腦脊液隱球菌抗原陽性有確診意義；其他抗原陽性是重要診斷提示，宜結合病史、臨床表現、腦脊液其他檢查(細胞學、涂片和培養、化學等)綜合判斷。

2.5.4 核酸檢測 必要時，實驗室可采用PCR等分子生物學方法檢測結核分枝桿菌、腦膜炎奈瑟菌等病原菌核酸。

3 漿膜腔積液檢驗技術要求

3.1 標本采集、轉運和貯存

3.1.1 漿膜腔積液包括胸水、腹水、心包腔積液等，實驗室應與臨床共同制訂標本采集和處理的標準操作程序，并向臨床提供正確的標本采集容器和抗凝劑(必要時)。不同檢查項目的標本采集要求見表1。

3.1.2 標本應在室溫條件下盡快送檢；細胞計數和分類計數的標本應盡快檢測，若無法及時檢測，染色后的標本置于2～8℃條件下保存，宜48 h內完成檢測。

3.2 理學檢查 漿膜腔積液理學檢查主要包括顏色、透明度和凝固性等。實驗室應規定漿膜腔積液理學檢查指標描述和報告的規范用語。

表1 漿膜腔積液標本采集要求

3.3 化學和免疫學檢查

3.3.1 漿膜腔積液化學檢查主要包括蛋白質、乳酸、葡萄糖和酶學測定等；免疫學檢查主要包括腫瘤標志物、免疫球蛋白測定等。

3.3.2 葡萄糖測定應在標本采集后1 h內完成，無法及時檢測的標本應用氟化鈉抗凝管采集；其他化學檢查宜在2 h內完成；宜同時檢測血清標本中的相應物質并進行比較。

3.3.3 嚴重化膿標本不宜進行pH檢測。

3.4 細胞學檢查

3.4.1 漿膜腔積液細胞學檢查主要包括細胞計數和分類計數等。

3.4.2 細胞數量過多、渾濁或血性標本宜用等滲鹽水進行稀釋；有凝塊的標本不能用于細胞計數和分類計數，但可用于細胞病理學檢查，需先輕輕攪動凝塊釋出細胞并進行洗滌處理。

3.4.3 細胞計數方法可參見2.4.1.3。

3.4.4 細胞分類計數宜采用細胞離心法制備涂片，應先洗滌細胞，以提高涂片中的細胞數量并保持細胞形態。涂片自然干燥，宜使用改良瑞氏染色方法染色后進行細胞分類計數，發現可疑惡性細胞時，應及時通知臨床送細胞病理學檢查；發現結晶時，應在報告中注明。

3.5 病原學檢查 懷疑感染時，所有標本應進行革蘭染色涂片和培養。懷疑厭氧菌感染，則加做厭氧菌培養；腹水、肝膿腫穿刺液宜常規進行厭氧菌培養。懷疑寄生蟲感染時，應將標本離心后取沉渣進行涂片，宜使用改良瑞氏染色方法進行檢查，查找有無微絲蚴、包蟲棘球蚴頭節和小鉤、阿米巴滋養體等。

4 關節腔積液檢驗技術要求

4.1 標本采集、轉運和貯存

4.1.1 實驗室應與臨床共同制訂關節腔積液標本采集和處理的標準操作程序，并向臨床提供正確的標本采集容器和抗凝劑。

4.1.2 采集多管標本時，第1管應使用無抗凝劑試管，宜采集4 ～5 mL，并觀察是否凝固，離心取上清液做化學和免疫學檢查(如葡萄糖、白蛋白和脂類，類風濕因子和補體測定等)；第2管應使用肝素鈉(25 U/ mL)或EDTA溶液抗凝，用于細胞計數、分類計數和結晶鑒定時宜采集1～3 mL，如同時做細胞病理學檢查時宜采集4～5 mL，使用肝素鋰、草酸鹽或EDTA粉末抗凝，可能影響結晶檢查結果；第3管應使用肝素(25 U/mL)抗凝、也可以采用多聚茴香腦磺酸鈉(SPS)抗凝劑或無抗凝劑試管，宜采集4～5 mL，用于微生物學檢查。

4.1.3 當標本量較少難以完成所有檢查時，應及時與臨床進行溝通，不宜拒收標本。

4.1.4 標本應在室溫條件下盡快送檢并完成檢查。

4.2 理學檢查 關節腔積液理學檢查主要包括顏色、透明度、黏稠度及凝固性等。實驗室應規定關節腔積液理學檢查指標的描述和報告的規范用語。

4.3 化學和免疫學檢查

4.3.1 關節腔積液化學檢查主要包括葡萄糖、尿酸、乳酸、脂類和蛋白質測定等，免疫學檢查主要包括自身抗體和類風濕因子等；進行化學和免疫學檢查時宜同時檢測血清標本中的相應物質并進行比較。

4.3.2 葡萄糖測定應在1 h內完成，無法及時檢測的標本應使用氟化鈉抗凝管采集。

4.4 細胞學和結晶檢查

4.4.1 標本處理

4.4.1.1 關節腔積液較為粘稠，宜使用等滲鹽水或透明質酸酶緩沖液對標本進行處理，如每毫升關節腔積液加透明質酸酶400單位，置于37℃孵 育10 min。

4.4.1.2 細胞數量過多、渾濁或血性標本宜用等滲鹽水進行稀釋；進行有核細胞計數時，可使用低滲性鹽水(0.3%)破壞紅細胞，但不可使用乙酸，以免形成黏蛋白凝塊影響鏡檢。

4.4.2 涂片檢查 宜使用細胞離心法制備濕片和染色涂片(涂片自然晾干后用甲醇固定至少5 min)，宜使用改良瑞氏染色方法，進行細胞學和結晶檢查。宜使用光學顯微鏡的暗視野或偏振光顯微鏡進行結晶檢查(如尿酸鹽結晶、焦磷酸鈣結晶)，應注意區分塵粒、劃痕、碎片與病理性結晶。

4.4.3 細胞計數 細胞計數方法同腦脊液細胞計數，宜在標本采集后1 h內完成檢測。關節腔積液標本較難混勻，可用旋轉式攪拌器混勻5～ 10 min，避免過度震蕩造成細胞破損。

4.5 病原學檢查 應作為關節腔積液常規檢查項目，將標本離心后取沉淀進行革蘭染色涂片檢查，查找有無致病菌。

必要時，根據臨床表現選擇合適的培養基進行細菌或真菌培養。

5 糞便檢驗技術要求

5.1 標本采集、轉運和貯存

5.1.1 實驗室應向患者提供標本采集說明(口頭或書面)和符合要求的標本采集容器。應使用一次性、有蓋、可密封、潔凈、干燥、不滲漏、不易破損、開口和容量適宜的容器。用于細菌培養檢查的標本應使用無菌容器，且有明顯標識。

5.1.2 應盡可能選取附著黏液、膿液、血液的新鮮異常糞便(宜多個部位留取，蠶豆大小)，并避免尿液和異物(如衛生紙、花露水、強力清潔劑、除臭劑等)污染。采集后的標本宜在1 h內(夏季)或2 h內(冬季)送檢。

5.1.3 糞便隱血試驗宜連續3 d每天送檢標本(適用時)，每次采集糞便2個部位的標本送檢(置于同一標本容器中)。不可使用直腸指檢標本。

5.1.4 進行細菌檢查的標本應在發病初期和使用抗生素前采集，腹瀉患者標本應在急性期(3 d內)采集。進行厭氧菌培養的標本應盡快送檢，必要時在床旁接種。

5.1.5 查原蟲滋養體的標本應留取含膿血的稀軟糞便，排便后立即檢查，冬季需要采取保溫措施送檢；查蟯蟲卵時，在子夜或早晨排便前用肛拭子在肛周皺襞處采集標本；查血吸蟲毛蚴時，應至少采集30 g新鮮糞便；查寄生蟲蟲體及蟲卵計數時，應收集24 h糞便。

5.2 理學檢查 糞便理學檢查至少包括糞便顏色和性狀等。實驗室應規定糞便理學檢查指標描述和報告的規范用語。

5.3 化學和免疫學檢查

5.3.1 糞便隱血試驗

5.3.1.1 糞便隱血試驗檢測方法有化學法和免疫法，不同方法的靈敏度和特異性存在差異，實驗室在選用新方法前應明確其分析性能。當一種方法的檢測結果與臨床不符時，宜采用另一種方法進行驗證。

5.3.1.2 應按試劑說明書要求的比例使用稀釋液或等滲鹽水對標本進行稀釋。當明顯柏油樣標本的檢測結果呈陰性時，應調整稀釋倍數后再次進行檢測。

5.3.1.3 使用試帶進行糞便隱血試驗，試帶應在密閉、防潮的條件下保存，在有效期內使用。

5.3.1.4 檢測臨床標本前應至少進行陰性和弱陽性水平的室內質控并保證結果在控。應按說明書規定的時間和標準進行結果判斷。

5.3.2 其他檢查 包括糞膽素、糞膽原和脂肪測定、病原體的免疫學檢查(如艱難梭菌抗原、病毒抗體檢測)等。

5.4 細胞學和病原學檢查

5.4.1 涂片檢查

5.4.1.1 應使用潔凈的載玻片和新鮮等滲鹽水制備標本涂片，涂片應厚薄適宜，以能透視紙上字跡為宜，加蓋玻片。必要時進行染色(如白細胞檢查時宜使用亞甲藍染色)。

5.4.1.2 應按“城垛”式順序，先用低倍鏡觀察全片，再用高倍鏡觀察10個以上視野，查找各種細胞、寄生蟲卵、真菌、細菌和原蟲等病理成分。

5.4.1.3 查見寄生蟲卵時，應描述蟲卵的形態特征。遇到可疑蟲卵或罕見蟲卵時應請上級檢驗人員復核，或送至技術水平更高的實驗室進行確認。使用集卵法(適用于各種蟲卵)、飽和鹽水漂浮法(適用于檢出鉤蟲卵)、離心沉淀法或自然沉淀法處理標本可提高寄生蟲卵的檢出率。

5.4.1.4 結果報告應報告有無病理成分，如各種細胞、寄生蟲及蟲卵、真菌和原蟲等，細胞以“最低數～最高數/HP”進行報告。

5.4.2 病原體培養 根據臨床表現，針對懷疑感染病原菌的種類選擇相應的培養基和培養條件進行糞便微生物學檢查。

5.5 糞便自動化檢查

5.5.1 在儀器用于臨床標本檢測前，實驗室應對其性能進行驗證，包括(但不限于)精密度(適用時)、與手工方法檢查結果的可比性(符合率)、有形成分檢出率等。

5.5.2 實驗室應制訂手工復檢的規則并進行驗證。

6 精液檢驗技術要求

6.1 標本采集、轉運和貯存

6.1.1 實驗室應向患者提供精液標本采集說明和符合要求的標本采集容器。標本采集應使用清潔干燥、對精子無毒性、廣口的玻璃或塑料容器，進行微生物培養的標本應保持無菌。

6.1.2 標本采集后應記錄采集方法、采集時間、標本完整性及禁欲時間等信息。

6.1.3 標本采集后應在室溫條件下立即送檢。

6.1.4 標本采集后1 h內，評估精液液化狀況和外觀、測量精液體積，制備濕片并進行精子活力和精子存活率檢查，制備精液涂片(用于評估精子形態)，稀釋精液并進行精子計數，進行混合抗球蛋白反應試驗等檢查(需要時)，離心處理精液(用于化學檢查)；采集后3 h內，進行微生物學檢查；采集后4 h內，完成精液涂片固定、染色和精子形態檢查，進行精液化學檢查。

6.1.5 對于無法液化的精液標本，可采用機械混勻(如加入適量磷酸鹽緩沖液，使用移液器輕輕反復吹打)或酶消化(如淀粉酶、菠蘿蛋白酶)的方法進行處理。

6.2 理學檢查

6.2.1 精液理學檢查主要包括精液體積、外觀、液化時間和粘稠度等。

6.2.2 精液體積測量宜使用稱重法(可假設精液密度為1 g/mL)，也可通過帶刻度的容器直接讀取。6.2.3 精液標本接收后應立即觀察其是否凝固，然后置于室溫或37℃條件下觀察標本從凝固到完全液化所需時間。

6.2.4 粘稠度可通過拉絲試驗進行判斷，如采用玻棒法或滴管法。

6.3 化學檢查 精液化學分析宜包括酸性磷酸酶、鋅、果糖、中性α-葡糖苷酶、乳酸脫氫酶同工酶X和精子頂體精氨酸酰胺酶測定等。實驗室宜選擇1個檢查項目來評價附屬性腺(前列腺、精囊腺、尿道球腺)和附睪的功能。

6.4 顯微鏡檢查

6.4.1 精液顯微鏡檢查宜包括精子活力、精子存活率、精子計數、精子形態、生精細胞及其他細胞檢查等。

6.4.2 精子活力檢查可使用普通光學顯微鏡觀察染色或未染色的精液標本，宜使用相差顯微鏡檢查新鮮、未染色的標本。先在低倍鏡下觀察黏液絲、精子凝集、非精子細胞(如上皮細胞、白細胞、未成熟精子細胞、斷裂精子頭部或尾部)等成分，在高倍鏡下進行精子活力評估(至少計數200個精子，分別計算前向運動、非前向運動和不活動精子的百分比)。

6.4.3 精子存活率檢查可采用伊紅染色、伊紅-苯胺黑染色法或低滲膨脹試驗進行，應在精液標本收到后立即檢查，宜在30 min內完成，勿超過1 h。

6.4.4 進行精子計數時，應對標本進行稀釋(可采用1∶20、1∶5或1∶2的稀釋倍數)，將標本稀釋兩份，分別充液至計數池，根據精子數量選擇合適的計數區域，每份稀釋標本各至少計數200個精子，用兩份稀釋標本計數結果的均值計算每毫升精液中精子數量(精子濃度)和精子總數(精子濃度×精液量)。

6.4.5 進行精子形態檢查時，取1滴液化且混勻的精液制備涂片，涂片自然晾干、將涂片浸入95%的乙醇中至少15 min進行固定后做巴氏染色；或用75%乙醇固定60 min后做Shorr染色；或用95%甲醇固定60 min做Diff-Quik染色。在低倍鏡下觀察涂片，在油鏡下計數至少200個精子，計算正常和異常形態精子百分比。

6.4.6 特殊需要時，將標本染色后在油鏡下觀察精原細胞、初級精母細胞、次級精母細胞、精子細胞及精子的比例，有助于評估生精功能是否存在異常。

6.5 計算機輔助精液分析(CASA)

6.5.1 實驗室使用CASA系統應遵循廠商推薦的要求。

6.5.2 實驗室應定期核查儀器檢測結果的重復性和可靠性。

6.5.3 CASA系統對檢測精子濃度有一定局限性，在(20～50)×109/L的范圍內檢測結果較為可靠。精子濃度過高時，應將標本進行適當稀釋。

6.6 精液檢查參考區間 實驗室宜在驗證的基礎上采用世界衛生組織最新版關于“人類精液檢查與處理實驗室手冊”提供的精液檢查主要參數(精液體積、精子存活率、精子總數、精子濃度、精子活力、精子前向運動、精子形態)的參考區間下限(第5百分位數及其95%可信區間)。

7 陰道分泌物檢驗技術要求

7.1 標本采集、轉運和貯存

7.1.1 實驗室應與臨床共同討論并制訂陰道分泌物標本采集和處理的標準操作程序。

7.1.2 標本采集宜使用1個或多個滅菌拭子(頭部包有聚酯棉球)或滅菌圈(棉球對淋病奈瑟菌有影響，木質器材對沙眼衣原體有影響)。應根據檢查目的采集不同部位的標本，如細菌性陰道炎檢查時應采集陰道側壁分泌物，滴蟲性陰道炎檢查時應采集后穹隆分泌物。

7.1.3 標本應在室溫條件下盡快送檢，檢查滴蟲時，標本宜保溫送檢。

7.1.4 冷藏標本不利于淋病奈瑟菌復蘇和影響陰道毛滴蟲滋養體動力識別，但可用于沙眼衣原體或病毒(如單純皰疹病毒)檢查。

7.2 化學檢查 陰道分泌物化學檢查宜包括過氧化氫、白細胞酯酶、唾液酸苷酶、β-葡萄糖醛酸苷酶、乙酰氨基糖苷酶和凝固酶檢測等。

7.3 細胞學和病原學檢查

7.3.1 應在顯微鏡下對陰道分泌物涂片中的細胞、細菌、真菌和寄生蟲等有形成分進行檢查，可采用等滲鹽水直接涂片法，使用涂片染色法(瑞氏染色或革蘭染色)可提高檢出率。

7.3.2 宜根據白細胞、上皮細胞、乳酸桿菌和雜菌數量多少進行陰道分泌物涂片清潔度判斷并報告，判斷標準見表2。亦可對菌群密集度、菌群多樣性和優勢菌群(正常情況下應為革蘭陽性大桿菌，即乳酸桿菌)進行評估和報告。

7.3.3 應注意查找有無陰道毛滴蟲、致病性細菌(如陰道加德納菌、彎曲弧菌、淋病奈瑟菌)和真菌(菌絲、孢子和芽生孢子)等。查見線索細胞是診斷細菌性陰道病的重要指標，當同時查見菌絲、孢子和芽生孢子時，應考慮真菌性陰道炎；僅孢子陽性時，應結合乙酰氨基糖苷酶試驗和臨床做出診斷。必要時，實驗室宜根據乳酸桿菌、加德納菌/普雷沃菌和動彎桿菌的數量進行Nugent評分并報告。

表2 陰道分泌物涂片清潔度判斷標準

附錄A

（規范性附錄）

使用血液分析儀的體液細胞分析功能進行體液細胞自動化檢驗的要求

A.1 儀器的選擇

實驗室應選擇具有體液細胞分析功能的儀器進行體液標本的檢測，并確認儀器已獲監管機構批準的檢測標本類型、可進行計數的細胞類型以及報告參數能夠滿足實驗室的需求。

A.2 檢測系統的性能驗證

在檢測患者標本前，應對檢測系統的性能進行驗證，至少包括本底計數、精密度、分析靈敏度和分析特異性、正確度和結果可報告范圍等。性能驗證的方法和要求可參考ICSH指南和儀器制造商的說明書。

每個實驗室都應建立所用檢測系統有核細胞計數和紅細胞計數的檢測下限，實驗室規定的檢測下限不能低于儀器的最低檢出限。

A.3 檢測過程

儀器的使用應遵循制造商的建議。在檢測標本(尤其是CSF標本)前，應首先進行本底計數，且保證計數結果符合要求，若重復2次本底計數結果仍不符合要求，應對儀器應進行清洗或日常維護。

實驗室應有檢測結果超出可報告范圍時的處理程序，如對標本進行稀釋(或調整稀釋比例)、采用手工法進行檢測等。

A.4 復檢規則的建立與驗證

實驗室應制訂儀器法體液細胞計數的復檢規則并進行驗證。建立復檢規則前，必須首先熟悉儀器的檢測性能，如檢測下限、報警提示、測定圖形、特殊參數等。出現以下情況時，必須進行復檢。 1)儀器細胞分類結果異常，提示異常細胞存在的可能。2)細胞分類散點圖異常，需要確認是否有非細胞性微粒物質及細菌干擾等。3)儀器細胞計數結果低于檢測下限。4)與大細胞相關的參數升高，不能排除腫瘤細胞的存在。

宜采用直接鏡檢法計數和涂片染色形態學檢查兩種方法進行復檢。

A.5 室內質控

實驗室應使用至少2個濃度水平(包括正常和異常)專用的質控品開展室內質控。質控品檢測應采用與臨床體液標本檢測相同的方式(同一體液檢測通道)進行處理和分析。

A.6 結果可比性

實驗室內部有多個檢測系統時，應通過定期進行檢測系統間的結果比對保證實驗室內部檢測結果的可比性；實驗室應通過參加室間質評或與其他實驗室進行結果比對的方式保證實驗室間檢測結果的可比性。用于結果比對的標本濃度應覆蓋檢測系統的可報告范圍。