HIV感染后接種乙肝疫苗應答反應情況的研究

黃麗靜 姚欽江 蔣春燕 李錫芳

[摘要] 目的 研究HIV感染者接種乙肝疫苗后的免疫應答反應情況。方法 方便選取2017年2月—2019年4月該院感染科門診40名健康體檢者為健康對照組，均經檢查HBsAg、抗-HBs均陰性，選取同期關愛門診收治的40例HIV感染者為HIV感染組，兩組分別在0、1、6個月給予三角肌肌內注射重組乙肝疫苗（酵母）10 μg/次，療程結束后1個月內，檢測兩組患者抗-HBs水平，高于10 mlU/mL即為陽性，HIV感染組患者檢測外周血CD4+T淋巴細胞計數。 結果 兩組陽轉率（87.50% vs 77.50%）比較，差異無統計學意義（χ2=1.385，P>0.05），HIV感染組中CD4+T淋巴細胞計數>200個/μL者26例，CD4+T淋巴細胞計數<200個/μL者14例，按標準方案接種乙肝疫苗后，兩組陽性率分別為88.50%（23/26）和57.10%（8/14），差異有統計學意義（χ2=4.991，P<0.05）。結論 健康人群和HIV感染者接種乙肝疫苗后的免疫應答情況基本一致，但CD4+T淋巴細胞計數越低，接種乙肝疫苗后免疫反應越差。

[關鍵詞] HIV感染;乙肝疫苗;免疫應答

[Abstract] Objective To study the immune response of HIV-infected patients after receiving hepatitis B vaccine. Methods From February 2017 to April 2019， 40 healthy medical examiners in the outpatient department of the hospital were convenientselected as the healthy control group， and all of them were negative for HBsAg and anti-HBs. The 40 HIV-infected patients admitted to the outpatient clinic during the same period were selected as the HIV-infected group， the two groups were given intramuscular injection of recombinant hepatitis B vaccine （yeast） 10 ug/time at 0， 1， and 6 months. The anti-HBs levels in the two groups were detected within 1 month after the end of the course of treatment， higher than 10 mlU / mL was positive. Patients in the HIV-infected group were tested for peripheral blood CD4+ T lymphocyte counts. Results There was no significant difference in positive conversion rate （87.50% vs 77.50%） between the two groups（χ2=1.385， P>0.05）. There were 26 cases of CD4+ T lymphocyte counts in the HIV infection grou P>200/μL. There were 14 cases with CD4+ T lymphocyte counts less than 200 / μL. After the hepatitis B vaccine was administered according to the standard protocol， the positive rates of the two groups were 88.50% （23/26） and 57.10%（8/14）. The difference was statistically significant. significance （χ2=4.991， P<0.05）. Conclusion The immune response of HBV vaccine in healthy people and HIV-infected patients is basically the same， but the lower the CD4+ T lymphocyte count， the worse the immune response after HBV vaccine.

[Key words] HIV infection; Hepatitis B vaccine; Immune response

隨著乙肝疫苗的問世，國家免費免疫規劃程序接種乙肝疫苗政策的出臺，乙肝病毒傳播得到有效的遏制，但因個體因素、機體免疫等多方面的差異，并不是每個人按國家免疫規劃療程接種乙肝疫苗后均能出現抗-HBs抗體陽轉。盡管國內已有諸多不同乙肝疫苗接種方案的研究，如加大疫苗劑量或改變接種時間等，受地域、人種、樣本量等影響，目前仍未有統一定論[1]。對于HIV感染者，是否適合接種乙肝疫苗或接種乙肝后是否出現免疫應答反應，目前研究較少，現仍未有統一定論。該文方便選取2017年2月—2019年4月該院40名健康體檢者和40例HIV感染者，旨在研究HIV感染人群接種乙肝疫苗后應答情況的研究，為HIV感染者接種乙肝疫苗提供理論依據，現報道如下。

1? 對象與方法

1.1? 研究對象

方便選取該院感染科門診40名健康體檢者為健康對照組，均經檢查HBsAg、抗-HBs均陰性，并查HBV-DNA排除隱匿性肝炎，其中男性18名，女性22名;平均年齡（42.5±7.2）歲，平均體重（54.8±7.28）kg。選取同期關愛門診收治的40例HIV感染者為HIV感染組，診斷符合2006年中華醫學會感染病學會艾滋病學組頒布的《艾滋病診療指南》的診斷標準，亦均查HBsAg、抗-HBs均陰性，并查HBV-DNA排除隱匿性肝炎，接種疫苗時無急性發作的嚴重艾滋病指征性疾病，無疫苗過敏史，其中男性26例，女性14例;平均年齡（43.8±6.9）歲;平均體重（55.4±7.64）kg。該研究經醫院倫理委員會審批通過，所有患者均簽署知情同意書。兩組年齡等資料差異無統計學意義（P>0.05），可以對比研究。

1.2? 接種疫苗方案

健康對照組和HIV感染組均按標準接種方案分別在0、1、6個月給予三角肌肌內注射重組乙肝疫苗（酵母），10 μg/次。若患者接種過程中發生急性發熱，推遲注射疫苗，直到患者病情穩定之后再注射。

1.3? 實驗室檢查

療程結束后1個月內，檢測兩組患者乙肝五項（乙肝表面抗原（HBsAg）、乙肝表面抗體（抗-HBs）、乙肝e抗原（HBeAg）、乙肝e抗體（抗-HBe）、乙肝核心抗體（抗-HBc）水平、HBV-DNA水平，HIV感染組患者檢測外周血CD4+T淋巴細胞計數。

采用酶聯免疫吸附法（ELISA）進行檢測，抗-HBs滴度高于10 mlU/mL即為陽性，HBV-DNA檢測采用熒光定量PCR法進行檢測，外周血CD4+T淋巴細胞計數檢測采用流式細胞術。

1.4? 統計方法

采用SPSS 17.0統計學軟件進行數據處理，計數資料用[n（%）]表示，進行χ2檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2? 結果

2.1? 健康組與HIV感染組接種疫苗后應答情況

兩組陽轉率（87.50% vs 77.50%）比較，差異無統計學意義（χ2=1.385，P>0.05），見表1。

2.2? 不同CD4+T淋巴細胞組接種疫苗后應答情況

HIV感染組中CD4+T淋巴細胞計數>200個/μL者26例，CD4+T淋巴細胞計數<200個/μL者14例，按標準方案接種乙肝疫苗后，兩組陽性率分別為88.50%（23/26）和57.10%（8/14），差異有統計學意義（χ2=4.991，P<0.05），見表2。

3? 討論

乙型肝炎疫苗作為減毒活疫苗，接種后作為抗原刺激人體B細胞發育為漿細胞，產生抗-HBs。抗-HBs是保護性抗體，當機體再次接觸HBV時，可保護機體免于HBV感染。人體如無抗-HBs，則容易感染HBV。目前對接種乙肝疫苗后免疫不應答的機制尚未明確，有研究表明可能與MHC的多態性、特異性輔助性T細胞活化等有關[2-4]，且宋玉國等[5]對乙肝疫苗接種后不應答的研究中發現， TCR Vβ基因克隆化有助于活化CD4+T淋巴細胞，誘導抗-HBs的產生。從生物學角度講，這可能人類白細胞抗原的多態性不平衡有關。人類免疫缺陷病毒（HIV）主要攻擊機體CD4+T淋巴細胞，使其數量及活性等遭受破壞，打破機體免疫平衡。有學者發現，HIV感染者初始抗病毒錢的CD4+T淋巴細胞水平并不是乙肝疫苗接種后免疫應答效果的獨立預測因素，HIV感染者對乙肝疫苗接種后的無或低反應，主要原因是HIV病毒輔助、體液免疫和細胞免疫的損傷、HIV/HCV合并感染或年齡的增長[6]。故從理論上看出，特異性輔助T細胞數量與質量的下降，有可能導致乙肝疫苗接種后的免疫不應答。

國外一項研究[7]表明，HIV感染者通過接種乙肝疫苗獲得抗-HBs的水平>10 mIU/mL就有持續保護作用，感染乙肝的風險較接種后無反應人群降低50%，且經過7 d的追蹤發現，產生抗體的人群雖然有部分發生急性乙肝感染，但均未發展為慢性乙肝。HBV與HIV存在相同的感染途徑，且抗HIV藥物肝腎毒性較大，又與抗HBV藥物存在交叉耐藥，如HBV/HIV合并感染，則容易導致疾病加速進展，病死率高。故HIV感染者接種乙肝疫苗，降低HBV/HIV合并感染的機率，可為后續高效抗逆轉錄治療提供有效的、安全的保障。

該研究按照國家免疫規劃接種，按0，1，6月于三角肌內接種10 μL重組乙肝疫苗，接種后1個月測抗-HBs水平，以抗-HBs>10mIU/mL為陽性。健康組抗-HBs陽轉率為87.50%，HIV感染者組抗-HBs陽轉率為77.50%，雖然健康組陽轉率高于HIV感染組，但兩者之間無統計學差異（P>0.05），表明健康者與HIV感染者接種乙肝疫苗后的免疫應答反應基本一致。但在研究結果中，發現健康組接種乙肝疫苗后抗-HBs滴度明顯比HIV感染人群升高。出現上述結果，可能原因：①樣本量少，HIV感染者部分選自依從性良好的、已啟動HAART人群，不能反應總體水平;②HIV感染者在疾病不同時期，CD+T淋巴細胞水平相差大，研究樣本中未能按CD4+T淋巴細胞計數進行分層，入選組中，HIV感染者CD4+T淋巴細胞計數>200個/μL數量較多。故所選樣本可能有所偏差。

在既往研究已證實，與HBsAg有關的免疫應答水平受多種因素影響，其中，T淋巴細胞的輔助作用是必不可少的重要因素。在深入對CD4+T淋巴細胞計數分層的研究中發現，CD4+T淋巴細胞計數>200個/μL組抗-HBs陽轉率為88.50%，高于CD4+T淋巴細胞計數<200個/μLB組抗-HBs陽轉率為57.10%，兩者之間差異有統計學意義（P<0.05），表明不同的CD4+T淋巴細胞水平，接種乙肝疫苗后免疫應答強度不同。CD4+T淋巴細胞計數高者，接種乙肝疫苗后抗-HBs陽轉率高，能有效保護機體免受HBV感染。

以上研究結果與張仁芳等[8]不盡一致，其結果表明，HIV-1陽性者與HIV-1陰性者接種乙肝疫苗后相比，前者血清轉換率和抗-HBs水平降低，以CD4+T淋巴細胞計數<200個/μL更甚。出現此結果，考慮樣本量小且CD4+T淋巴細胞計數<200個/μL入主病例亦少有關。但兩者均有一致性指向，即CD4+T淋巴細胞計數<200個/μL的HIV感染者接種乙肝疫苗后的免疫應答情況均不理想。

雖然HIV-HBV國際委員會及多個國家強烈建議CD4+T淋巴細胞計數≥200個/μL的HIV感染人群予以乙肝疫苗接種[9-10]，但并未得到廣泛覆蓋，且較多HIV感染者發現時已進入AIDS，如果不及時有效的預防接種，一旦感染HBV，對后期疾病進展及抗病毒治療藥物選擇等方面均有諸多影響。國內對HIV感染后乙肝疫苗接種的研究甚少，如何選擇適合的時機，適合的劑量，合適的時間，對HIV感染者進行乙肝疫苗接種仍是難題，仍有待擴大樣本量進行更深入的研究，減少HBV/HIV合并感染幾率，為HAART保駕護航。

[參考文獻]

[1]? 翁誼彬.乙肝疫苗不同劑量對加強免疫的臨床效果[J].基層醫學論壇，2019，23（18）：2626-2627.

[2]? 莊緒香，王如德，高云，等.沂南縣2007—2017年住院產婦HBsAg檢測及新生兒首針乙肝疫苗接種監測結果分析[J].泰山醫學院學報，2019，40（5）：351-354.

[3]? 練蓮，李翠芳，趙洪，等.母親HBsAg陰性的新生兒接種不同種類乙型肝炎疫苗及其序貫免疫效果觀察[J].廣西醫科大學學報，2019，36（3）：428-430.

[4]? 余祖衛，李玉蓮，陳麗華，等.cTfh細胞及相關miR-146a在乙肝疫苗記憶性免疫應答中的動態表達及關聯研究[J].中國當代醫藥，2018，25（20）：12-15.

[5]? 宋玉國，熊英，宋宇，等.乙肝疫苗無應答者CD4+T細胞TCR Vβ基因克隆化特征的研究[J].中國免疫學雜志，2011，27（12）：1059-1061，1065.

[6]? Catherine FX， Piroth L. Hepatitis B virus vaccination in HIV-infected people： a review[J].Human Vaccines & Immuno the rapeutics， 2017， 13（6）：1-10.

[7]? Baudi I， Iijima S， Chin'Ombe N， et al. Molecular epidem iology of co-infection with hepatitis B virus and human immunodeficiency virus（HIV）among adult patients in Harare， Zimbabwe[J]. Journal of Medical Virology， 2017， 89（2）：257.

[8]? 張仁芳，馬建新，孫洪清，等.人類免疫缺陷病毒-1感染者對重組乙型肝炎疫苗的免疫應答[J].中華傳染病雜志，2009， 27（10）：637-640.

[9]? Umutesi J，Simmons B，Makuza JD，et al. Prevalence of hepa titis B and C infection in persons living with HIV enrolled in care in Rwanda[J].Bmc Infectious Diseases，2017，17（1）：315.

[10]? Mancinelli S， Pirillo MF，Liotta G， et al. Antibody response to hepatitis B vaccine in HIV-infected infants in Malawi and its correlation with hepatitis B virus infection： hepatitis B vaccine response in HIV-infected infants[J].Journal of Medical Virology， 2018， 90（6）：1172-1176.

（收稿日期：2019-12-13）