圍產(chǎn)期孕婦B族鏈球菌和支原體共感染情況分析

郭淑麗， 羅先道， 賈海英， 楊麗瑋， 黃國虹， 王昌敏

（1.新疆維吾爾自治區(qū)人民醫(yī)院臨床檢驗中心，新疆 烏魯木齊 830001；2.烏魯木齊市友誼醫(yī)院心內(nèi)三科，新疆 烏魯木齊 830001）

B族鏈球菌（group BStreptococcus，GBS）為革蘭陽性球菌，又稱無乳鏈球菌，是一種條件致病菌，常寄居于陰道和直腸。GBS的莢膜多糖是其主要致病因子，還可產(chǎn)生某些細胞外物質(zhì)，如溶血素、核酸酶、蛋白酶、神經(jīng)氨酸酶和脂磷壁酸等，后2種物質(zhì)可增強GBS的毒力和侵襲力[1-2]。美國有25%～40%的孕婦產(chǎn)道攜帶GBS，其中40%～70%在分娩過程中會傳遞給新生兒，若新生兒攜帶該菌，1%～3%會出現(xiàn)早期侵入性感染，5%會死亡[3-4]。生殖道支原體是一種重要的傳播感染病原體，可導(dǎo)致生殖道疾病綜合征，包括盆腔炎、尿道炎、宮頸炎或不良妊娠等，并可引起嚴(yán)重并發(fā)癥。目前，已發(fā)現(xiàn)存在于泌尿生殖道的支原體有7種，其中有致病作用的主要為解脲支原體（Ureaplasma urealyticum，Uu）和人型支原體（Mycoplasma hominis，Mh），通過性接觸傳播或母嬰垂直傳播等方式，引發(fā)女性的陰道炎、輸卵管炎、宮頸炎及子宮內(nèi)膜炎等。近年來，女性泌尿生殖道的支原體感染呈現(xiàn)不斷上升趨勢，并且由于抗菌藥物的不合理使用，耐藥情況也呈逐年加重趨勢[5]。本研究對圍產(chǎn)期孕婦GBS及Uu的感染情況進行分析，以期為臨床抗感染治療提供參考。

1 材料和方法

1.1 研究對象

選取2017年12月—2018年8月新疆維吾爾自治區(qū)人民醫(yī)院孕35～37周常規(guī)產(chǎn)檢孕婦894例，年齡（30.54±5.26）歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：單胎宮內(nèi)妊娠，經(jīng)B超證實胎兒存活。排除標(biāo)準(zhǔn)：多胎妊娠者、免疫缺陷者、精神病患者、不愿意合作者。所有研究對象均自愿加入本研究，并簽署知情同意書。

1.2 儀器與試劑

GBS培養(yǎng)分析系統(tǒng)及配套試劑、DL-96細菌測定系統(tǒng)、DL96-STREP鏈球菌鑒定藥物敏感性試劑盒均購自珠海迪爾生物工程公司，激光解析電離飛行時間質(zhì)譜儀和配套試劑購自法國生物梅里埃公司；支原體采用分離固體培養(yǎng)基和鑒定藥物液體培養(yǎng)基（河北眾愛生公司）進行培養(yǎng)。

1.3 方法

1.3.1 細菌、真菌鑒定和體外藥物敏感性試驗 用無菌拭子于研究對象陰道下段1/3處及肛門括約肌處取樣，接種于血平板和麥康凱平板（法國生物梅里埃公司）及科瑪嘉顯色平板（鄭州安圖公司），同時進行肉湯增菌自動檢測GBS，35～37 ℃培養(yǎng)18～24 h，挑取可疑菌落涂片行革蘭染色，采用激光解析電離飛行時間質(zhì)譜儀鑒定細菌和真菌。制備2.0麥?zhǔn)蠁挝痪鷳乙哼M行藥物敏感性試驗。所有操作嚴(yán)格按照試劑說明書進行，結(jié)果判讀根據(jù)2017年美國臨床實驗室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會M100文件相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)進行。

1.3.2 支原體鑒定和體外藥物敏感性試驗 用無菌拭子在固體培養(yǎng)基表面以曲線方式進行劃種，再將拭子于液體培養(yǎng)基中轉(zhuǎn)動并充分?jǐn)嚢瑁瞥删鷳乙?，接種到藥物敏感性試驗板，每孔滴加石蠟油后，35～37 ℃培養(yǎng)72 h觀察生長情況。依據(jù)菌落生長情況，結(jié)合液體/微孔板培養(yǎng)顏色變化判斷支原體（Uu、Mh）的鑒定結(jié)果和體外藥物敏感性。所有操作均嚴(yán)格按照試劑說明書進行。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

采用 SPSS 17.0軟件進行統(tǒng)計分析。計量資料以±s表示，計數(shù)資料采用頻數(shù)及率表示，組間比較采用χ2檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 病原體構(gòu)成情況

894例孕婦中，檢出病原體感染者130例（14.54%），其中細菌感染者118例 （大腸埃希菌感染31例、GBS感染65例、陰道加德納菌感染17例、金黃色葡萄球菌感染5例），真菌感染者32例，支原體感染者41例（均為Uu感染）；2種或2種以上病原體共感染者56例，其中GBS+Uu感染33例、陰道加德納菌+真菌感染8例、GBS+陰道加德納菌感染7例、GBS+真菌感染4例、大腸埃希菌+真菌感染2例、金黃色葡萄球菌+GBS感染1例、大腸埃希菌+真菌+Uu感染1例。細菌感染者最多（90.77%），細菌感染中以GBS感染為主（55.08%）（χ2=68.44，P＜0.0 5），混合感染中以G B S+U u為主（58.93%）（χ2=97.00，P＜0.05）。

2.2 GBS體外藥物敏感性試驗結(jié)果

65株GBS對利奈唑胺、青霉素、萬古霉素、美羅培南、氨芐西林和頭孢曲松的敏感率均為100.00%，檢出對左氧氟沙星、四環(huán)素和克林霉素中介株，對左氧氟沙星、紅霉素、四環(huán)素和克林霉素均耐藥，其中對克林霉素的耐藥率最高（86.15%）。見表1。

表1 65株GBS對10種抗菌藥物的藥物敏感性 株（%）

2.3 支原體體外藥物敏感性試驗結(jié)果

41株Uu對美滿霉素、強力霉素、羅紅霉素、交沙霉素和克拉霉素的敏感率均為100%，檢出對環(huán)丙沙星、司帕沙星、氧氟沙星、阿奇霉素、壯觀霉素、左氧氟沙星和諾氟沙星中介株，對環(huán)丙沙星、司帕沙星、阿奇霉素、壯觀霉素、左氧氟沙星和諾氟沙星均耐藥，對環(huán)丙沙星的耐藥率最高（92.68%），其次是氧氟沙星和諾氟沙星（均為87.80%）。見表2。

表2 41株Uu對12種抗菌藥物的藥物敏感性 株（%）

3 討論

正常情況下，女性生殖道內(nèi)存在乳酸桿菌、棒狀桿菌、非溶血性鏈球菌及消化球菌等多種細菌，維持其內(nèi)環(huán)境的自潔作用，并防御病原體入侵。當(dāng)機體抵抗力降低或生殖道內(nèi)微生態(tài)平衡被破壞時，可引起病原體大量繁殖、生殖道感染的發(fā)生[6]。妊娠是一個復(fù)雜且相互協(xié)調(diào)的過程，正常妊娠時，機體的免疫功能處于相對抑制狀態(tài)[7-8]，并因激素水平的變化，為生殖道內(nèi)病原體繁殖提供了有利環(huán)境。本研究中，圍產(chǎn)期孕婦生殖道病原體檢出率為14.54%，構(gòu)成以細菌（尤其是GBS）、支原體和真菌為主，與藍惠華等[9]報道的圍產(chǎn)期孕婦病原體檢出情況相近，且與該項研究中GBS為主要致病菌的結(jié)論一致，但他們提出孕婦陰道真菌感染或細菌性陰道病時GBS檢出率會增加，而本研究中共感染的檢出情況以GBS與Uu共感染為主。

圍產(chǎn)期孕婦GBS篩查目前已成為多數(shù)地區(qū)的常規(guī)檢查項目，且不同地區(qū)孕婦GBS帶菌率也有所不同[10-11]，本研究中圍產(chǎn)期孕婦GBS攜帶率為7.27%（65/894），與唐興敏等[12]報道的6.24%相近。支原體作為一種原核型微生物，體積小、結(jié)構(gòu)簡單、無細胞壁、可自我復(fù)制。支原體屬條件致病性病原微生物，當(dāng)免疫失衡時可致上行感染，引起陰道炎、宮頸炎、盆腔炎等，孕婦感染可導(dǎo)致胎膜早破、稽留流產(chǎn)、早產(chǎn)、死胎等。目前，對人類有致病性且與生殖道感染相關(guān)的支原體主要有Mh和Uu，本研究中檢出41株支原體均為Uu，且其中33例孕婦為Uu與GBS共感染，可能由GBS通過抑制乳桿菌生長，使陰道pH值增高引起[13]。本研究中GBS共檢出65株，有45例孕婦為GBS與其他支原體、細菌、真菌共感染，表明醫(yī)院圍產(chǎn)期孕婦GBS感染具有特殊性，可能與地域、民族和用藥習(xí)慣等不同相關(guān)，該結(jié)論還需進一步擴大樣本量進行深入研究。

本研究中65株GBS對克林霉素的耐藥率（86.15%）明顯高于李娟等[14]報道的68.8%，對左氧氟沙星和四環(huán)素的耐藥率分別為55.38%、46.15%。因支原體缺乏細胞壁，所以對以破壞細胞壁為主要作用機制的β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物天然耐藥，故臨床上主要應(yīng)用可以抑制微生物蛋白質(zhì)合成的抗菌藥物來治療支原體感染。本研究中41株Uu對于環(huán)丙沙星、氧氟沙星、諾氟沙星的耐藥率均超過80%，高于相關(guān)報道[15]，提示該類藥物不適用于新疆地區(qū)Uu感染的治療，可選用長效四環(huán)素類藥物強力霉素、美滿霉素。由于新疆自治區(qū)人民醫(yī)院GBS與Uu共感染多見，故使用抗菌藥物時應(yīng)分析利弊，尤其是四環(huán)素類、喹諾酮類藥物。

綜上所述，新疆自治區(qū)人民醫(yī)院圍產(chǎn)期孕婦生殖道病原體感染以GBS和Uu共感染為主，且GBS和Uu藥物敏感性各有不同，臨床應(yīng)加以重視，在診療過程中綜合考慮。另外，建議本地區(qū)醫(yī)療機構(gòu)應(yīng)不斷加強女性健康衛(wèi)生宣教工作，強化其對生殖道感染的認(rèn)識，提高自我防護意識。