右美托咪定對SAH后大鼠早期腦損傷的保護作用及機制探究

李紅霞，肖 軍，劉志杰，霍曉強，蘇 春

（遵化市人民醫院，河北 唐山 063000）

蛛網膜下隙出血（SAH）是一種嚴重的腦血管事件，通常伴有永久性腦損傷[1]。早期采取有效干預措施緩解腦損傷，改善預后是目前的研究重點，本研究通過實驗室手段觀察海馬Ca1區椎體細胞形態和數目以及腦損傷蛋白表達水平反應腦損傷程度，探討右美托咪定對SAH后大鼠腦損傷的保護作用。

1 資料與方法

1.1 實驗動物與分組

32只清潔級成年SD大鼠（SPF大鼠）平均身長18.25f1.32 cm，購于廣東省實驗動物中心。隨機均分為4組，分為假手術組（A組）、蛛網膜下腔出血（SAH）組（B組）、SAH+右美托咪定組（C組）和SAH+PD98059（ERK1/2抑制劑）組（D組）。

1.2 動物模型及標本制備

本研究采用血管內穿刺法制備SAH模型，通過灌注固定取腦法取得大鼠腦組織標本。

1.3 神經功能觀察

評價指標主要包括食欲、運動和神經功能缺失3方面，見表1。

1.4 早期腦損傷觀察

HE染色觀察海馬Ca1區神經元數目，免疫組化觀察海馬區神經元特異性烯醇化酶（NSE）、超敏C反應蛋白（hs-CRP）和細胞外調節蛋白激酶（ERK1/2）水平。western blot比較海馬區NSE、hs-CRP和ERK1/2陽性表達水平。Western blot操作常規裂解電泳，轉膜、加抗體等步驟，轉膜使用PVDF膜，抗體按1:3000比例稀釋。

表1 實驗動物神經功能、食欲和運動等行為學評分

1.5 統計學分析

本研究所有數據資料均采用SPSS 2.0進行統計學分析，計量資料采用（mean SD）表示，組間均數比較采用單因素方差分析，兩兩比較采用LSD-t檢驗法。以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 SAH后大鼠神經功能和行為學觀察

B、C、D組大鼠SAH后行為學評分均高于A組，其中B組大鼠SAH后行為學評分明顯高于C組，但相對略低于D組，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表2。

表2 各組大鼠行為學評分比較

2.2 海馬Ca1區神經元數目比較

各組大鼠海馬區神經元數目分別為A組142.24f2.65、B組70.61f3.05、C組87.29f3.21、D組61.06f3.14，B、C和D組均低于A組， B組明顯低于C組，但相對略高于D組。

2.3 免疫組化結果比較

B、C和D組NSE和hs-CRP陽性率均高于A組，其中B組NSE和hs-CRP陽性表達高于C組且低于D組，但ERK1/2陽性表達低于C組（P均＜0.05）

2.4 western blot結果比較

hs-CRP蛋白B組陽性表達高于C組且低于D組；C組ERK1/2陽性表達在各組中最高，D組ERK1/2陽性表達率低于B組（P＜0.01）。

表3 各組大鼠腦組織蛋白表達比較

3 討 論

蛛網膜下隙出血是一種致死率和致殘率極高的腦血管病變，研究者發現，SAH后的早期腦損傷在SAH發生后的大腦神經損傷的發生有著重要的影響，減輕SAH后的早期腦損傷對于神經功能修復，改善預后，提高患者生存率和生命質量[2]。

右美托咪定是一種常用的α2受體激動劑，在神經系統疾病和損傷中發揮多重腦組織保護作用。研究發現右美托咪定可以通過降低大鼠體溫、抑制炎癥反應來減輕繼發性腦損傷改善大鼠神學行為學評分[3]。相關研究表明，右美托咪定對包括SAH和缺血再灌注所致腦損傷有保護作用[4]。本研究顯示，右美托咪定干預后，大鼠行為學評分得到了改善（均P＜0.05）。同時海馬Ca1區神經元數目也明顯的提高，提示右美托咪定對于SAH后大鼠大腦神經系統具有一定的保護作用。

ERK1/2蛋白與神經系統的發育和功能的有著密切關系，在周圍神經系統發育過程中起著至關重要的作用[5]。研究表明，右美托咪定可以通過ERK1/2途徑預防抑郁大鼠因電驚厥休克引起的學習和記憶障礙[6]。本研究結果顯示，D組大鼠SAH后NSE和hs-CRP表達均發生了增加，但C組大鼠NSE和hs-CRP表達明顯低于B、D兩組。與B組比較，應用PD98059抑制ERK1/2激活的D組NSE和hs-CRP表達明顯高于B組。既往研究通過建立大鼠缺血再灌注模型，證明右美托咪定可以通過促進ERK信號通路的轉導改善缺血性腦損傷[7]。本研究結果與之前報道基本一致，提示右美托咪定可能是通過ERK信號通路的激活，改善SAH后大鼠腦組織免疫炎癥反應，從而達到早期腦損傷的保護作用。

綜上所述，右美托咪定可能是通過激活ERK信號通路，抑制SAH后大鼠腦組織免疫炎癥反應，保護海馬Ca1區神經元細胞，從而達到SAH患者早期腦損傷的保護作用。