復方黃柏液涂劑抗瘡瘍藥理活性研究

孫緒丁，劉振勛，王小云，王 天

（1.山東漢方制藥有限公司，山東 濟南 250101；2.山東漢方生物科技有限公司，山東 濟南 250101；3.煙臺大學，山東 煙臺 264005）

瘡瘍是指各種致病因素侵襲人體后引起的一切體表化膿感染性疾病的總稱，包括急性和慢性兩大類[1-2]。瘡瘍包括了體表上的腫瘍及潰瘍、癰、疽、疔瘡、癤腫、流注、流痰、瘰疬及有關皮膚病的內容，是中醫外科疾病中最常見的一大類病證，具有發病迅速，部分病情較重等特點，在面部可引起疔瘡走黃（西醫稱為敗血癥或膿毒敗血癥），在手、足易引起傷筋損骨的嚴重后果。創傷出現感染以后，就形成了瘡瘍。本文通過制備大鼠瘡瘍模型研究復方黃柏液抗瘡瘍作用，以及對比不同工藝復方黃柏液產品的抗瘡瘍藥效作用。旨在了解復方黃柏液的抗瘡瘍效果，為臨床應用提供可靠的實驗依據。

1 儀器與材料

1.1 儀器

ES-6KHTS電子天平（長沙湘平科技發展有限公司）。

1.2 材料

復方黃柏液產品（原工藝，批號16010811；新工藝1，批號151230；新工藝2，批號151224；原工藝優化，批號151227；復方黃柏液凝膠，批號160112；復方黃柏液產品來自山東漢方制藥有限公司）；康復新液（批號M150349，湖南科倫制藥有限公司）；鏈球菌（ATCC43143）、金黃色葡萄球菌（AS1.1476）、綠膿桿菌（ATCC9027）均由濱州醫學院微生物與免疫實驗室提供。見表1。

1.3 動物

SD大鼠，雄性，體重320～340 g，由山東綠葉制藥有限公司提供，動物合格證號：SYXK（魯）2014003。

表1 復方黃柏液產品不同工藝

2 方 法

2.1 大鼠瘡瘍模型制備

SD大鼠隨機分為8組：對照組、模型組、康復新組、原工藝組、新工藝1組、新工藝2組、原工藝優化組、復方黃柏液凝膠組，大鼠背部剃毛，切開皮膚，深達真皮，長3厘米，冠狀面做兩個切口，切口間距1厘米，矢狀面做1個切口，之后，在切口部位均勻滴加鏈球菌（30億/ml）、金黃色葡萄球菌（30億/ml）、綠膿桿菌（15億/ml），各0.1 ml，48小時后評分，按照評分進行分組，分組后給予相應藥物，用1.5 ml藥液浸潤棉球，以棉球擦拭傷口，2次/天，連續給藥14天，分別于給藥后第7天和第14天評分；取大鼠皮膚，4%甲醛固定，HE染色觀察。

2.2 評分標準

按下列指標及標準評定傷口感染的嚴重程度和藥物治療效果。傷口收縮情況，測量傷口長和寬（cm）；傷口紅、腫、分泌物及壞死組織情況，按下表標準評分，4項治療的最高綜合評分為10分。

表2 評分標準

3 結 果

3.1 復方黃柏液對大鼠瘡瘍評分的影響

給藥前，各組評分無差異；給藥后7天與給藥后第14天各組分評分未見顯著性差異（P＞0.05）（表3）。

3.2 復方黃柏液對大鼠瘡瘍部位病理改變的影響

對照組瘡瘍瘢痕愈合，較窄，表面覆蓋角化的復層扁平上皮，其下為較幼稚的結締組織，成纖維細胞、纖維細胞和膠原纖維較少，皮肌破壞，皮下組織輕度炎癥；模型組瘡病瘢痕愈合，瘡瘍較寬，表面覆蓋角化的復層扁平上皮，其下為較幼稚的結締組織，成纖維細胞、纖維細胞和膠原纖維較少，皮肌破壞，皮下結締組織有膿腫形成；康復新組瘡瘍瘢痕愈合，較模型組窄，表面覆蓋角化的復層扁平上皮，其下為較為成熟的結締組織填充，膠原纖維相對較多，皮肌破壞，皮下結締組織無炎性反應；原工藝組瘡瘍瘢痕愈合，較模型組窄，表面覆蓋角化的復層扁平上皮，其下為較為成熟的結締組織，膠原纖維相對較多。皮肌破壞，皮下結締組織無炎性反應；新工藝1組瘡瘍瘢痕愈合，較模型組寬，表面覆蓋角化的復層扁平上皮，其下為較為幼稚的結締組織，膠原纖維相對較少，皮肌破壞，皮下結締組織輕度炎性反應；新工藝2組病理改變與新工藝1組相同；原工藝優化組瘡瘍瘢痕愈合，較寬，深達皮下組織，為較幼稚的結締組織填充，成纖維細胞或纖維細胞，膠原纖維較少，井且有炎性細胞浸潤，皮肌破壞，皮下結締組織有膿腫形成；復方黃柏液凝膠瘡瘍愈合，深達皮下組織，填充的結締組織較為幼稚，膠原纖維相對較多，皮下結締組織有輕度炎性反應，見附錄圖一。其中，A對照組，D模型組，G康復新組，J原工藝組，M新工藝1組，P新工藝2組，S原工藝優化組，V復方黃柏液凝膠組（×40）； B對照組，E模型組，H康復新組，K原工藝組，N新工藝1組，Q新工藝2組，T原工藝優化組，W復方黃柏液凝膠組（×100）；C對照組，F模型組，1康復新組，L原工藝組，O新工藝1組，R新工藝2組，U原工藝優化組，X復方黃柏液凝膠組（×400）。

研究表明原工藝、新工藝1、新工藝2、復方黃柏液凝膠組具有抗瘡瘍作用，其中原工藝抗瘡瘍作用最優。

4 討 論

復方黃柏液為純中藥制劑，主要成分為黃柏、連翹、金銀花、蒲公英、蜈蚣等，具有清熱解毒，消腫祛腐的作用。臨床主要用于外傷感染、傷口愈合、皮炎濕疹、褥瘡、潰瘍性結腸炎、糖尿病潰瘍等疾病[3-10]。由于黃柏液為中藥提取物，不含乙醇，對皮膚組織無刺激，不但安全有效，而具有利于上皮細胞的爬行和生長，可促進瘡面愈合。不同工藝生產的復方黃柏液樣品的藥理活性不同，抗瘡瘍作用有所差距，原工藝產品抗瘡瘍作用最優，實驗表明復方黃柏液涂劑具有較好的抗瘡瘍作用，為臨床應用提供依據。

表3 復方黃柏液對大鼠瘡瘍評分的影響（±s，n=7-12）

表3 復方黃柏液對大鼠瘡瘍評分的影響（±s，n=7-12）

對照 3.12f1.89 2.17f1.36 0.00f0.00模型 4.54f1.20 2.20f0.89 0.20f0.42康復新 5.22f0.44 2.38f0.70 0.14f0.38原工藝 4.27f1.10 2.18f0.75 0.09f0.30新工藝1 4.27f1.35 2.55f0.93 0.00f0.00新工藝2 4.31f1.18 2.64f1.12 0.18f0.40原工藝優化 4.39f1.04 2.27f0.90 0.18f0.40復方黃柏液凝膠 4.27f1.10 2.45f0.93 0.11f0.33