硫化氫對脂多糖造成急性肺損傷大鼠的保護作用與作用機制分析

陳炬輝

（浙江大學附屬邵逸夫醫院，浙江 杭州 310015）

急性肺損傷是一種肺部病變。給患者肺臟帶來非常嚴重的影響。沒有得到及時治療的話，很可能會造成肺衰竭的出現。當前臨床上其發病因素尚未明確，但不少研究表明脂多糖容易造成急性肺損傷，硫化氫在臨床上能夠有效舒張血管、對血管平滑肌細胞增殖具有良好的調節作用以及抗炎效果。硫化氫可以通過調節炎癥細胞在糖尿病、心血管疾病上發揮其抗炎作用，本次研究主要對硫化氫對脂多糖造成急性肺損傷大鼠的保護作用與作用機制進行分析，結果如下。

1 材料與方法

1.1 一般材料

選擇潔凈級健康雄性大鼠27只，(由浙江省實驗動物中心提供)，大鼠的體質量范圍在250～280 g，將這些大鼠均干凈的鼠籠內進行飼養，充分保證籠內的適宜溫度，一般設置到25 ℃左右即可，濕度的話設置到50% -60%，同時要給足大鼠足夠的飼料和水。通過飼養3～4天之后。然后按照數字隨機抽取的方式進行平均分組，一組為A組，一組為B組，一組為C組，每組各9只。檢測試劑盒、石蠟切片機、光學顯微鏡、電子天平、低溫離心機。

1.2 方法

給予A組大鼠0.5 mL/kg氯化鈉溶液腹腔靜脈注射，給予B組大鼠 LPS(美國Sigma公司)5 mg/kg腹腔靜脈注射，給予C組大鼠在注射LPS之前20分鐘實施NaHS(美國Sigma公司)27 μmol/k腹腔注射。將這27只大鼠建模成功5小時候進行處死，取其個別部分左肺組織，并且利用10%的甲醛溶液進行固定，然后進行石蠟包埋，并通過切片，厚度在5 μm即可，然后開始實施染色，再利用光學顯微鏡進行觀察病變組織。然后開始檢測大鼠的支氣管肺泡灌洗液(BALF)蛋白、BALF IL-10含量，通過改良酚試劑法檢測支氣管肺泡灌洗液( BALF)蛋白。通過酶聯免疫吸附法檢測BALF IL-10含量。所有檢測步驟均嚴格按照試劑盒的詳細說明進行操作。肺組織ICAM-1的表達水平通過光學顯微鏡進行檢驗，以細胞質棕黃色顆粒為陽性[1]。

1.3 評價標準

比較3組大鼠的BALF蛋白、BALF IL-10含量、肺組織ICAM－1表達水平。

1.4 統計學分析

利用SPSS 23.0進行統計處理，如果P＜0.05，表示差異有統計學意義。

2 結 果

B組大鼠的BALF蛋白、BALF IL-10含量、肺組織ICAM-1表達水平最高，其次是C組組，再來是A組，三組之間的BALF蛋白、BALF IL-10含量、肺組織ICAM-1表達水平差異比較，P＜0.05，具有統計學意義。見表1。

表1 比較3組大鼠的BALF蛋白、BALF IL－10含量、肺組織ICAM－1表達水平（±s）

表1 比較3組大鼠的BALF蛋白、BALF IL－10含量、肺組織ICAM－1表達水平（±s）

注：與A組相比，P＜0.05，與B組相比，P＜0.05

組別 只 BALF蛋白（mg/L） BALF IL－10含量（ng/L） 肺組織ICAM－1表達水平（OD 值）A組 27 33.1±8.2 20.3±2.8 0.2±0.6 B組 27 95.3±10.7 64.2±4.6 0.4±0.8 C組 27 70.2±9.4 52.4±3.7 0.3±0.7

3 討 論

H2S能夠參與急性肺損傷的病理過程，內源性H2S的供體硫氨基酸主要是因為酶促反應產生的，而NaHS是外源性H2S供體，因為臨床上NaHS的穩定性比較好，因此作為供體用于大鼠試驗，H2S在肺部疾病中，能夠發揮充分的調節作用，通過外源性H2S供體NaHS的作用能夠有效改善患者的肺組織損傷程度，具有極高的調節作用，因此在臨床上應用廣泛，H2S脂多糖造成急性肺損傷大鼠具有一定的保護作用，能夠降低BALF蛋白、IL－10含量，以及減輕肺組織ICAM－1表達水平，從而減少毛細血管損傷，達到抗炎的效果，起到保護肺組織的作用，值得推廣。