半胱胺和過瘤胃蛋氨酸不同組合對奶牛血液生化指標和養分消化率的影響

張仔堃，張玉利，李美玉，董瑞蘭，孫國強

（1.青島農業大學動物科技學院，山東青島 266109；2.濟南市畜牧技術推廣站，山東濟南 250306）

半胱胺（CS）又稱β-巰基乙胺，是構成輔酶A分子的成分，是存在于生物體內的生理調節劑，在動物體內代謝迅速，最終轉化為對動物體無害的胱胺、半胱胺酸、谷胱甘肽等（劉威等，2015）。王玲（2016）研究表明，CS（含量 30%）添加量為 20 g/（d·頭）可顯著提高奶牛血液中總蛋白（TP）含量和干物質（DM）表觀消化率，降低奶牛血液中尿素氮（BUN）含量。過瘤胃蛋氨酸（RPMet）對促進反芻動物小腸氨基酸平衡，提高飼料養分消化率和蛋白質利用效率有重要意義（李海霞等，2019）。研究表明，CS（含量30%）和RPMet 在奶牛飼糧中單一最適宜添加量分別為 20 g/（d·頭）（王玲，2016）和 25 g/（d·頭）（張成喜等，2017），目前，鮮見 CS和RPMet 聯合應用于奶牛生產的相關報道。本試驗在前期單獨添加的基礎上，研究CS 和RPMet組合添加對奶牛血液生化指標和養分消化率的影響，旨在探究最適添加水平組合，為CS 和RPMet的聯合使用提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 試驗材料 半胱胺組成為半胱胺鹽酸鹽、棕桐油、淀粉等，含量為40%，過瘤胃率為50%。過瘤胃蛋氨酸組成為DL－蛋氨酸、棕櫚油、二氧化硅，含量為60%，過瘤胃率為85%。均購自青島潤博特生物科技有限公司。

1.2 試驗設計及飼糧 選用煙臺荷牧園牧業有限責任公司（萊陽）提供的體重、胎次、產奶量及泌乳期相近的荷斯坦奶牛40 頭，隨機分為10 組，每組4 頭。預試期15 d，正試期60 d。試驗設計見表1，全混合日糧（TMR）組成及營養水平見表2。

1.3 飼養管理 每天采用全自動擠奶器 （丹麥SAC） 在 03:30、11:30、18:30 時擠奶，使用牽引式TMR 攪拌車在 03:30、13:00 時加料，試驗過程中保證每天每頭奶牛接觸到TMR 的時間在20 h 以上，自由采食。

表1 試驗設計 g/d

表2 TMR 組成及營養水平（干物質基礎）

1.4 血樣采集與指標測定 預試期的第1 天，正試期的第30、60 天晨飼前逐頭采取試驗牛頸靜脈血液20 mL。將采取的血液樣品在3500 r/min 下離心15 min，取上清液，-20 ℃冷凍保存。送至青島金域醫學檢驗有限公司，檢測血清中血糖（GLU）、 總蛋白 （TP）、 白蛋白 （ALB）、 球蛋白（GLOB）、谷丙轉氨酶（ALT）、谷草轉氨酶（AST）、尿素氮（BUN）、肌酐（CRE）等指標的含量。

1.5 TMR 和糞樣的采集與指標測定 于預試期第 1 天、 正試期第 28、58 天連續收集 3 d 試驗牛TMR 和糞樣。采用五點取樣法收集TMR 樣，并放入65 ℃烘箱中烘干、粉碎待用。采用直腸采糞法收集糞樣，每日 3 次，分別于 05:00、13:00、21:00時進行，將采集的糞樣混勻后稱重，并加硫酸進行固氮，硫酸濃度為10%，每100 g 樣品中加25 mL硫酸，并于-20 ℃冷凍保存。樣品中干物質（DM）、粗蛋白質（CP）、中性洗滌纖維（NDF）參照《中華人民共和國國家標準》（GB/T 6435—2006、GB/T 6432—2018、GB/T 20806—2006）測定。酸性洗滌纖維（ADF）參照《飼料中酸性洗滌纖維的測定》（NY/T 1459—2007） 測 定。酸 不 溶 灰分參 照Keulen 等（1977）方法測定，養分表觀消化率采用4N 鹽酸酸不溶灰分法計算。

1.6 數據處理 使用Excel 2010 軟件統計數據，應用IBMSPSS Statistics 22 軟件進行單因素方差分析，Duncan’s 多重比較法比較組間差異性，結果用“平均值±標準誤”表示，以P ＜0.05 表示差異顯著性。

2 結果與分析

2.1 CS 和RPMet 不同組合對奶牛血液生化指標的影響 由表3 可知，LH、MM、MH、HL、HM、HH 組血清總蛋白含量分別比C 組提高5.87%、6.38%、7.44%、8.83%、6.70%、6.06%（P ＜ 0.01），ML 組比 C 組提高 4.16%（P ＜ 0.05）。HL 組血清白蛋白含量比 C 組提高 9.55%（P ＜ 0.01），ML、MH、HM、HH 組 比 C 組 提 高 5.82% 、5.92% 、7.37%、6.96%（P ＜ 0.05）。LH、MM、MH、HL 組血清球蛋白含量比 C 組提高 7.33%、8.50%、8.67%、8.25%（P ＜ 0.05）。LH、ML、MM、MH、HL、HM、HH組血清尿素氮濃度比C 組降低7.27%、8.01%、8.90%、8.46%、9.50%、8.75%、8.16%（P ＜ 0.05）。

2.2 CS 和RPMet 不同組合對奶牛養分表觀消化率的影響 由表4 可知，各試驗組DM 消化率比C組提高1.19%、4.36%、2.08%、2.68%、4.04%、1.59%、6.00%、1.50%、5.60%（P ＜ 0.01）。LM、LH、MM、MH、HL、HH 組 CP 消化率比 C 組提高12.06%、10.61%、13.42%、13.5%、16.61%、14.88%（P ＜ 0.01），ML、HM組比 C 組提高 7.72%、9.97%（P ＜ 0.05）。LM、LH、MH、HL、HH 組 NDF 消化率比 C 組提高 10.94%、7.87% 、13.25% 、16.30% 、10.82% （P ＜ 0.01），ML、MM、HM 組比 C 組提高 7.06%、5.57%、3.65%（P ＜0.05）。MM、HL、HH 組 ADF 消化率比 C 組提高19.74%、20.39%、14.47%（P ＜ 0.01）。

表3 CS 和RPMet 不同組合對奶牛血液生化指標的影響

表4 CS 和RPMet 不同組合對奶牛養分表觀消化率的影響 %

3 討論

3.1 CS 和RPMet 不同組合對奶牛血液生化指標的影響 血液生化指標是反映動物機體生理狀況的重要依據。CS 分子內含有巰基和氨基等活性基團，能與生長抑素（SS）分子直接作用，從而提高奶牛體內生長激素（GH）含量（夏倫志等，2005）。CS 可通過自身途徑或間接通過谷胱甘肽起到抗氧化、 增強免疫功能的作用 （常新耀等，2010）。RPMet 有利于促進蛋白質的合成代謝，促進奶牛對飼料中營養物質的消化吸收 （王杰等，2017）。RPMet 能增加小腸可吸收氨基酸數量，有利于加快 NH3-N 向 MCP 的轉化（李海霞等，2019）。因此，聯合添加CS 和RPMet 有利于提高奶牛血清中TP、ALB、GLOB 含量，與本試驗研究結果一致。楊宏波等（2015）試驗發現，添加CS 的試驗組奶牛血清中BUN 含量低于對照組。張成喜等（2017）試驗表明，添加RPMet 能降低奶牛血清中BUN 含量。本試驗中添加水平較高的7 個試驗組血清BUN 含量顯著降低，這可能與聯合添加CS 和RPMet 促進了蛋白質的合成，降低了氮排泄有關。本試驗中，ALT 和AST 濃度無顯著變化，表明聯合添加CS 和RPMet 不會對奶牛肝臟和心臟造成損傷。

3.2 CS 和RPMet 不同組合對奶牛養分消化率的影響 CS 通過抑制奶牛體內SS 的活性，促進奶牛胃腸道消化液的分泌，加快腸道對飼料中營養物質的利用（常新耀等，2010）。CS 對奶牛瘤胃發酵有重要的作用，有利于奶牛瘤胃中淀粉和纖維素降解，促進奶牛對飼料中養分的吸收利用（周亞強，2018；祁宏偉，2018）。劉紅等（2015）在奶牛飼料中補飼 CS 后，飼料中 CP、NDF、ADF 的表觀消化率均有提高。蛋氨酸是奶牛體內蛋白質合成的主要限制性氨基酸，也是調控奶牛體內酶合成的必需氨基酸，能促進瘤胃發酵，提高小腸消化酶活性，有利于提高飼料養分消化率（李海霞等，2019）。劉博等（2019）研究表明，RPMet 能提高飼料中DM、CP、NDF 的表觀消化率。本試驗中，添加 CS 和 RPMet 的大部分試驗組，DM、CP、NDF、ADF 的消化率顯著提高。說明在奶牛飼料中添加CS 和RPMet 能改善奶牛瘤胃發酵狀況，提高小腸消化率，促進奶牛機體對飼料中營養物質的利用。

4 結論

飼料中添加不同水平組合的CS 和RPMet 能提高奶牛血清中總蛋白、 白蛋白和球蛋白含量并降低尿素氮濃度，能提高飼料中養分消化率。綜合考慮上述指標，以 HL 組，即 CS 17 g/（d·頭）、RPMet 23 g/（d·頭）為最佳添加組合。