不同殺菌劑對(duì)火龍果炭疽病菌的室內(nèi)毒力測(cè)定

鄭 偉，王 彬*，張 榮，王 荔，張永忠

(1.貴州省農(nóng)業(yè)科學(xué)院 果樹(shù)科學(xué)研究所，貴州 貴陽(yáng) 550006； 2.華南農(nóng)業(yè)大學(xué) 園藝學(xué)院，廣東 廣州 510462； 3.羅甸縣農(nóng)業(yè)農(nóng)村局，貴州 羅甸 550100)

火龍果因其明亮的紅色與綠色表皮覆蓋著鱗片似蛟龍的外鱗而得名，又稱仙蜜果、紅龍果、吉祥果和情人果等[1-3]，屬仙人掌科(Cactaceae)三角柱屬(Hylocereus)和西施仙人柱屬(Selenicereus)植物[4-5]。隨著火龍果生產(chǎn)的發(fā)展，近年來(lái)在集中連片種植區(qū)火龍果病蟲(chóng)害發(fā)生、流行呈加劇趨勢(shì)，導(dǎo)致火龍果產(chǎn)量和品質(zhì)下降，進(jìn)而影響火龍果種植效益。目前國(guó)內(nèi)有關(guān)火龍果病害及某些病害的藥劑試驗(yàn)已有文獻(xiàn)報(bào)道。火龍果上常見(jiàn)的病害有由平臍蠕孢屬(Bipolariscactivora)[6]、尖孢鐮刀菌(Fusariumoxysporum)和單隔鐮刀菌(Fusarium.dimerum)[7]、雙間柱頂孢〔Scytalidiumdimidiatum(Penz.)Sutton and Dyko〕[8]、歐文氏菌屬(Erwiniasp.)[9]及腸桿菌屬(Enterobactersp.)[10]等病原菌侵染引起的腐爛病，由大豆炭疽病菌(Colletotrichumtruncatum)、膠孢炭疽菌(C.gloeosporioides)[11-12]及平頭刺盤(pán)孢(C.truncatum)[13]引起的炭疽病，由尖孢鐮刀菌(F.oxysporumSchlecht)、色二孢屬(Diplodiasp.)、殼二孢屬(Ascochytasp.)和莖點(diǎn)霉屬(Phomasp.)[9]引起的枯萎病，由交鏈孢菌(Alternariasp.)[14]、球二孢屬(Botryodiplodiasp.)[15]及粘隔孢屬(Septogloeumsp.)[16]引起的莖斑病，由新暗色柱節(jié)孢屬(Neoscytalidiumdimidiatum)[17]引起的潰瘍病等。據(jù)初步調(diào)查，火龍果炭疽病是貴州火龍果種植區(qū)主要病害之一，枝條和果實(shí)均可發(fā)病，嚴(yán)重影響植株的生長(zhǎng)并威脅火龍果的生產(chǎn)效益。2014年前期研究中對(duì)貴州火龍果炭疽病作過(guò)鑒定，主要為膠孢炭疽菌(Colletotrichumgloeosporioides)和平頭刺盤(pán)孢(Colletotrichumtruncatum)。但目前相關(guān)研究還不是很多且不夠全面，其發(fā)生發(fā)展及防控等方面還有待深入研究。為此，采用生長(zhǎng)速率法，室內(nèi)測(cè)定不同殺菌劑對(duì)火龍果炭疽病菌的毒力作用，以期為火龍果炭疽病的防治提供安全有效的殺菌劑及用藥技術(shù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 供試菌株 火龍果膠孢炭疽菌和辣椒炭疽菌，課題組從采自羅甸、關(guān)嶺及望謨火龍果基地的典型發(fā)病火龍果標(biāo)本上分離、純化后獲得。

1.1.2 供試藥劑 選擇市面上常見(jiàn)的10種殺菌劑(表1)。

表1 供試藥劑的基本信息

1.2 方法

1.2.1 含藥培養(yǎng)基的配制 將10種藥劑分別按試驗(yàn)要求配制成所需的系列濃度藥液，以1∶9的比例與測(cè)定用培養(yǎng)基混合均勻即得到系列濃度梯度的含藥培養(yǎng)基備用。

1.2.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 利用生長(zhǎng)速率法對(duì)菌絲生長(zhǎng)進(jìn)行室內(nèi)毒力測(cè)定，篩選高效低毒的化學(xué)藥劑。針對(duì)膠孢炭疽菌和辣椒炭疽菌菌株分別采用雙因素試驗(yàn)進(jìn)行測(cè)定，其中，因素1為藥劑，因素2為濃度，每個(gè)藥劑5個(gè)濃度，共設(shè)35個(gè)處理(表2)，以不加藥劑為對(duì)照(CK)，5次重復(fù)。將膠孢炭疽菌和辣椒炭疽菌菌株接種在PDA平板上于25℃培養(yǎng)3 d后，用內(nèi)徑為5 mm的打孔器把菌落打成菌餅，在無(wú)菌操作下移植到含有不同藥劑的PDA平板上，將帶菌絲的一面接觸培養(yǎng)基，在25℃恒溫培養(yǎng)5 d。

表2 不同藥劑對(duì)2種病原菌室內(nèi)毒力測(cè)定的處理濃度

1.2.3 指標(biāo)測(cè)定 用十字交叉法測(cè)量菌落直徑，取平均值，計(jì)算抑制率。將抑制率根據(jù)反應(yīng)率-機(jī)率值轉(zhuǎn)換表?yè)Q算成抑制機(jī)率值，以設(shè)定藥劑濃度的對(duì)數(shù)(x)為橫坐標(biāo)，以抑制率(y)為縱坐標(biāo)，作回歸直線，擬合各藥劑分別對(duì)火龍果莖枯病病原菌的毒力回歸方程，計(jì)算抑制中濃度(EC50)及相關(guān)系數(shù)(r)。

抑制率=

1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

采用農(nóng)藥室內(nèi)生物測(cè)定數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)(Pesticidea Laboratory Boiactvity Testa Data Syatem)處理數(shù)據(jù)。

2 結(jié)果與分析

2.1 7種殺菌劑對(duì)火龍果膠孢炭疽菌的毒力

由表3看出，7種藥劑各濃度對(duì)膠孢炭疽菌均有不同程度的抑制作用，且隨著濃度升高抑制率呈增加趨勢(shì)。其中，克菌丹的抑制率為15.38%～71.74%，代森錳鋅為10.15%～100.00%，多菌靈為10.15%～96.71%，戊唑·福美雙為13.22%～88.65%，丙森鋅為30.36%～87.14%，咪鮮胺為27.96%～79.97%，氟菌·肟菌酯為33.67%～96.23%。由表4看出，7種殺菌劑使用濃度與其對(duì)火龍果膠孢炭疽菌的抑制率間均存在良好的線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)為0.933 5～0.987 3，也說(shuō)明隨著藥劑濃度升高抑制率呈增加趨勢(shì)；7種殺菌劑對(duì)火龍果膠孢炭疽菌的毒力大小依次為戊唑·福美雙>多菌靈>咪鮮胺>氟菌·肟菌酯>丙森鋅>代森錳鋅>克菌丹，其中，以戊唑·福美雙的藥效最好，EC50為22.387 6 μg/mL，其次是多菌靈、咪鮮胺和氟菌·肟菌酯，EC50分別為33.183 6 μg/mL、36.112 7 μg/mL和37.870 9 μg/mL，再次是丙森鋅、代森錳鋅，EC50分別為53.058 1 μg/mL和69.196 6 μg/mL，克菌丹的藥效最差，EC50為151.246 4 μg/mL。

表3 不同藥劑對(duì)膠孢炭疽菌菌絲生長(zhǎng)的抑制效果

Table 3 The Inhibition effect of different fungicides on pathogen mycelium ofC.gloeosporioides

藥劑名稱Agent name濃度/(μg/mL)Concentration菌落直徑/mmColony diameter抑制率/%Inhibition ratio克菌丹834.7222.3371.74 Captan278.2428.2064.1192.7441.6746.6330.9260.6721.8910.3165.6715.38代森錳鋅800.804.00100.00 Mancozeb266.9317.3381.1888.9832.2560.1329.6659.0022.389.8967.6710.15多菌靈500.506.3396.71 Carbendazim166.8313.6786.3555.6119.6777.8918.5355.3327.566.1867.6710.15戊唑·福美雙150.089.3388.65 Oftebuconzole · thiram50.0335.3354.8415.5843.3344.435.5656.5027.311.8567.3313.22丙森鋅875.0011.3387.14 Propineb291.6718.6773.8097.2226.3360.1332.4134.3345.8410.8043.0030.36咪鮮胺700.7016.0079.97 Prochloraz233.5724.0069.5777.8628.0064.3725.9537.3352.248.6456.0027.96氟菌·肟菌酯857.726.6796.23 Fluopyram·otrifloxystrobin285.9112.5088.0095.3031.6760.9531.7643.2544.6110.5951.0033.67

表4 不同藥劑對(duì)膠孢炭疽菌的室內(nèi)防治效果

2.2 7種殺菌劑對(duì)火龍果辣椒炭疽菌的毒力

由表5看出，7種藥劑各濃度對(duì)辣椒炭疽菌均有不同程度的抑制作用，且隨著濃度升高抑制率呈增加趨勢(shì)。其中，百菌清的抑制率為17.54%～44.74%，克菌丹的抑制率為7.60%～88.30%，代森錳鋅為11.56%～100.00%，戊唑·福美雙為15.76%～86.05%，波爾·錳鋅8.68%～78.23%，甲基硫菌靈62.04%～74.67%、氟菌·肟菌酯38.26%～53.02%。由表6看出，7種藥劑使用濃度與對(duì)辣椒炭疽菌的抑制率間均存在線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)為0.957 1～0.989 1，也說(shuō)明隨著藥劑濃度升高抑制率呈增加趨勢(shì)；7種殺菌劑對(duì)火龍果辣椒炭疽菌的毒力大小依次為甲基硫菌靈>戊唑·福美雙>克菌丹>代森錳鋅>波爾·錳鋅>氟菌·肟菌酯>百菌清，其中，甲基硫菌靈的藥效最好，EC50為0.465 5 μg/mL，其次是戊唑·福美雙，EC50為15.396 5 μg/mL，再次是克菌丹、代森錳鋅和波爾·錳鋅，EC50分別為142.290 5 μg/mL、206.460 4 μg/mL和586.683 3 μg/mL，氟菌·肟菌酯和百菌清的藥效最差，EC50分別為1 046.098 9 μg/mL和2 938.796 1 μg/mL。

表5 不同藥劑對(duì)辣椒炭疽菌菌絲生長(zhǎng)的抑制效果

Table 5 Inhibitory effects of seven fungicides on the mycelial growth ofC.capsici

藥劑名稱Agent name濃度/(μg/mL)Concentration菌落直徑/mmColony diameter抑制率/%Inhibition ratio百菌清1 252.0937.5044.74 Chlorothalonil417.3642.5035.96139.1245.3331.0046.3747.2527.6315.4653.0017.54克菌丹834.7212.6788.30 Captan278.2420.0075.4492.7438.6742.6830.9248.5025.4410.3158.677.60代森錳鋅1 000.000.50100.00 Mancozeb333.3333.1054.68111.1152.6723.1137.0454.3320.4412.3459.8311.56戊唑·福美雙150.0811.6786.05 Oftebuconzole · thiram50.0320.0070.9115.5833.0047.275.5637.0040.001.8550.3315.76波爾·錳鋅2 500.0018.5078.23 Boer·mancozeb833.3335.2551.21277.7844.6736.5692.5961.339.1530.8473.008.68甲基硫菌靈563.2024.6774.67 Thiophanate methyl187.7326.3371.7662.5830.0066.6720.8630.6765.746.9533.3362.04氟菌·肟菌酯857.7241.0053.02 Fluopyram·otrifloxystrobin285.9142.6750.7895.3042.3351.2331.7650.0040.9410.5952.0038.26

表6 不同藥劑對(duì)辣椒炭疽菌的室內(nèi)防治效果

3 結(jié)論與討論

研究結(jié)果表明，不同藥劑各濃度對(duì)火龍果炭疽病菌菌絲均有不同程度的抑制作用，其抑制率隨濃度的增加而增加，同時(shí)不同藥劑抑制率也存在明顯差異。戊唑·福美雙對(duì)膠孢炭疽菌的藥效最好，EC50為22.387 6 μg/mL；其次是多菌靈、咪鮮胺和氟菌·肟菌酯，EC50分別為33.183 6 μg/mL、36.112 7 μg/mL和37.870 9 μg/mL；其余藥劑的藥效相對(duì)較差。甲基硫菌靈對(duì)辣椒炭疽菌的藥效最好，EC50為0.465 5 μg/mL；其次是戊唑·福美雙，EC50為15.396 5 μg/mL；其余藥劑藥效相對(duì)較差。但是在大田生產(chǎn)中，由于病原物、寄主和環(huán)境之間存在復(fù)雜的關(guān)系，施藥量較大。因此，對(duì)篩選出的藥劑直接應(yīng)用于大田防治，對(duì)相應(yīng)病害是否有明顯的防治效果，尚需進(jìn)一步深入研究。