豬場診斷實驗室在豬病防控中的作用及其應用

馮建遠 馬青蘭 郭 旋趙放英 劉德清 羅 偉 曾 香 張 寧

（廣西農墾永新畜牧集團金光有限公司，廣西南寧 530023）

在當前的養豬行業中，新病突發、老病復發或老病新型新發的情況不斷出現，如非洲豬瘟的發生與威脅，豬丹毒、豬偽狂犬病、不同亞型的口蹄疫和高致病性豬繁殖與呼吸綜合征的感染。此外，在豬場生產過程中還存在著不同程度的隱性感染、非典型癥狀感染和混合感染，使得獸醫很難根據臨床癥狀和病理變化進行確診，必須依靠正確的檢測結果進行判斷。正確的鑒別診斷對于某種疾病的適時預警大有裨益，準確的診斷是豬病治療的前提，抗體水平監測是制定科學合理免疫程序的關鍵，而這些工作的有序開展終究離不開實驗室的支撐[1]。

相比市場上獨立的經營性檢測機構，養豬企業或豬場配備診斷實驗室（以下統稱為“豬場診斷實驗室”）在豬病防控中的作用會更加明顯，可以使檢測更有針對性，結果更加快速、分析更加貼近生產一線，指導意見更能發揮豬場庫存用藥的習慣。

1 豬場診斷實驗室在豬病防控中的作用

1.1 建立穩固的豬場生物安全體系

通過實驗室的輔助作用，建立并加固豬場的生物安全體系，一是通過實驗室檢測把關好人流、豬流、車流和物流進入豬場的關卡，杜絕豬病傳染源進入豬場，特別是在當前非洲豬瘟疫情防控中，通過有檢測資質的實驗室對待入或靠近豬場的人員、豬群、車輛和物資進行檢測，及時將病毒隔絕在場外；二是通過實驗室檢測將感染豬只快速識別并清除，避免其他動物的感染與傳播，比如某種特定疾病的凈化；三是通過篩選有效藥物、疫苗提高豬群的健康度，抵抗疾病的威脅。

1.2 針對性病原檢測，快速確診疾病，對癥治療

在豬場正常生產中，定期對豬場豬群進行病原學檢測，了解豬群是否攜帶或感染某種病原，從而了解豬群的健康狀況，一旦豬場生產情況出現異常或豬只發病，豬場診斷實驗室可以第一時間到達現場，通過臨床癥狀和病理變化對其進行初步診斷，再通過實驗室針對性的及時檢測，達到快速確診疾病，采取科學合理的方案控制疫情，防止疾病的蔓延，減少豬場損失。

同時，對病原檢測陽性的樣品，可以進行進一步的實驗室鑒定。比如分離細菌的亞型鑒定，區分某些病毒是野毒株還是疫苗株的感染，如豬偽狂犬病毒；也可以做到經典株和高致病性變異株的區分，如豬繁殖與呼吸綜合征病毒。

1.3 細菌分離，了解細菌感染情況和耐藥情況，更加科學合理用藥

從豬場樣品中分離鑒定的致病菌，豬場診斷實驗室可以進行進一步的生物學鑒定，同時選擇豬場常用藥物進行藥敏試驗，這樣可以了解豬場常見菌的分布情況、藥物耐藥情況，以評估階段性用藥效果，為豬場科學合理用藥、更換用藥提供依據。

1.4 抗體監測，監測豬群健康，制定和優化合理的免疫程序

按照制定的年度豬群主要疫病監測方案，對豬場各階段豬群進行相應的抗體監測。

通過檢測血清抗體的變化，了解豬群的整體免疫狀況，及早發現問題，及早采取措施，對豬群的群體健康起到一種預警的作用。以常使用的IDEXX公司藍耳病抗體S/P值為例，S/P值檢測的是N蛋白，和藍耳病病毒中和抗體沒有任何相關性，它反映的是豬群的藍耳病病毒波動狀態。育肥豬發生嚴重呼吸道疾病，母豬出現發燒、流產、不食等癥狀，通過病原檢測只有藍耳病病毒甚至沒檢測到任何病原，其他項目抗體檢測均未發現異常，只是此時S/P會出現急劇的升高，和臨床癥狀基本是同步的。那么通過這一特性可以對公豬、后備豬等進行健康狀態的監測，以判斷公豬是否可用或后備豬能否入群[2]。

根據抗體消長規律，制定或優化合理的免疫程序。如對豬群各階段的豬瘟抗體進行監測（見圖1），陽性率低于30%或平均阻斷率在45%左右時考慮進行首免[2]，確定豬瘟首免時間為4～5周齡；小豬偽狂犬gB抗體S/N值在0.3左右時考慮首免等[3]。

1.5 篩選有效的藥物和疫苗

從豬場樣品中分離鑒定的致病菌，獸醫實驗室根據豬場常用的藥物對其進行進一步的藥物敏感性試驗或者消毒藥的消殺試驗，以評估目前所用藥物的效果，也給豬場選擇抗生素和消毒藥提供依據，從而更加有效控制原發性和繼發性細菌感染。

此外，合理的運用抗體檢測手段有助于篩選出適合本場的優秀疫苗，如豬瘟抗體阻斷率和中和抗體水平呈正相關，可以通過種豬免疫豬瘟疫苗后4～6周的豬瘟抗體水平來初步評價疫苗效果；偽狂犬gB抗體S/N值高低可以用來比較不同廠家偽狂犬疫苗的效果等[3]。

1.6 毒素檢測，了解飼料霉菌毒素情況，防止霉菌毒素危害

豬場環境中和飼料中的霉菌毒素，不但會降低飼料營養、引起飼料資源浪費，而且還可能影響豬只的細胞代謝，抑制免疫系統機能，降低機體抵抗力。其中對豬只危害最為嚴重的主要有黃曲霉毒素（AFT）、赭曲霉毒素（OTA）、煙曲霉毒素/伏馬毒素（FUM）、玉米赤霉烯酮（ZON）、嘔吐毒素（DON）和T2毒素。豬場診斷實驗室通過對飼料原料和成品料，以及豬場現場料槽等進行定期的取樣檢測，就可以了解飼料原料、成品料及豬舍環境中的毒素含量，并據此采取必要措施規避其危害。

1.7 疫病凈化，制定并實施可行有效的疫病凈化方案

通過對某種特定疫病病毒的抗體水平監測，了解豬場該特定病原的存在情況，確定感染豬群或豬只，制定適合豬場的凈化方案。比如豬偽狂犬病，豬只一旦感染偽狂犬病毒，將會終身帶毒，可以根據實驗室的檢測結果進行抗體篩查—淘汰—免疫等措施進行凈化（圖2）。

2 獸醫診斷實驗室工作的開展及注意事項

在獸醫診斷實驗室開展工作的過程中，不僅要注重檢測的準確性和時效性，更為重要的是檢測后數據的綜合科學分析和防控措施的規劃。因此，快速、準確的實驗室診斷對于豬病防控的作用不言而喻，而如何確保檢測結果的可靠、可信，則需要從采樣、運輸、檢測、分析4個方面科學把握。

2.1 臨床樣品的采集與送檢

2.1.1 血清學抗體監測

前腔靜脈或耳緣靜脈采血2～5 mL，血液4℃冷藏送樣，避免震蕩造成溶血。群體采集根據豬場情況具體實施，但應滿足一定統計學意義（可參考不同規模養豬場疫病抗體監測樣本推薦采樣分布及數量參照表）。樣品需4℃保存并及時送到實驗室，越快越好，最好在24 h內送至實驗室，一般不能超過48 h。

2.1.2 發病病原檢測

選擇臨床癥狀典型、能代表整個豬群發病特點的病豬2～3頭進行剖解，根據懷疑疫病采集病原嗜性組織，以淋巴結、扁桃體、肺臟、腎臟、脾臟、血樣為主。作細菌性病原檢測，應該選擇送檢前5～7 d內未使用抗生素治療的待剖豬只。內臟病料的采取，不能選擇死亡3 h以上的死亡豬只的病料。采樣后4℃保存，運送至實驗室后馬上開展檢測工作，如不能及時送至實驗室或者實驗室不能馬上開展樣品處理和檢測，應－20℃凍存，嚴禁檢測前反復凍融。

2.2 臨床樣品的檢測與分析

全面、準確的檢測結果分析對于防控措施的提出和實施至關重要。因此，除了將檢測與分析有機結合外（如樣品采集與處理的細節，檢測環境的干擾等），還要根據豬場的實際情況考慮分析，包括豬場的飼養環境、管理水平、豬群的群體健康狀況，以及發病豬只的發病情況和治療情況，豬場歷史疾病發生情況，豬場所在區域疾病流行現狀等。并且做到豬場檢測數據、檢測結果、預防與治療效果的持續性跟蹤服務，只有這樣，才能發揮獸醫診斷實驗室的最大效用。

2.3 獸醫診斷實驗室工作人員的要求

在開展獸醫診斷實驗室工作的過程中，對實驗室工作人員的要求也很高：一是考量工作人員的細心和耐心，因為開展一項檢測工作，準備工作比較繁瑣，操作時間較長；二是工作人員要有一定的實驗室操作經驗，比如有經驗的人員比較懂得選擇合適的采樣時機和采樣部位。同時檢測的儀器比較精密，試劑量小且易受污染，對工作人員的實操經驗是很大的考驗。三是工作人員要有扎實的豬場生產管理經驗以及與豬場溝通的水平，這樣對于檢測數據的分析、處理措施的落實與跟蹤，效果的評估很有意義，也保證了一項檢測工作的有效性。四是豬場診斷實驗室工作人員的培養成本也是一筆不小的開支，因此，要留住有經驗的實驗室工作人員，需要提供一定的收入水平和職業生涯平臺。

3 小結

豬場診斷實驗室在豬病防控中的作用舉足輕重，無論是哪方面的應用，都應將檢測與分析，實驗室與豬場相結合，并做好持續性的跟蹤。只有如此，才能發揮獸醫診斷實驗室的最大效用。科學專業的檢測手段加之合理可行的解決方案遠比免費的增值服務來的劃算。據統計，如果豬場每年的實驗室檢測成本為2萬元，那么通過專業的實驗室檢測并積極采取科學合理的保健和免疫措施，可挽回因發病而引起的經濟損失和隱性損失20萬～200萬元。因此，獸醫診斷實驗室對豬病防控至關重要。

可以預想，由于更多的豬場診斷實驗室更直接地參與到豬場生產中來，豬場預警系統必將越來越完善，終將有一天我們的豬場不用忙于“整天救火”，而是從容淡定地進行健康管理。