豬敗血型鏈球菌K-B法藥敏試驗

（鐵嶺縣現代農業發展中心，遼寧 鐵嶺 112000）

1 試驗材料

1.1 微生物培養設備

鮮血營養瓊脂培養基、恒溫箱、細菌接種環、無菌棉簽及滅菌柜等設備。

1.2 藥敏紙片

購于上海金穗生物科技有限公司和自制藥敏紙片。

1.3 試驗菌種

從發病豬場典型病豬分離到的致病性鏈球菌。

表1 豬敗血型鏈球菌藥敏試驗結果

2 試驗過程

2.1 豬敗血型鏈球菌的菌種分離

在濕熱的夏季，豬場出現發病豬，其癥狀符合敗血型鏈球菌病的特征。豬死亡后通過剖檢發現疑似敗血型豬鏈球菌病[2]。取病死豬心血和脾臟病料，實驗室無菌操作接種于鮮血瓊脂平板培養基，37℃培養24 h，取出觀察。菌落為淡黃色圓形，有溶血現象，染色，顯微鏡下為5～10個連結成鏈、革蘭氏染色呈陽性的球狀桿菌。取菌落置于生理鹽水混懸液中，分別給仔豬口服和肌肉注射，均出現感染。從仔豬心血和脾臟中分離出鏈球菌，保留菌種，作為藥敏試驗野毒菌種。

2.2 藥敏紙片的制作

除購買的藥敏紙片外，還自制部分抗菌藥物紙片，取有效濃度的抗菌藥物制劑1 mL，充分浸濕直徑6 mm的圓形滅菌濾紙片100張，37℃風干備用。

2.3 藥敏試驗的操作

依據紙片法藥敏試驗操作規程，進行以下試驗[3]。

取鮮血瓊脂培養基，在滅菌柜內使用滅菌棉簽涂布接種鏈球菌生理鹽水菌液，保證培養基表面被涂抹均勻形成菌膜。

從每類抗菌藥物中選取1～3種代表性藥物紙片進行試驗，均勻粘貼藥敏紙片，每片間隔10 mm以上，置于恒溫箱內，37℃培養18～24 h。

3 試驗結果

本地區連續2年的藥敏試驗結果：

體外瓊脂擴散藥敏試驗結果表明，阿莫西林、磺胺間甲氧嘧啶、磺胺嘧啶鈉及頭孢噻呋鈉最為敏感。在試驗中，以阿莫西林、氨芐西林、頭孢噻呋鈉的抑菌圈最為明亮且邊緣整齊，說明抑菌或殺菌效果顯著。

4 討論

從本地分離到的野毒致病性鏈球菌，對阿莫西林、磺胺間甲氧嘧啶、磺胺嘧啶鈉和頭孢噻呋鈉最為敏感，說明上述藥物適于在發病時使用。考慮到豬敗血型鏈球菌病死亡速度較快，在用藥治療時應選擇作用迅速、敏感性高的藥物。實踐表明，阿莫西林和復合磺胺有較好的治療效果。