共聚焦超分辨率成像與SIM超分辨率成像在蒿草生物組織樣本熒光成像中的使用價值分析

吳偉全 王思捷 楊 騰 吳 平▲ 李元歌

1.廣東醫科大學附屬醫院臨床醫學研究中心，廣東湛江 524001；2.廣東醫科大學附屬醫院放射科，廣東湛江 524001

激光掃描共聚焦顯微鏡（laser scanning confocal microscopy，LSCM）在生物組織樣本熒光成像相關研究中，是一種使用率非常高和功能非常強大的成像工具[1-3]。隨著激光掃描共聚焦顯微鏡的發展，新型的激光掃描共聚焦顯微鏡配有超分辨率成像模塊，可對生物組織樣本進行超分辨率熒光成像[4]。結構光照明顯微鏡（structured illumination microscopy，SIM）是一種新型的超分辨率顯微鏡，也可對生物組織樣本進行SIM超分辨率熒光成像[5-7]。但目前兩種新顯微鏡在超分辨率熒光成像相關對比研究較少，需深入分析研究。本實驗通過激光掃描共聚焦顯微鏡和結構光照明顯微鏡對蒿草組織樣本進行熒光成像，對共聚焦超分辨率成像與SIM超分辨率成像在生物組織樣本成像中的使用價值進行分析研究。

1 資料與方法

1.1 一般資料

激光掃描共聚焦顯微鏡為日本奧林巴斯公司的激光掃描共聚焦顯微鏡（OLYMPUS FV3000， SN：7L88410），其配有奧林巴斯圖像超分辨率重構成像模塊（olympus super resolution， OSR）；結構光照明顯微鏡為日本尼康公司的N-SIM超分辨率顯微鏡（Nikon N-SIM， SN：600001）；樣本為德國Leica顯微鏡公司的DAPI染色、FITC染色及TRITC染色蒿草組織切片。

1.2 實驗分組及觀察指標

實驗分為三組：（1）使用激光掃描共聚焦顯微鏡對蒿草組織樣本共聚焦普通成像（10倍，20倍，60倍和100倍物鏡）；（2）使用激光掃描共聚焦顯微鏡的OSR超分辨率成像模塊對蒿草組織樣本超分辨率成像（100物鏡）；（3）使用尼康公司的N-SIM超分辨率顯微鏡對蒿草組織樣本超分辨率成像（100物鏡）。……