曲靖市栽培半夏質量考察

朱正華 王 喆 張 馨

曲靖市食品藥品檢驗檢測中心，云南 曲靖 655000

半夏之名始見于《禮記·月令》，“五月半夏生，蓋當夏半也”，《本草綱目》及《神農本草經》等經典著作中均有記載。依據其附圖及文字說明即可確定本草半夏與2015版《中國藥典》記載的半夏為同一種屬。半夏(Pinellia ternata)屬天南星目天南星科半夏屬植物，古稱地文、守田等，云南又名地珠半夏，藥用部位為其干燥塊莖。野生于山地、農田、溪邊或林下[1]，云南屬主產區之一。半夏喜溫和潮濕、蔭蔽的沙壤土環境，怕干旱及強光照射，耐寒，塊莖能夠自然越冬。繁殖主要以塊莖和珠芽為主。半夏為多年生草本，塊莖球形，夏、秋二季采挖，洗凈，除去外皮和須根，曬干即可入藥。塊莖含有揮發油如：茴香腦，檸檬醛、1-新烯、β-辛香烯等。還含有有機酸、生物堿、微量元素等[2]。味辛、性溫，有毒。歸脾、胃、肺經。因半夏有毒性，其對眼、咽喉、胃腸等粘膜具有強烈的刺激性。故內服入藥前須炮制去毒，保證其藥用的安全、有效。根據炮制方法的不同，分為法半夏、姜半夏、清半夏、醋制半夏等。具有燥濕化痰、降逆止吐、消痞散結等作用。用于治療濕痰寒痰，咳喘痰多，痰飲眩悸，風痰眩暈，胸悶脹滿、惡心嘔吐。外用治癰腫痰核[3]。

曲靖市屬半夏主產區之一，傳統以野生半夏入藥，但由于野生半夏資源日趨減少，不能滿足臨床需要，故需發展半夏的家種栽培來緩解半夏市場的供需矛盾[4]。半夏的主要活性成份為多種生物堿、氨基酸[5]，本文以《中國藥典》2015年版為依據通過對曲靖產半夏的原植物形態、藥材外觀性狀、顯微特征、薄層色譜鑒別、總酸含量測定等多個指標的研究，從而確定家種半夏的質量，為曲靖市地產半夏的人工種植、開發利用及臨床應用提供理論依據。

藥材來源： A：富源縣后所鎮鐵翅藥材種植基地 B：師宗縣丹鳳鎮藥材種植基地 C：沾益縣炎方鄉藥材種植基地

1 儀器與材料

1.1 儀器 OLYMPUS電子顯微鏡(日本)；瑞士萬通916型全自動電位滴定儀；METTLER TOLEDO XS 105電子天平(梅特勒-托利多儀器有限公司)；HH-4型數顯恒溫水浴鍋(國華電器有限公司)；AS系列超聲波清洗機(天津奧特賽恩斯儀器有限公司)。

1.2 材料 半夏對照藥材(批號：121272-201806)、纈氨酸對照品(批號：140681-201703)、亮氨酸對照品(批號：140687-201804)、精氨酸對照品(批號：140685-201707)、丙氨酸對照品(批號：140680-201604)等均為中國食品藥品檢定研究院提供；硅膠G薄層板(青島海洋化工廠)；甘油(丙三醇)、乙醇、石油醚(60～90 ℃)、乙酸乙酯、丙酮、甲酸、甲醇、乙醚、三氯甲烷、硫酸、正丁醇、冰醋酸、茚三酮、氫氧化鈉為國產分析純；水為超純水。

2 方法與結果

2.1 鑒別

2.1.1 原植物形態鑒別 塊莖圓球形，直徑1～2 cm，具須根。葉2～5枚，幼時單葉。葉柄長5～8 cm，基部具鞘，鞘內、鞘部以上或葉片基部(葉柄頂頭)有直徑3～5 mm的珠芽，珠芽在母株上萌發或落地后萌發；幼苗葉片卵狀心形至戟形，為全緣單葉，長2～3 cm，寬2～2.5 cm；老株葉片3全裂，裂片綠色，背淡，長圓狀橢圓形或披針形，兩頭銳尖，中裂片長3～10 cm，寬1～3 cm；側裂片稍短；全緣或具不明顯的淺波狀圓齒，側脈8～10對，細弱，細脈網狀，密集，集合脈2圈。花序柄長25～30(-35)cm，長于葉柄。佛焰苞綠色或綠白色，管部狹圓柱形，長1.5～2 cm；檐部長圓形，綠色，有時邊緣青紫色，長4～5 cm，寬1.5 cm，鈍或銳尖。肉穗花序：雌花序長2 cm，雄花序長5～7 mm，其中間隔3 mm；附屬器綠色變青紫色，長6～10 cm，直立，有時“S”形彎曲。漿果卵圓形，黃綠色，先端漸狹為明顯的花柱。花期5～7月，果8月成熟。結果：A、B、C三個樣品的原植物形態均符合以上描述，經鑒定均為藥典品半夏Pinelliaternata(Thunb.)Breit．

2.1.2 性狀鑒別 本品呈類球形，有的稍偏斜，直徑1～1.5 cm。表面白色或淺黃色，頂端有凹陷的莖痕，周圍密布麻點狀根痕；下面鈍圓，較光滑。質堅實，斷面潔白，富粉性。氣微，味辛辣、麻舌而刺喉。具體見圖1。此外，在云南很多地方有半夏的習用品、代用品。如盾葉半夏、土半夏、掌葉半夏等，均為民間習用草藥，在用法和功效上也與藥典半夏有所不同，不能混用，以免影響半夏的臨床療效。

樣品A 樣品B 樣品C圖1 半夏樣品圖

2.1.3 顯微鑒別 本品粉末類白色：①淀粉粒：甚多，單粒類圓形、半圓形或圓多角形，臍點裂縫狀、人字狀或星狀；復粒由2～6分粒組成。②草酸鈣針晶：成束存在于橢圓形黏液細胞中，或隨處散在，針晶長20～144 μm。③導管：螺紋為主，直徑10～24 μm。 粉末顯微圖見圖2。

1 2 31.淀粉粒；2.草酸鈣針晶；3.導管圖2 樣品的顯微特征

2.1.4 薄層色譜鑒別 取本品粉末1 g，加乙醇10 mL，加熱回流1 h，濾過，濾液濃縮至0.5 mL，作為供試品溶液。另取半夏對照藥材1 g，同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法(通則0502)試驗，吸取上述兩種溶液各5 μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以石油醚(60～90 ℃)-乙酸乙酯-丙酮-甲酸(30∶6∶4∶0.5)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105 ℃加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。如圖3。

1 2 3 4 5 6 7 8 9注：1、2為樣品A；3、4為對照藥材；5、6為樣品B；7、8、9為樣品C圖3 半夏薄層色譜圖(1)

取本品粉末1 g，加甲醇10 mL，加熱回流30 min，濾過，濾液揮至0.5 mL，作為供試品溶液。另取精氨酸對照品、丙氨酸對照品、纈氨酸對照品、亮氨酸對照品，加70%甲醇制成每1 mL各含1 mg 的混合溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(通則0502)試驗，吸取供試品溶液5 μL、對照品溶液1 μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正丁醇-冰醋酸-水(8∶3∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以茚三酮試液，在105 ℃加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。如圖4。

A B C 混合對照品圖4 半夏薄層色譜圖(2)

2.2 檢查

2.2.1 水分 水分測定按照2015年版《中國藥典》四部(通則0832)第二法(烘干法)測定三批藥材水分，規定本品水分不得超過14.0%，結果A、B、C三個樣品的水分均符合規定。結果見表1。

表1 樣品水分含量

2.2.2 總灰分[8]按照灰分測定法《中國藥典》2015年版四部(通則2302) 測定三批藥材總灰分，規定本品總灰分不得超過4.0%，結果A、B、C三個樣品的總灰分均超過規定限度，不符合規定。見表2。

表2 樣品總灰分

2.2.3 浸出物[6]按照水溶性浸出物項下的冷浸法，《中國藥典》2015年版四部(通則2201)測定三批藥材浸出物，規定本品水溶性浸出物不得少于9.0%，結果A、B、C三個樣品的浸出物均符合規定。見表3。

表3 品浸出物含量

2.3 含量測定[7]采用直接電位滴定法測定總酸含量。取本品粉末(過四號篩)約5 g，精密稱定，置錐形瓶中，加乙醇50 mL，加熱回流1 h，同上操作，再重復提取2次，放冷，濾過，合并濾液，蒸干，殘渣精密加入氫氧化鈉滴定液(0.1 mol/L)10 mL，超聲處理(功率500 W，頻率40 kHz)30 min，轉移至50 mL量瓶中，加新沸過的冷水至刻度，搖勻，精密量取25 mL，照電位滴定法(通則0701)測定，用鹽酸滴定液(0.1 mol/L)滴定，并將滴定的結果用空白實驗校正。每1 mL氫氧化鈉滴定液(0.1 mol/L)相當于5.904 mg的琥珀酸(C4H6O4)。本品按干燥品計算，含總酸以琥珀酸(C4H6O4)計，不得少于0.25%，結果A、B、C三個樣品的總酸含量均符合規定。見表4。

表4 樣品總酸含量

3 討論

研究從原植物形態、藥材性狀、顯微鑒別[11]、薄層色譜鑒別、水分檢查、總灰分檢查、浸出物檢查、總酸的含量測定這幾方面來對比考察曲靖栽培半夏的藥用質量，除總灰分測定超出規定限度以外，其他幾項均符合2015年版《中國藥典》的要求。

浸出物分別以水、乙醇和甲醇為溶劑，照水溶性浸出物項下的冷浸法和熱浸法測定。實測藥材3批結果表明，采用水為溶劑，熱浸法與冷浸法的浸出物較高，且差異不大。根據方便快捷、可行性高為原則，本標準選擇水溶性浸出物項下的冷浸法[6]。

酸堿滴定法一般常用于中藥中總有機酸含量的測定，但由于中藥的水提液或醇提液常常具有較深的顏色，指示劑的選擇受到了限制，同時滴定終點指示不明顯，影響實驗的準確性。而電位滴定法是利用電極電位的突躍來指示終點的，并可實現自動化和連續滴定，具有靈敏、準確、可靠等優點[7]，因此用直接電位法對半夏中總游離有機酸含量進行測定。半夏中所含化學成分比較復雜，如還含有多種氨基酸和生物堿，炮制品法半夏中還含有甘草次酸等，其有效成分及毒性成分尚未完全明確[10]，所以現在只能以含量偏高、樣品處理方法不太繁雜、檢測成本不高的總酸為其控制指標，隨著檢測技術的不斷提高，對其有效成分及毒性成分的含量測定會不斷走向科學化、標準化和成熟化。

質量檢測中總灰分的測定超標，灰分測定是衡量中藥材質量的重要指標，它反應了藥材中摻假及其受污染的程度，一般中藥材的總灰分通常都在一定的范圍內，故可用于中藥材的純度檢查[8]。實驗測定三批次供試品的總灰分測定結果均超出《中國藥典》2015年版規定的中藥材總灰分的最高限量，則必定有其他無機物污染或摻雜，常見的無機物為泥土、砂。根據對采集樣品的仔細觀察比較，發現其塊莖上殘留少許須根及未洗凈的泥沙，分析原因應為農民在半夏的采收并進行粗加工的過程中，未除盡非藥用部位(須根等)、未洗凈泥沙等其它雜質[9]，排除總灰分這一影響因素，曲靖地區栽培半夏質量符合藥用標準，可推廣半夏的家種栽培，并制定一套切實可行的管理措施以確保其質量。