臨床病毒檢驗(yàn)新技術(shù)的應(yīng)用

王世恒 黃蘋

隨著現(xiàn)代醫(yī)療水平的提升，傳統(tǒng)的病毒檢驗(yàn)方法已經(jīng)不能適用于現(xiàn)代病毒感染檢測(cè)。為確保感染病毒能被準(zhǔn)確檢測(cè)，一些新型的檢驗(yàn)技術(shù)逐漸被醫(yī)院應(yīng)用。如病毒分離培養(yǎng)、免疫法檢測(cè)、PCR檢測(cè)等。其中免疫檢驗(yàn)方法，主要通過(guò)觀察被感染機(jī)體產(chǎn)生的免疫反應(yīng)判斷病情的變化。免疫檢驗(yàn)方法能在短時(shí)間準(zhǔn)確檢測(cè)標(biāo)本中的病毒，按照抗體變化的情況確診。由此來(lái)看，免疫檢驗(yàn)新技術(shù)能有效幫助疾病中心確定感染病毒，具有較高的應(yīng)用價(jià)值。

病毒感染引起的免疫性損害

病毒出現(xiàn)在一定程度上會(huì)抑制人體的免疫功能，從而使人體的免疫病理發(fā)生改變。免疫抑制是以感染免疫細(xì)胞為媒介讓免疫分子下調(diào)，使血清中含有的免疫分子的濃度降低，從而延緩人體的免疫應(yīng)答功能。免疫損害是人體在病毒感染的情況下，出現(xiàn)的免疫應(yīng)答，屬于病理性，因此造成非免疫應(yīng)答組織發(fā)生損壞，直接對(duì)人體的器官造成破壞。病毒屬于一種微生物，需要依靠宿主細(xì)胞才能生存，也會(huì)對(duì)宿主細(xì)胞造成破壞。通過(guò)檢測(cè)病毒在感染機(jī)體后產(chǎn)生的特異性或者相關(guān)抗體以及因子等，或者直接針對(duì)病毒特異性抗原靶點(diǎn)，并對(duì)其進(jìn)行相應(yīng)檢測(cè)，最終確定病毒的類型。

病毒感染免疫檢驗(yàn)篩查方法

（一）酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)

酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)?zāi)芙Y(jié)合分析免疫反應(yīng)的特應(yīng)性與催化作用，將已知的抗原抗體利用酶做標(biāo)記，并檢測(cè)對(duì)應(yīng)的特異性結(jié)合的病毒相關(guān)抗原或抗體反應(yīng)的一種實(shí)驗(yàn)方法。酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)?zāi)軌蚋鶕?jù)不同病毒，針對(duì)性設(shè)計(jì)不同試劑盒，檢查不同病毒，比如乙型肝炎病毒、丙肝病毒、巨細(xì)胞病毒等，檢測(cè)結(jié)果較為準(zhǔn)確。在實(shí)驗(yàn)的過(guò)程中，常采用雙抗夾心法或競(jìng)爭(zhēng)法等。在早期病毒感染的檢驗(yàn)過(guò)程中，最常使用雙抗夾心辦法進(jìn)行病毒檢驗(yàn)。

（二）膠體金免疫檢測(cè)技術(shù)

膠體金技術(shù)是一種新型的免疫檢測(cè)方法，具有較強(qiáng)的特異性，操作簡(jiǎn)單，使用安全，省時(shí)省力易推廣，能夠有效應(yīng)用在臨床病毒檢測(cè)中。其原理是用膠體金做標(biāo)志物，在抗原抗體的反應(yīng)中進(jìn)行觀察。膠體金是一種較小的金顆粒，能夠在還原劑的作用下還原變色。利用膠體金能與蛋白質(zhì)相結(jié)合的特點(diǎn)，使膠體金免疫技術(shù)在多個(gè)領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用，比如免疫學(xué)、組織學(xué)等。在臨床檢測(cè)中，如HIV病毒、人流感病毒、副流感病毒和腺病毒等，常應(yīng)用膠體金技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)，對(duì)各種不同病毒進(jìn)行鑒別和診斷。

病毒檢測(cè)新技術(shù)新方法

（一）基因檢測(cè)

基因檢測(cè)主要是通過(guò)血液、其他體液或細(xì)胞對(duì)DNA進(jìn)行檢測(cè)的一種技術(shù)，可進(jìn)一步分析所含有的基因類型以及是否有基因缺陷等。基因檢測(cè)包含多種方法，如生化檢測(cè)、染色體分析、DNA分析等。基因檢測(cè)既能診斷疾病，又能預(yù)測(cè)疾病風(fēng)險(xiǎn)。如新生兒遺傳性疾病檢測(cè)、遺傳疾病和某些常見病輔助診斷等。基因檢測(cè)也可以應(yīng)用在病毒檢測(cè)方面，通過(guò)檢測(cè)病毒的基因譜，可以確定病毒的多種特性，并可根據(jù)基因特性，開發(fā)相應(yīng)的檢測(cè)試劑盒、抗病毒疫苗、針對(duì)性的藥物等。

（二）分子生物學(xué)檢測(cè)

以核酸檢測(cè)為代表的分子生物學(xué)技術(shù)，由于具有靈敏度高、錯(cuò)誤率低的特點(diǎn)成為臨床病原體感染診斷常用方法。臨床最常應(yīng)用的檢測(cè)方式為核酸檢測(cè)與蛋白質(zhì)檢測(cè)，其應(yīng)用在臨床醫(yī)學(xué)上，可為病毒的致病機(jī)理、疫苗研發(fā)和抗病毒藥物研制等方面提供基礎(chǔ)。在診斷臨床標(biāo)本時(shí)，選擇密閉一次性采樣容器，如真空采血管等，若為塑料容器不需要進(jìn)行預(yù)處理。采樣者應(yīng)注意，在操作時(shí)佩戴一次性手套。

（三）PCR檢測(cè)

聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）屬于一種用于放大擴(kuò)增特定的DNA片段的分子生物技術(shù)。熒光素、染色凝膠電泳是比較常用的檢測(cè)方法。由于PCR具有特異性強(qiáng)、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單快速的特點(diǎn)，臨床上應(yīng)用于感染性疾病、腫瘤及遺傳病的治療中。為保證PCR檢測(cè)的質(zhì)量，在臨床樣本收集的過(guò)程中，操作人員要注意操作規(guī)范，避免標(biāo)本間發(fā)生污染，操作人員也應(yīng)做好防護(hù)。樣本采集之后要放置在冰上或4℃以下的環(huán)境，因?yàn)榱鞲胁《緦?duì)熱敏感。操作人員應(yīng)注明樣本信息，避免檢測(cè)結(jié)果出錯(cuò)。

綜上所述，由于現(xiàn)代醫(yī)療檢測(cè)新技術(shù)的發(fā)展，傳統(tǒng)的病毒感染檢測(cè)技術(shù)已經(jīng)不能適用于現(xiàn)代醫(yī)療。為加強(qiáng)對(duì)新型病毒的感染檢測(cè)，醫(yī)院需要改進(jìn)病毒感染免疫實(shí)驗(yàn)方法。在臨床檢測(cè)時(shí)，雖然新型病毒檢測(cè)方式能夠確保最終的檢驗(yàn)結(jié)果，但由于人為因素的影響會(huì)導(dǎo)致最終的結(jié)果出現(xiàn)偏差。因此醫(yī)院需要進(jìn)一步加強(qiáng)醫(yī)療人員的專業(yè)能力，確保新技術(shù)能夠有效應(yīng)用，確保病毒檢測(cè)的準(zhǔn)確性。