血 尿NGAL在糖尿病腎病CKDⅢ期中的變化及意義

邢潔 蔡旭東 倪佳寧 魏升

糖尿病腎病（diabetic nephropathy，DN）是糖尿病所引起的腎臟疾病，是糖尿病常見且主要的微血管病變之一，常呈不可逆的進行性發展，是導致終末期腎病的常見原因。目前臨床上已有較多的血尿生化指標如血肌酐、尿蛋白等反映腎臟損害程度，但此類指標常對腎臟早期損害的評估不夠敏感，且不能較好預測評估漸進性的病情活動。中性粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白（NGAL）是人脂質運載蛋白家族中的一個新成員，具有結合并運輸疏水性小分子的功能，同時還與免疫應答、炎癥、信號轉導等相關［1］。研究顯示其在腎臟慢性纖維化進展過程中起重要作用，在慢性腎臟疾病中可以作為疾病發展及其嚴重程度評估的標志物。本研究旨在了解血、尿NGAL在DN患者CKDⅢ期變化的特點，分析其與此類患者臨床指標的相關性，評價其在DN疾病評估中的應用價值。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2017年6月至2019年2月本院CKDⅢ期DN患者45例（觀察組）。其中男21例，女24例；平均年齡（52.81±10.15）歲。DN的診斷及分期標準參考《糖尿病腎病診斷、辨證分型及療效評價標準》（試行）［2］制定；CKD分期標準參考美國腎臟病基金會制定的《慢性腎臟病臨床實踐指南》中慢性腎臟病腎功能分期標準［3］；排除有嚴重心、腦、肝并發癥或合并其他原發疾病以及糖尿病酮癥、酮癥酸中毒以及感染者。選取同期本院體檢健康者40例為對照組，其中男22例，女18例；平均年齡（53.56±9.67）歲。兩組年齡、性別占比等一般資料。比較差異無統計學意義（P>0.05）。

1.2 方法 （1）標本收集：①靜脈血標本收集：抽取受試者早晨空腹靜脈血，室溫放置30min，2000r/min離心機離心5min，取上清液存于-80℃冰箱。②尿液標本收集：收集受試者早晨清潔中段尿5ml，置于無致熱源及內毒素的試管中，靜置10min后取上層尿液置于無菌EP管中，凍存于-20℃冰箱。（2）檢測方法：血、尿NGAL檢測均采用酶聯免疫吸附法（ELISA），檢測試劑盒購自美國TSZ公司。具體檢測操作步驟嚴格遵循試劑盒說明書。根據所得標準吸光度值，按標準曲線依次計算各受試者血、尿標本相應的NGAL濃度。

1.3 統計學方法 采用SPSS 18.0統計軟件。計量資料以（）表示，兩組比較采用兩獨立樣本t檢驗，血尿NGAL水平與其他臨床指標的相關性分析采用線性相關分析，以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組血尿NGAL水平比較 見表1。

表1 兩組血尿NGAL水平比較（）

表1 兩組血尿NGAL水平比較（）

注：與對照組比較，*P<0.01

組別 n 血NGAL（μg/L） 尿NGAL（μg/L）觀察組 45 19.45±3.35* 6.35±0.89*對照組 40 4.23±0.72 0.62±0.06

2.2 觀察組血、尿NGAL水平與臨床指標的相關性分析 觀察組血、尿NGAL水平與血肌酐、24h尿蛋白定量、尿NAG呈正相關，與GFR、血清白蛋白呈負相關（P<0.01或P<0.05）。見表2、3。

表2 觀察組血NGAL水平與臨床指標的相關性分析

表3 觀察組尿NGAL水平與臨床指標的相關性分析

3 討論

NGAL是一種小分子量的分泌性糖蛋白，最先在被激活的中性粒細胞中發現，與基質金屬蛋白酶9有密切關系。隨著近年來研究的深入，NGAL與腎臟特別是腎小管關系密切。在生理狀態下，其可以通過腸菌素與Fe2+結合形成復合物，此復合物可通過介導鐵離子向細胞內轉運，從而促進腎祖細胞向腎小管上皮細胞分化，形成腎臟基本結構，保障腎臟的正常生長發育。而在急慢性腎臟損傷等病理情況下，NGAL可通過清除氧自由基、誘導腎小管間質中浸潤的炎癥細胞凋亡、促進腎間充質細胞轉化為腎小管上皮細胞等參與腎小管上皮細胞的修復與再生，從而使腎臟功能得以一定程度的恢復和保護。近年來已有較多的研究證實，NGAL與各種急性腎損傷（AKI）如缺血性或毒性腎損傷、造影劑腎損傷、急性藥物性腎損傷等關系密切，是早期診斷AKI有效且敏感的生物標志物之一［4］。近年研究發現，NGAL也是慢性腎臟病變的標志物，可作為有效且精準反映慢性腎臟病進展的獨立可靠指標［5］。

隨著病情的逐步發展，DN可最終導致腎功能衰竭，嚴重影響患者的生活質量和長期生存率，因此有必要對NGAL與DN的關系進行更深入的研究。Bolignano等［6］研究發現，與健康對照者比較，DN患者血、尿NGAL水平明顯增高，且與腎功能指標密切相關，且隨病情進展而升高。付文金等［7］研究表明，DN患者尿NGAL水平與尿蛋白量呈正相關，隨著尿白蛋白的排泄增加而增加，而血NGAL水平與對照組比較差異無統計學意義。童俊容等［8］研究發現，DN患者血NGAL水平隨著尿蛋白排泄率的增加而增高。目前臨床上將CKD分為5期，而CKDⅢ期是腎臟病進展過程中的關鍵時期，是CKD藥物保護治療、延緩疾病進程的關鍵節點。

本研究顯示，CKDⅢ期的DN患者血、尿NGAL水平較對照組均明顯增高，表明血、尿NGAL水平能夠敏感且有效反映患者腎臟功能的損傷。在與臨床指標的相關性方面，血、尿NGAL與24h尿蛋白定量、尿NAG、血肌酐水平呈正相關，與GFR、血清白蛋白呈負相關，提示血、尿NGAL的變化與病情平行，顯示出與腎功能指標的高度相關性，可以作為判斷DN腎損傷嚴重程度的可靠指標，可預示殘腎功能，具有一定的臨床應用前景。但本研究觀察人數相對較少，對于NGAL在DN進展過程中的檢測效應及應用價值，仍有待于更大樣本研究來進一步驗證。