半乳糖凝集素3在尿素干預眼部靜脈畸形組織中的表達情況分析

程銘 管文琦 許穎茗 張蕙 張嬋 劉紅

[摘要]目的：探討半乳糖凝集素3（Galectin-3）在尿素干預眼部靜脈畸形組織中的表達情況。方法：選擇2015年7月-2019年3月筆者醫院收治的56例眼部靜脈畸形患者作為研究組，并選擇同期入院但眼部靜脈組織正常的56例患者作為對照組，比較兩組Galectin-3水平，并觀察眼部靜脈畸形患者經尿素干預后Galectin-3水平變化。結果：研究組患者的Galectin-3蛋白陽性表達率55.36%、Galectin-3 mRNA陽性表達率62.50%顯著高于對照組，差異具有統計學意義（P<0.05）。研究組患者經尿素干預后的Galectin-3蛋白陽性表達率35.71%、Galectin-3 mRNA陽性表達率42.86%顯著低于治療前，差異具有統計學意義（P<0.05）。結論：眼部靜脈畸形組織中Galectin-3表達升高，經尿素干預可有效減輕Galectin-3水平，延緩眼部靜脈畸形侵襲發展。

[關鍵詞]眼部靜脈畸形;半乳糖凝集素3;尿素干預;表達情況;原位雜交染色法;Galectin-3 mRNA

[中圖分類號]R77? ? [文獻標志碼]A? ? [文章編號]1008-6455（2020）07-0091-03

Abstract： Objective? To investigate the expression of Galectin-3 in ocular venous malformation after urea intervention. Methods? 56 patients with ocular venous malformation admitted to our hospital from July 2015 to March 2019 were selected as the research group， and 56 patients with normal ocular venous tissue admitted to our hospital during the same period were selected as the control group. The level of Galectin-3 was compared between the two groups， and the changes of Galectin-3 in patients with ocular venous malformation were observed after urea intervention. Results? The positive expression rate of galectin-3 protein was 55.36% and the positive expression rate of galectin-3 mRNA was 62.50% in the study group， which was significantly higher than that in the control group， and the difference was statistically significant （P<0.05）. The positive expression rate of galectin-3 protein and positive expression rate of galectin-3 mRNA in the study group after urea intervention were 35.71% and 42.86%， which were significantly lower than those before treatment （P<0.05）. Conclusion? Galectin-3 expression is increased in ocular venous malformation tissues， and urea intervention can effectively reduce Galectin-3 and delay the invasion and development of ocular venous malformation.

Key words： ocular venous malformation; Galectin-3; urea intervention; expression; in situ hybridization staining; Galectin-3 mRNA

眼部靜脈畸形是一種比較罕見的先天性血管發育畸形，會呈終身漸進性發展，還會累及眼瞼與部分眼肌，嚴重時會導致眼球萎縮，造成患者視力喪失[1]。研究發現，半乳糖凝集素3（Galectin-3）在血管發生、形成中起著重要作用[2]。而尿素對于血管瘤和靜脈畸形的治療作用已有報道，發現其對于靜脈畸形可起到預防作用，減少對眼球產生進一步的傷害，且尿素屬于人體代謝產物，對于人體無明顯不良反應，在手術前使用可以讓畸形靜脈硬化[3]。因此，本研究探討Galectin-3在尿素干預眼部靜脈畸形組織中的表達情況，以期為臨床診斷、治療提供科學參考依據，現報道如下。

1? 資料和方法

1.1 一般資料：經醫學倫理委員會同意，選擇2015年7月-2019年3月筆者醫院收治的56例眼部靜脈畸形患者作為研究組，納入標準：①均經檢查符合國際脈管性疾病研究學會（International Society for the Study of Vascular Anomalies，ISSVA）提出的眼部靜脈血管畸形的診斷標準[4];②均接受手術治療;③簽署知情同意書。排除標準：①精神系統疾病者;②溝通交流障礙者;③合并其他眼部疾病者;④合并其他靜脈畸形組織者;⑤臨床資料不完整者。并選擇同期入院但眼部靜脈組織正常的56例患者作為對照組。研究組：男17例，女39例;年齡7～64歲，平均（37.42±7.10）歲。對照組：男20例，女36例;年齡9～68歲，平均（37.66±9.98）歲。兩組基礎資料比較差異無統計學意義（P>0.05），均衡可比。

1.2 方法：對照組患者手術前均不接受尿素注射治療。研究組患者接受每日尿素局部注射治療，連續治療7～10d，再開展手術治療。在病理科收集眼眶靜脈畸形標本，所有病理標本均常規石蠟包埋后制成3μm、6μm厚連續切片，取1張HE染色復查診斷。其余切片分別進行原位雜交染色、免疫組織化學（Galectin-3蛋白表達采用免疫組織化學法檢測，Galectin-3 mRNA表達采用原位雜交染色法檢測）。切片常規脫蠟至水，體積分數在3%水在室溫環境下處理12min，將內源性過氧化物酶滅活，然后再使用檸檬酸與新鮮配置的胃蛋白酶在室溫環境下消化15min，將DNA結合蛋白去除掉。每張切片需要加入20μl預雜交液，再經過洗滌之后，加入封閉液37℃環境下30min。另外加入生物素化鼠抗地高辛，加入原位雜交專用PBS液洗滌之后，再加入SABC，接受類似前步驟的洗滌，觀察DAB顯色情況。

1.3 統計學分析：采用SPSS 25.0計算數據，使用“%”代表計數資料，采用χ2檢驗，以P<0.05表示差異具有統計學意義。

2? 結果

2.1 兩組Galectin-3蛋白、Galectin-3 mRNA干預前陽性表達率比較：研究組患者的Galectin-3蛋白陽性表達率為55.36%、Galectin-3 mRNA陽性表達率為62.5%顯著高于對照組，差異具有統計學意義（P<0.05）。見表1。Galectin-3蛋白表達情況見圖1，研究組Galectin-3蛋白表達陽性顆粒主要表達于細胞質以及細胞核中，而對照組的蛋白表達少數在細胞核處。

2.2 研究組尿素干預前后Galectin-3蛋白、Galectin-3 mRNA表達水平比較：研究組患者經尿素干預后的Galectin-3蛋白陽性表達率35.71%、Galectin-3 mRNA陽性表達率42.86%顯著低于治療前，差異具有統計學意義（P<0.05）。見表2。

3? 討論

常見的眶內血管畸形是靜脈性血管畸形，也稱靜脈性血管瘤。因病變范圍常較廣泛，CT顯示眶內病變呈界限清楚，形狀不規則，且范圍較廣泛的高密度占位病變，但也有單個的血管畸形性病變[5]。眼靜脈性血管畸形因其基本病理組織學成分是為管壁厚薄不一的靜脈團塊，往往被混同于靜脈畸形（如靜脈曲張），又由于腫物內有許多高度擴張的薄壁血管而被病理學家診為海綿狀血管瘤。靜脈性血管瘤在國人中較為多見，世界衛生組織（WHO）腫瘤分類的血管瘤中包括靜脈性血管瘤，并稱靜脈性血管瘤是一種由不規則形的中等至大的血管，主要以靜脈型血管所構成的良性病變，可伴有散在的平滑肌纖維及脂肪組織?？魞褥o脈血管瘤自有其特點，與發生于其他部位者有所不同[6]。靜脈管徑較小，纖維組織多，但基本病理組織學改變應屬于這一范疇。也曾以蔓狀血管瘤來命名此類腫瘤，蔓狀血管瘤雖有動脈性、靜脈性及動、靜脈之分，但一般都意味著動、靜脈并存，且有直接交通。病理學檢查該腫瘤缺乏包膜，在多量的纖維組織中有豐富的小靜脈，有時被診斷為纖維血管瘤[7]。

半乳糖凝集素（Galectin）是凝集素家族中的一員，Galectin家族的蛋白都具有識別并結合B-半乳糖苷的特點，現已發現十多個成員，并按發現的時間先后順序依次命名為Galectin-1、Galectin-2…，其中對Galectin-3的研究最為廣泛，人Galectin-3基因由6個外顯子和5個內含子組成，長約17kb，Galectin-3具有一個獨特的嵌合體結構，包括一個長的氨基末端結構域和羧基末端的單一碳水化合物識別結構域以及兩者之間的脯氨酸、甘氨酸、酪氨酸富含區的重復膠原樣序列構成.Galectin-3首先發現于巨噬細胞中，主要定位于胞核、胞質，它的表達取決于細胞增生的不同階段，當細胞處于靜止狀態時主要位于胞質，當細胞位于增殖狀態時則主要位于胞核，其通過非典型途徑分泌到胞外組織間隙[8]。Galectin-3也廣泛分布于各種正常組織和腫瘤細胞，參與多種生理和病理過程，包括細胞生長和凋亡、細胞黏附及新生血管形成和腫瘤浸潤與轉移等，被稱為腫瘤相關蛋白[9]。有多項研究報道，Galectin-3能夠參與到血管形成中，且能夠調節細胞功能[10-11]。喬軍波等認為，Galectin-3在眼部病變中起著重要作用，能夠減輕缺血誘導下眼部視網膜發生變性。本研究結果中，研究組患者的Galectin-3蛋白陽性表達率、Galectin-3 mRNA陽性表達率顯著高于對照組（P<0.05）。本研究結果與相關研究結果相似，進一步說明Galectin-3在眼部靜脈畸形組織中呈高表達[12]。表2中，研究組患者經尿素干預后的Galectin-3蛋白陽性表達率、Galectin-3 mRNA陽性表達率顯著低于治療前（P<0.05）。結果說明，經尿素干預能夠有效降低眼部靜脈畸形組織中Galectin-3表達。

綜上所述，眼部靜脈畸形組織中Galectin-3表達升高，經尿素干預可有效減輕Galectin-3促進眼部靜脈畸形侵襲發展的能力。

[參考文獻]

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[2]李金，劉秋雨，喬軍波.半乳糖凝集素3在尿素干預眼部靜脈畸形組織中的表達[J].中華整形外科雜志，2017，33（4）：285-289.

[3]李金，柴昌，王衛群，等.探討尿素注射聯合手術治療眼部動靜脈血管畸形伴動靜脈瘺[J].中華整形外科雜志， 2018，34（2）：128-132.

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[12]宮蓓蕾，胡俊鋒，趙成嶺，等.半乳糖凝集素-1在肺癌中的表達及其臨床價值[J].包頭醫學院學報，2019，10（6）：21-20.

[收稿日期]2019-07-29

本文引用格式：程銘，管文琦，許穎茗，等.半乳糖凝集素3在尿素干預眼部靜脈畸形組織中的表達情況分析[J].中國美容醫學，2020，29（7）：91-93.