中草藥添加劑對肉牛免疫相關指標的影響

黃嶸崢,楊俊杰,蔣烈戈,蘇 政

(新疆生產建設兵團第九師畜牧科學研究所,新疆額敏834600)

飼料添加劑一直以來都是養殖業的點睛之筆，隨著抗生素的危害逐漸被認識，新的天然環保飼料添加劑逐步進入大眾視野，中草藥添加劑便是其中一種。中草藥是純天然的植物產品，作為飼料添加劑無藥物殘留，無抗藥性，藥效不減，能提高機體免疫系統功能，增強免疫力，通過對動物機體的整體調節，使之向有利于健康方向發展[1]。中草藥添加劑配伍較多，藥效種類豐富，能夠調節動物免疫性能，提高機體抗氧化能力[2]，目前在奶牛、家禽、豬等動物上都有較深入的研究，對肉牛中草藥添加劑研究較少，本試驗選取黨參、黃芪、熟地、甘草、柴胡等多味中草藥組成配伍，旨在研究其對肉牛免疫機能的影響，為該產品進一步應用提供試驗數據。

1 材料方法

1.1 試驗時間與地點 試驗時間于2018年8-11月進行，其中預飼期15 d，試驗期90 d。試驗選擇在新疆生產建設兵團第九師第170團牧泰新養殖合作社進行。

1.2 試驗材料 中草藥添加劑由黨參、黃芪、熟地、甘草、柴胡、魚腥草、青蒿、大青葉、陳皮經粉碎過20目篩后按一定比例混合組成。

1.3 試驗設計與飼養管理 試驗牛由第170團牧泰新養殖合作社提供，隨機選取體重體況相近的肉牛20頭，每組5頭，分為對照組，試驗I組、II組、Ⅲ組。分為4個時期，每期30 d(預試期30 d，試驗期90 d)，飼喂前驅蟲保健，采取栓系飼養模式，全混合日糧飼喂，每天飼喂2次(9:00和17:00)。試驗期保證肉牛自由飲水采食。

1.4 試驗日糧 以肉牛現有日糧為基礎日糧，其組成與營養水平見表1。對照組飼喂基礎日糧，試驗I組、II組、Ⅲ組分別在基礎日糧中添加130、150 g/d和180 g/d中草藥添加劑。每日(16:40)飼喂1次。

1.5 樣品采集 分別于試驗開始第30、60、90天采血，采用頸靜脈穿刺采血，抽取1～2 mL血液，采血后注入10 mL采血管，于室溫下自然凝固10～20 min，離心15 min(3 000 r/min)。收集血清，于4 ℃冰箱保存。

1.6 免疫指標測定 免疫指標CD4+、CD8+、IL-2測定采用雙抗體夾心法酶聯免疫吸附法(ELISA)。免疫球蛋白試劑盒均由北京言必信科技有限公司提供，操作方法按說明書進行。

1.7 數據處理 數據采用SPSS 25.0軟件進行單因素方差分析，用LSD法進行多重比較。數據用平均數±標準差表示。

表1 基礎日糧的組成及營養水平(干物質基礎)

2 結果

2.1 中草藥添加劑對肉牛免疫性能影響 由表2可知，試驗30 d，試驗Ⅲ組肉牛血清中IL-2濃度最高，為(212.15±26.18)pg/mL，顯著高于對照組(P<0.05)，試驗I、II組肉牛血清中IL-2濃度高于對照組，但差異不顯著(P>0.05)，試驗Ⅲ組肉牛血清中CD4+含量為(58.05±4.36)ng/mL，顯著高于對照組和試驗I組(P<0.05)，CD8+含量為(14.21±4.03)ng/mL，顯著低于對照組(P<0.05)，CD4+/CD8+值為5.12±1.47，顯著高于對照組、試驗I組、試驗II組(P<0.05)；試驗60 d，試驗Ⅲ組肉牛血清中IL-2濃度顯著高于對照組、試驗I組、試驗II組(P<0.05)，試驗Ⅲ組CD4+濃度顯著高于對照組(P<0.05)，CD8+濃度低于對照組，差異顯著(P<0.05)，CD4+/CD8+值顯著高于對照組(P<0.05)；試驗90 d，試驗I組肉牛血清中IL-2濃度顯著高于對照組(P<0.05)，試驗I、II組肉牛血清中IL-2濃度高于對照組，但差異不顯著(P>0.05)，試驗I組CD4+含量為(40.32±2.10)ng/mL，顯著高于對照組(P<0.05)，試驗Ⅲ組高于試驗II組，但差異不顯著(P>0.05)，試驗I組CD8+含量為(14.58±3.22)ng/mL，顯著低于對照組(P<0.05)，CD4+/CD8+值顯著高于對照組(P<0.05)。

表2 復方中草藥添加劑對肉牛血清IL-2、CD4+、CD8+濃度的影響

3 討論

本試驗證明復方中草藥添加劑能夠提高肉牛血清中IL-2、CD4+的含量及CD4+/CD8+值，從而提高動物機體的免疫力。結果顯示，隨著飼喂天數的增加，復方中草藥添加劑的量應該由高轉低。

白細胞介素-2 ( IL-2 )是由活化T淋巴細胞產生的一種重要的細胞因子，能激活T細胞并促進 B細胞分化、分泌抗體，誘導產生干擾素，增強單核細胞以及自然殺傷細胞(NK)的殺傷活性，在機體的免疫反應中具有重要的調節作用[3]。

孫啟通過對肉雞飼喂不同劑量不同組方的中草藥添加劑發現，中草藥添加劑能夠顯著提高肉雞血清中IL-2含量，且同一組方，隨著飼喂濃度的升高，肉雞血清中IL-2含量也出現升高的趨勢，但隨著飼喂時間的上升，高濃度組添加劑的促進效果反而低于低濃度組[4]。這與本試驗的結果一致，試驗第30天試驗Ⅲ組肉牛血清IL-2濃度比對照組提高了27.12%，差異顯著(P<0.05)，試驗I組提高了19.46%，差異不顯著(P>0.05)；試驗第90天，試驗Ⅲ組提高了13.14%，差異不顯著(P>0.05)，試驗I組提高了22.20%，差異顯著(P<0.05)。說明隨著試驗動物的生長發育，中草藥添加劑的飼喂濃度應該由高到低，才能顯著提高動物血清中IL-2的含量，從而改善動物機體的免疫性能。本試驗數據顯示，中草藥添加劑組的肉牛血清中IL-2的含量顯著高于未添加組。說明中草藥添加劑能夠促進機體血清中IL-2的含量。這與賈玉剛等[5]的報道一致。從整體情況來看，隨著試驗天數的增加，肉牛血清中IL-2的含量逐漸減少，這可能與IL-2在機體內免疫起到雙向調節的作用有關，相比于體外試驗，IL-2在機體內的調節作用更為復雜，與各型免疫細胞所處的狀態，IL-2自身的來源、濃度和作用時間等因素都密切相關[6]。

CD4+、CD8+是T淋巴細胞的表面抗原，CD4+主要分布在輔助性T淋巴細胞表面，主要參與細胞的免疫分化，協調免疫細胞之間的相互作用。因此，當CD4+T細胞比例增高時，能夠快速啟動免疫系統，消滅抗原，表面機體免疫性能增強。CD8+分布在抑制性T淋巴細胞和細胞毒性T淋巴細胞表面，其主要功能是清除被感染的細胞。當CD8+T細胞比例升高時，說明機體內病原微生物數量升高，CD8+T細胞需要大量結合受感染的細胞，表明機體此時免疫性能下降，受感染嚴重[7]。機體內CD4+/CD8+值維持在一個動態平衡，一旦失衡則會導致機體免疫系統發生改變。CD4+/CD8+值升高代表機體免疫性能增強，反之則減弱[8]。本試驗數據顯示，飼喂復方中草藥添加劑的肉牛血清中CD4+含量出現升高的趨勢，CD8+含量出現降低的趨勢，且CD4+/CD8+值顯著高于對照組。這與其他學者的研究一致[9-10]。說明中草藥添加劑能夠顯著提高機體血清中CD4+/CD8+值，改善機體免疫力。