紅細胞微粒水平與AMI冠狀動脈血管病變程度的相關性

程慶榮，李結華

(1.寧國市人民醫院急診/全科醫學科，安徽 寧國 242300；2.安徽醫科大學第一附屬醫院全科醫學科，安徽 合肥 230022)

急性心肌梗死(acute myocardial infarction，AMI)是由于冠狀動脈粥樣硬化斑塊病變破裂形成血栓引起冠狀動脈完全或不完全供血中斷導致心肌細胞嚴重持久的缺血缺氧最終造成心肌細胞壞死[1]。研究發現，存在動脈粥樣破裂病變患者的冠狀動脈血液中發現具備促凝血活性的微粒[2]，其是由進入細胞外層的細胞膜磷脂酰絲氨酸以出芽方式形成的磷脂卵泡，直徑在0.1～1 μm之間，根據來源細胞分為血小板微粒、內皮細胞微粒及紅細胞微粒[3]，學者指出，各種病理狀態會出現微粒水平明顯升高，參與疾病病理生理過程[2,4]，如血小板微粒與凝血及血栓形成相關，參與急性冠脈綜合征(acute coronary syndrome，ACS)，同時與ACS患者病情及近期臨床預后明顯相關[5]，尼菲拉·甫拉提等[6]學者發現，紅細胞微粒(red blood cell microparticles，RMPs)水平在ACS中顯著升高，對于病情預測有一定價值，但團隊未進一步針對RMPs對AMI人群臨床價值開展相關研究，本文分析127例AMI患者RMPs與臨床特征及病情之間的關系，報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

隨機連續性納入2016年1月至2019年12月于本院心內科施行急診PCI術的AMI患者共127例。其中男性81例，女性46例，年齡介于52～83歲，平均(61.25±10.43)歲。AMI診斷標準參照中華醫師協會《急性冠脈綜合征急診快速診療指南》制定[7]，具體如下：(1)血清心肌損傷指標心肌肌鈣蛋白I(cardiac troponin I，cTnI)及肌酸激酶同工酶(creatine kinase-MB，CK-MB)超過正常值兩倍及以上；(2)胸痛持續時間超過30 min；(3)心電圖出現動態改變；且均經冠狀動脈造影術證實。入組標準：以AMI為主要診斷且入院后接受急診PCI術者。排除標準：(1)合并陳舊性心肌梗死或合并PCI病史或合并其他類型心肌病者(如擴張型心肌病或肥厚型心肌病等)；(2)反復發作心衰且癥狀控制不佳者；(3)合并嚴重肝腎疾病及惡性腫瘤等不適宜入組者。

所有患者診療過程經本院醫學倫理委員會審批通過，患者入組前均獲得充分知情同意，簽署相關知情同意書。收集患者臨床基本資料，包括年齡、性別、合并慢性疾病(包括糖尿病、高血壓、高脂血癥等)等情況。兩組患者臨床基本資料間差異無統計學意義，具有可比性。

1.2 實驗室檢測指標

1.2.1 紅細胞源微粒的檢測 取出標本室溫解凍備用，在4 ℃環境下以23 000 g離心20 min后抽提紅細胞小球，后反復離心獲取紅細胞源微粒，即可得到紅細胞源微粒；取25 μL紅細胞源微粒標本加入100 μL氯化鈣、100 μL Binding-Buffer及5 μL Annexin V混勻后放置室溫暗處孵育20 min，加入紅細胞特異性抗體Glycophorine A CD235a 2.5 μL，充分振蕩混勻孵育20 min后加入PBS緩沖液175 μL通過流式細胞儀(美國BD公司，FAC ScaliburTM)進行定量分析；檢測RMPs水平，依據RMPs中位數將患者分為高RMPs組及低RMPs組。

1.2.2 常規實驗室指標檢測 抽取受試者空腹血用于常規實驗室指標檢測，包括D-二聚體(檢測方法為增強免疫比濁法)、cTnI(檢測方法為酶促化學發光法)、CK-MB(檢測方法為免疫化學法)及血脂(低密度脂蛋白膽固醇(Low-density lipoprotein cholesterol，LDL-C)及高密度脂蛋白膽固醇(high-density lipoprotein cholesterol，HDL-C))(檢測方法為選擇性抑制法)。

1.2.3 冠狀動脈病變血管及Gensini積分 所有患者均由兩名專科高年資心內科專業醫師經右側橈動脈或股動脈行冠狀動脈造影術。病變血管定義為：右冠狀動脈主干、左主干、左前降支、左回旋支及其主要分支中至少1支血管狹窄程度超過50%[8]，兩支血管病變或左主干病變定義為多支血管病變。Gensini總積分根據狹窄程度及病變部位積分計算；狹窄程度：1%～25%計1分，26%～50%計2分，51%～75%計4分，76%～90%計8分，91%～99%計32分；病變部位：左主干2.5分，左前降支近、中及遠段分別為2.5分、1.5分及1分，回旋支近段及遠段分別為2.5及1.0分，右冠狀動脈為1.0分，小分支為0.5分[9-10]。

1.3 統計學處理

數據通過SPSS 13.0統計軟件包處理，連續分布的計量資料以均數±標準差的形式表示，兩組間差異性比較采用兩個獨立樣本t檢驗；定性計數資料以率或構成比形式表示，兩組間差異性比較采用非參數秩和檢驗。臨床指標相關性通過Pearson相關性分析，多因素Logistic回歸分析各指標與Gensini積分的關系。P<0.05為差異具有統計學意義。

2 結 果

2.1 兩組患者臨床資料

與低RMPs組比較，高RMPs組D-二聚體、LDL-C、多支血管病變比例及cTnI升高，HDL-C降低，差異具有統計學意義，見表1。

表1 兩組患者臨床資料比較

2.2 RMPs組間差異比較

高RMPs組Gensini積分顯著高于低RMPs組[(39.52±10.19)分vs(28.86±11.34)分，t=5.574，P<0.01]；同時單支冠狀動脈血管病變患者RMPs水平顯著低于多支冠狀動脈血管病變[(15.82±7.41)% vs (23.17±6.59)%，t=5.903，P<0.01]。

2.3 RMPs與相關臨床指標的關系

Pearson相關性分析發現，RMPs與LDL-C(r=0.413，P=0.029)及Gensini積分(r=0.359，P<0.01)呈正相關關系，與HDL-C呈負相關關系(r=-0.612，P=0.033)，見圖1。但RPMs與D-二聚體及HDL-C無顯著相關性。

圖1 RMPs與臨床指標的關系A：RMPs與LDL-C的相關性；B：RMPs與Gensini積分相關性；C：RMPs與HDL-C的相關性

2.4 多因素Logistic回歸分析各指標與Gensini積分的關系

以Gensini積分作為因變量，RMPs、LDL-C、HDL-C、cTnI等臨床指標作為自變量進行多因素Logistic回歸分析發現，RMPs、cTnI及HDL-C與Gensini積分有相關性，其優勢比(Odds ratio，OR)(95%CI)分別為1.52(0.39-5.85)，1.13(0.56-2.30)及0.70(0.16-0.32)，差異均具有統計學意義，見表2。

表2 多因素Logistic回歸分析各指標與Gensini積分的相關性

3 討 論

紅細胞微粒(RMPs)是由紅細胞受到各類刺激發生損傷出現凋亡時細胞膜丟失的磷脂釋放，目前已被證實存在于粥樣斑塊中發揮激活凝血系統作用。RMPs參與血栓性疾病的機制，包括以下幾個方面：(1)RMPs中的鐵離子加速一氧化氮(nitric oxide，NO)代謝清除，降低了NO的生物利用度進而發揮促凝作用[11]；(2)紅細胞釋放RMPs后造成其膜內側的磷脂酰絲氨酸(hosphatidylserine，PS)外翻，從而更加容易結合凝血因子，促進凝血反應[12]；(3)同時RMPs表面表達的TF有較強的與凝血因子或活化的凝血因子結合力，啟動凝血[13]。RMPs被發現存在于血管粥樣斑塊病變中，這與斑塊內部的小血管破裂有關，參與心血管疾病如急性冠脈綜合征的發生發展[14]。

研究發現，RMPs不僅促進凝血過程形成血栓參與AMI，同時可增加患者循環D-二聚體水平引起血液高凝狀態[15]。本研究同樣發現，RMPs水平在AMI患者外周血中顯著升高，同時與低RMPs組相比，高RMPs組患者D-二聚體、cTnI表達增加，說明提示RMPs可能與機體高凝狀態及心肌損傷面積存在關系。此外，本文發現高RMPs組Gensini積分顯著高于低RMPs組，單支冠狀動脈血管病變組RMPs水平顯著低于多支冠狀動脈血管病變，說明RMPs與冠狀動脈血管病變有一定的關聯。

LDL-C水平增加是冠心病發病風險及AMI患者預后不良的主要因素，而HDL-C則是血管的保護性因素，Pearson法顯示，RMPs與LDL-C呈正相關關系，與HDL-C呈負相關關系，與反應血管病變程度的指標Gensini積分呈正相關關系。以上結果均提示RMPs可能通過干預機體脂質代謝，參與冠心病患者冠狀動脈血管粥樣硬化病變過程，加劇了血管病變程度，本文通過多因素Logistic回歸分析也證實了上述假設，RMPs、cTnI及HDL-C與Gensini積分有相關性。

綜上所述，RMPs是潛在的冠狀動脈血管病變獨立危險因素，有利于預測AMI病情體系，但單中心及樣本量較小是本研究的局限所在，同時未進一步探討RMPs與AMI患者臨床預后的相關性，擬后續開展相關研究闡明上述問題。